口腔干預(yù)對(duì)糖尿病牙周炎大鼠HbA1C水平及頸動(dòng)脈血管組織的影響.pdf

1、目的:
　　通過(guò)構(gòu)建2型糖尿病合并慢性牙周炎SD大鼠模型，觀察其頸動(dòng)脈血管病理改變，檢測(cè)糖化血紅蛋白（Glycosylated hemoglobin,HbA1C）水平，并對(duì)頸動(dòng)脈血管壁組織牙周細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)，探討口腔干預(yù)對(duì)2型糖尿病牙周炎大鼠頸動(dòng)脈血管組織的影響。
　　方法:
　　清潔級(jí)SD雄性大鼠隨機(jī)分為三組，A組（對(duì)照組，NC）、B組（單純糖尿病組， DM）、C組（糖尿病合并牙周炎組，DM+CP）。糖尿病模型的建立采

2、用高脂高糖飲食喂養(yǎng)8-10周，聯(lián)合小劑量多次腹腔注射鏈脲佐菌素（Streptozotocin, STZ），動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血糖及糖化血紅蛋白值。牙周炎模型采用纏繞4-0縫線于0.2mm正畸結(jié)扎絲上進(jìn)行牙周結(jié)扎，并在牙周涂布牙齦卟啉單胞菌懸液。14周后每組各處死7只。將DM+CP組再次分組，分別為C1組（自然進(jìn)程組），C2組（基礎(chǔ)治療組），C3組（基礎(chǔ)治療+米諾環(huán)素+抗生素組），C4組（拔牙組），C5組（拔牙+抗生素組），各組進(jìn)行相應(yīng)的口腔干預(yù)，

3、干預(yù)結(jié)束后5周處死所有大鼠。收集干預(yù)前及干預(yù)結(jié)束后頜骨標(biāo)本及雙側(cè)頸動(dòng)脈分叉處上下約1cm長(zhǎng)度血管組織。頜骨樣本分離牙齦后，亞甲基藍(lán)染色，觀察牙周炎骨吸收情況。左側(cè)頸動(dòng)脈血管組織行熒光定量 PCR法檢測(cè)牙齦卟啉單胞菌含量；右側(cè)行HE染色觀察血管病理變化。
　　結(jié)果：
　　1.頜骨標(biāo)本亞甲基藍(lán)染色結(jié)果顯示復(fù)合模型組大鼠牙槽骨吸收最為嚴(yán)重，DM+CP組相較于DM組及NC組牙槽骨喪失明顯增加，第一二磨牙牙齒間隙增寬，根分叉暴露。DM

4、組及DM+CP組大鼠在鏈脲佐菌素注射后1周內(nèi)血糖水平急劇上升，且波動(dòng)幅度大，出現(xiàn)糖尿病臨床典型的“三多一少”癥狀，空腹血糖FPG≧7.8mmol/L，和（或）隨機(jī)血糖≧17.8mmol/L，2-3周左右逐步維持在穩(wěn)定的中等程度高血糖狀態(tài)。建模后4周檢測(cè)HbA1C結(jié)果也表現(xiàn)為明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　2.干預(yù)前頸動(dòng)脈血管組織病理結(jié)果顯示：DM+CP組血管壁病變明顯較DM組嚴(yán)重，頸動(dòng)脈血管壁表現(xiàn)為厚薄

5、不一，彈性纖維斷裂甚至部分消失，鈣化嚴(yán)重，呈現(xiàn)典型血管硬化表現(xiàn)。熒光定量PCR結(jié)果顯示三組均檢測(cè)到牙齦卟啉單胞菌DNA片段，
　　檢出率NC組42.86％，DM組42.86%， DM+CP組100%。且DM+CP組細(xì)菌檢出含量高于NC組和DM組（P<0.01）。
　　3.干預(yù)后與干預(yù)前相比HbA1C水平升高，二者差值進(jìn)行方差分析比較p>0.05.
　　4.干預(yù)后5周大鼠頸動(dòng)脈病理結(jié)果顯示 B組彈性纖維紊亂，平滑肌細(xì)胞空

6、泡性變；C1組血管壁內(nèi)中膜層部分增厚，個(gè)別標(biāo)本出現(xiàn)鈣化團(tuán)塊，平滑肌細(xì)胞空泡性變較多，內(nèi)膜破壞。C2、C3組內(nèi)中膜厚薄不一，彈性纖維排列較紊亂，空泡性變多。C4組病變最為嚴(yán)重，所有標(biāo)本均出現(xiàn)血管壁厚薄不一，彈性纖維斷裂，血管內(nèi)中膜鈣化嚴(yán)重，部分標(biāo)本鈣化斑塊經(jīng)染色后脫片。C5組較C4組有所改善，但仍較其他組嚴(yán)重，表現(xiàn)為內(nèi)中膜層增厚，彈性纖維排列較紊亂，平滑肌細(xì)胞變性減少，空泡性變較多，個(gè)別標(biāo)本內(nèi)中膜層見(jiàn)鈣化團(tuán)塊。熒光定量PCR結(jié)果顯示干預(yù)后

7、血管壁Pg檢出量明顯降低，C1與其他各干預(yù)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其中C5組降低Pg含量效果最明顯。
　　結(jié)論:
　　1.本實(shí)驗(yàn)成功建立2型糖尿病合并牙周炎的大鼠模型。
　　2.該復(fù)合模型大鼠頸動(dòng)脈血管內(nèi)中膜層均出現(xiàn)鈣化、纖維紊亂等典型的血管硬化的病變，且均檢出牙齦卟啉單胞菌。提示牙齦卟啉單胞菌可能參與了糖尿病血管病變的過(guò)程。
　　3.牙周炎可促進(jìn)糖尿病大鼠牙槽骨骨吸收，同樣也可促進(jìn)糖尿病血管并發(fā)