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文檔簡介
1、[目的]脂肪酸可分為飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸三大類。大量研究證實(shí),食物中脂肪酸的種類、比例與人體健康密切相關(guān)。紅細(xì)胞膜脂肪酸種類的組成,特別是ω-6和ω-3多不飽和脂肪酸之間的比例,可以有效反映人體脂肪酸飲食的變化,有望成為脂類相關(guān)疾病(如心血管疾病,乳腺癌等)的生物指標(biāo)之一。本課題從脂肪酸,特別是多不飽和脂肪酸對人體的營養(yǎng)價(jià)值出發(fā),擬建立生物樣品脂肪酸檢測系統(tǒng),討論牛奶脂肪酸的價(jià)值;從紅細(xì)胞膜脂肪酸的角度探討冠心病、
2、乳腺癌的致病機(jī)理,為人們脂肪酸飲食提供科學(xué)指導(dǎo)。 [方法](1)脂肪酸抽提,甲酯化一步法; (2)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測技術(shù); (3)脂肪酸檢測的方法學(xué)評(píng)價(jià):儀器重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn),對照實(shí)驗(yàn),抽提方法重復(fù)性實(shí)驗(yàn),回收實(shí)驗(yàn)等; (4)氣相色譜-質(zhì)譜定性定量方法檢測牛奶、紅細(xì)胞膜脂肪酸甲酯; (5)全自動(dòng)生化分析儀檢測血清脂蛋白。 [結(jié)果](1)氣相色譜-質(zhì)譜可以在24分鐘內(nèi)把滿足實(shí)驗(yàn)要求的脂肪酸甲酯
3、分離并鑒定出來;對照實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示C17:0作為定量分析的內(nèi)標(biāo)物;DB-WAX色譜柱對大部分脂肪酸峰的有效塔板數(shù)為104~106;分離度顯示儀器對相鄰色譜峰的分辨率比較好;牛奶樣品重現(xiàn)性試驗(yàn)顯示脂肪酸變異系數(shù)為2.31%~9.81%,儀器重現(xiàn)性變異系數(shù)為1.15%~5.68%,回收率為84.2%~103.4%。 (2)國產(chǎn)全脂和酸牛奶都含有相同種類的16種脂肪酸,低脂牛奶含13種;三種國產(chǎn)牛奶中,酸牛奶總脂肪酸的含量最低。不同類型
4、牛奶脂肪酸的比例不均衡:飽和脂肪酸的含量最高,約占70%;多不飽和脂肪酸的含量最低,僅為3%~7%;除了低脂牛奶外,全脂牛奶和酸牛奶的ω-6/ω-3脂肪酸比率為2~4。 (3)湖光牛奶各類脂肪酸的比例不均衡,平均飽和脂肪酸∶單不飽和脂肪酸∶多不飽和脂肪酸為11.80∶4.38∶1,飽和脂肪酸的含量最高,達(dá)到69%;多不飽和脂肪酸的含量最低,僅為4%~7%;平均ω-6/ω-3脂肪酸比率為2.30。 (4)紅細(xì)胞膜脂肪酸改良
5、實(shí)驗(yàn)中,簡單方法所測的飽和脂肪酸(t=-3.212,P=0.033<0.05)和多不飽和脂肪酸(t=-6.472,P=0.003<0.01)的絕對含量明顯比傳統(tǒng)方法的要高,單不飽和脂肪酸(t=-2.445,P=0.071>0.05)的絕對含量沒有差別;兩種方法所得的脂肪酸相對含量沒有顯著性差別,重現(xiàn)性試驗(yàn)各脂肪酸CV均小于20%;簡單方法所測得脂肪酸回收率為87.8%~110.7%。 (5)乳腺癌病人紅細(xì)胞膜平均的ω-6/ω-3
6、脂肪酸比值為3.32∶1,與正常比值1∶1進(jìn)行比較,差異有非常顯著性(t=10.371,P<0.01);平均的飽和脂肪酸∶單不飽和脂肪酸∶多不飽和脂肪酸為3.73∶1∶2.09。 (6)冠心病人紅細(xì)胞膜平均的ω-6/ω-3脂肪酸比值為3.92∶1,與正常比值1∶1進(jìn)行WILCOXON配對法檢驗(yàn),差異有非常顯著性(t=465,P<0.01);ω-6/ω-3脂肪酸比率分別與血清中甘油三脂和極低密度脂蛋白成線性相關(guān),Spearman相
7、關(guān)系數(shù)分別為0.42924和0.42577;回歸方程分別為Y=2.94607+0.82021X和Y=2.96537+1.79267X。平均的SFA∶MUFA∶PUFA為3.35∶1∶2.16,特別是飽和脂肪酸的比例占了總脂肪酸含量的50%。 [結(jié)論]本研究建立的脂肪酸檢測系統(tǒng)高效易行,準(zhǔn)確可靠,節(jié)省時(shí)間,適合大標(biāo)本量的檢測。有必要優(yōu)化牛奶脂肪酸的組分以滿足人體的營養(yǎng)需求。乳腺癌,冠心病人紅細(xì)胞膜中ω-6/ω-3脂肪酸比值與該疾病
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