臨床血細胞膜脂肪酸譜檢測方法研究.pdf

1、測定生物體內(nèi)脂肪酸含量一直是臨床研究以及脂質(zhì)組學(xué)研究的重點。脂肪酸在人體內(nèi)存在游離態(tài)與非游離態(tài)兩種形式，而且碳鏈長度由八個碳到二十六個碳，這其中又存在大量的順反異構(gòu)體，這都給全面檢測脂肪酸含量增加了難度。血清中脂肪酸含量被認為可以反映短期內(nèi)脂肪酸代謝狀況，而研究者也報道了紅細胞膜上的脂肪酸含量更能反映人體內(nèi)長期脂肪酸代謝狀況。但白細胞膜上的脂肪酸與血小板膜上的脂肪酸含量以及代謝狀況分析卻未見報道。本論文從血細胞分離出發(fā)，建立了一整套檢測

2、細胞膜脂肪酸含量的方法，并對44位健康志愿者的血樣進行了血細胞膜脂肪酸含量分析。具體結(jié)論如下:
　　1、在Ficoll梯度密度離心分離法的基礎(chǔ)上，建立了血細胞分離方法。血細胞分離效果好，通過加入羥乙基淀粉，HEPES等試劑，優(yōu)化了分離步驟，解決了分離出的白細胞與血小板中紅細胞污染的問題。
　　2、比較了TG-WAX色譜柱與SP-2560色譜柱兩種極性色譜柱對復(fù)雜脂肪酸甲酯組分分離能力，結(jié)果顯示，利用TG-WAX色譜柱分離脂肪

3、酸甲酯時，幾種順反異構(gòu)體不能有效分離。但TG-WAX色譜柱的柱長短，當分析組分不復(fù)雜時，利用其進行檢測工作可以縮短分析時間。SP-2560色譜柱對復(fù)雜脂肪酸甲酯組分的分離效果較好，滿足本論文分離要求。本論文應(yīng)用SP-2560色譜柱進行了一系列檢測方法學(xué)驗證工作，保證檢測方法的準確性。同時對衍生方法也進行了準確性，溫度性考察。
　　3、對來自北京，長沙兩地的健康志愿者進行脂肪酸檢測分析，總結(jié)了健康27種人紅細胞膜，白細胞膜，血小板膜