耐力訓(xùn)練對(duì)兔心房肌細(xì)胞IK1及IKAch的影響及在運(yùn)動(dòng)相關(guān)心房顫動(dòng)發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、目的：
　　心房顫動(dòng)（房顫）為臨床上最常見的快速型心律失常之一。長(zhǎng)時(shí)間、高強(qiáng)度的耐力訓(xùn)練可增加房顫的發(fā)生率。但目前對(duì)耐力訓(xùn)練導(dǎo)致心房電重構(gòu)的機(jī)制所知極少。接受耐力訓(xùn)練者可出現(xiàn)心房增大、迷走神經(jīng)張力增高，我們提出耐力訓(xùn)練導(dǎo)致IK1和IKAch的功能改變與房顫的發(fā)生有關(guān)。并從四個(gè)方面進(jìn)行驗(yàn)證：1.建立不同強(qiáng)度的耐力訓(xùn)練觀察心房形態(tài)學(xué)及心率的改變；2.對(duì)離體整體心臟分別應(yīng)用IK1及IKAch激動(dòng)劑和阻斷劑前后比較房顫誘發(fā)閾值及相關(guān)電生理

2、參數(shù)的變化；3.應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)測(cè)定IK1、IKAch功能的變化程度，明確以上兩個(gè)通道在運(yùn)動(dòng)耐力相關(guān)的房顫發(fā)生中的作用；4.進(jìn)而測(cè)定編碼IK1及IKAch基因mRNA的變化，明確離子流變化的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。綜合以上結(jié)果，以期探尋出接受耐力訓(xùn)練者易患房顫的電生理機(jī)制，篩選防治藥物。
　　方法：
　　42只健康成年新西蘭大耳白兔，隨機(jī)分為對(duì)照組（n=14）、中強(qiáng)度組（n=14）、高強(qiáng)度組（n=14），對(duì)照組不進(jìn)行任何訓(xùn)練，中

3、強(qiáng)度組和高強(qiáng)度組在兔實(shí)驗(yàn)跑臺(tái)下進(jìn)行不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)，每天1小時(shí)或一次性力竭（不足1小時(shí)），每周5天，持續(xù)12周（第一周為適應(yīng)性訓(xùn)練）。每組8只實(shí)驗(yàn)兔，于運(yùn)動(dòng)前、運(yùn)動(dòng)后8周、12周通過(guò)超聲心動(dòng)圖檢測(cè)各組兔心房大小、測(cè)定固有心率（IHR）及基礎(chǔ)心率；造模成功后即運(yùn)動(dòng)結(jié)束后，在全麻下取出實(shí)驗(yàn)兔心臟，采用離體心臟Langendorff系統(tǒng)進(jìn)行灌流，采用乙酰膽堿誘發(fā)的房顫模型，給予不同濃度的氯化鋇（IK1抑制劑）、阿托品（IKAch抑制劑），分別記錄

4、相應(yīng)的90％動(dòng)作電位時(shí)程、心房有效不應(yīng)期等電生理參數(shù)，行心房早搏程序刺激（S1S2）誘發(fā)房顫，并觀察房顫的誘發(fā)率。灌流完后剪取實(shí)驗(yàn)兔左、右心房，經(jīng)液氮固定并保存后行PT-PCR檢測(cè)，以左、右房心肌組織分別觀察各組IK1通道Kir2.1、Kir2.2及IKAch通道Kir3.1、Kir3.4的基因表達(dá)。其余每組6只實(shí)驗(yàn)兔，分離左、右心房肌細(xì)胞采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，觀察各組實(shí)驗(yàn)兔IK1、IKAch電流密度的差別。
　　結(jié)果：
　

5、?。?）模型的建立：與對(duì)照組比較，中強(qiáng)度組和高強(qiáng)度組左、右房前后徑在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練8周后均增加，12周后也增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。與中強(qiáng)度組比較，高強(qiáng)度組左、右房前后徑在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練8周后均增加，12周后也增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。與對(duì)照組比較，中強(qiáng)度組（45%vs.60%）和高強(qiáng)度組（45%vs.90%）房顫發(fā)生率增加，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。
　?。?）心率：運(yùn)動(dòng)前后對(duì)照組兔靜息心率、I

6、HR和心臟離體心率未發(fā)生顯著性變化（P?0.05），中、高強(qiáng)度組運(yùn)動(dòng)后兔靜息心率、IHR及心臟離體心率較運(yùn)動(dòng)前顯著降低（P<0.05）。
　?。?）電生理特性及房顫誘發(fā)率：在Ach作用下房顫誘發(fā)率高強(qiáng)度組明顯高與中強(qiáng)度組和對(duì)照組（均P<0.05）。各組實(shí)驗(yàn)兔，在Ach+不同濃度的阿托品和Ach+不同濃度B aCL2作用下，兔心房肌ADP90和AERP較Ach單獨(dú)作用均顯著延長(zhǎng)（P<0.05），房顫的誘發(fā)率均顯著降低（P<0.05）

7、，且隨著濃度的增加房顫有誘發(fā)率逐漸降低；其中高強(qiáng)度組兔心房肌ADP90和AERP顯著短于其他兩組（P<0.05），同時(shí)房顫誘發(fā)率顯著高于其他兩組（P<0.05）。
　?。?）膜片鉗結(jié)果比較：左房高強(qiáng)度組IKAch電流密度增加（P<0.003，vs對(duì)照組及中強(qiáng)度組），中強(qiáng)度組在+50mV時(shí)電流密度增大（P=0.001 vs.對(duì)照組）；右房高強(qiáng)度組IKAch電流密度增加（P<0.002，vs對(duì)照組及中強(qiáng)度組）。
　?。?）分子生

8、物學(xué)比較：高強(qiáng)度組較對(duì)照組及中強(qiáng)度組：左、右心房組織Kir2.1和Kir2.2的mRNA表達(dá)明顯上調(diào)（P<0.05），中強(qiáng)度組較對(duì)照組:左房組織Kir2.1的mRNA表達(dá)增高（P<0.05）；Kir3.1和Kir3.4的 mRNA表達(dá)左、右心房組織高強(qiáng)度組較對(duì)照組顯著增高（P<0.04），在左房kir3.1的mRNA的表達(dá)中強(qiáng)度組較對(duì)照組增高（P=0.01）， kir3.4的mRNA的表達(dá)較高強(qiáng)度組明顯高于中強(qiáng)度組。
　　結(jié)論：<