APN-1在糖尿病牙周炎小鼠牙周組織中的表達(dá).pdf

1、研究發(fā)現(xiàn)，低脂聯(lián)素血癥與T2DM發(fā)展過程中的高胰島素血癥和胰島素抵抗有關(guān)。故有學(xué)者提出，脂聯(lián)素也可作為探討患者將來發(fā)生糖尿病的一個(gè)獨(dú)立因子。在牙周炎和糖尿病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制過程中，炎癥反應(yīng)失調(diào)和加劇是關(guān)鍵，有研究報(bào)道，對伴有糖尿病牙周炎患者進(jìn)行牙周干預(yù)治療后，患者血清脂聯(lián)素水平上升，牙周及全身狀況得到改善，有可能減少糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。然而，糖尿病伴牙周炎患者的局部炎癥狀況及其參與機(jī)體胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展是否均與脂聯(lián)素水平變化有

2、關(guān)，這些問題都尚未得到解決。通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，建立伴有糖尿病的牙周炎動(dòng)物模型，研究脂聯(lián)素與血糖水平及炎癥狀態(tài)是否具有相關(guān)性，為研究糖尿病與牙周炎的相關(guān)性及日益增多的糖尿病伴有牙周炎患者的臨床治療及預(yù)防提供一些理論依據(jù)。
　　目的:通過檢測健康、糖尿病及糖尿病伴牙周炎昆明系小鼠牙齦組織中脂聯(lián)素基因及蛋白含量的變化，檢測三組鼠的血漿中脂聯(lián)素含量，探討脂聯(lián)素含量與血糖水平及牙周炎癥狀態(tài)是否具有相關(guān)性。
　　方法:45只3周齡的昆明系小

3、鼠按不同造模方式分為三組:
　　A組對照組（15只），標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料喂養(yǎng)。
　　B組糖尿病組（15只）。
　　15只健康鼠通過四氧嘧啶(Alloxan)注射法4周建立小鼠糖尿病模型（12mg/100g體重來誘導(dǎo)）。
　　C組糖尿病+牙周炎模型（15只）。
　　15只健康鼠先與B組同時(shí)建糖尿病模型，糖尿病組造模成功后左、右上頜第一磨牙及第二磨牙牙頸部絲線結(jié)扎聯(lián)合高糖喂養(yǎng)6周建立小鼠糖尿病+牙周炎模型。
　

4、　通過測檢AB兩組小鼠不同時(shí)間的血糖、空腹胰島素水平(Fins)及胰島素抵抗指數(shù)，并與空白對照組對比來確認(rèn)小鼠糖尿病組造模成功。通過牙周組織病理組織學(xué)檢查及CBCT掃描觀察牙槽骨喪失程度判斷小鼠糖尿病+牙周炎模型造模成功。
　　分別取三組小鼠的牙齦組織，用RT-PCR、western blot檢測牙齦組織中脂聯(lián)素基因及蛋白含量的變化，并于鼠處死時(shí)取三組鼠的血漿，通過ELISA方法測量血漿中脂聯(lián)素含量進(jìn)行對比和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　

5、　結(jié)果:
　　1.本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，B組造模后20天，小鼠血糖、空腹胰島素水平(Fins)及胰島素抵抗指數(shù)大于正常值，與空白對照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，小鼠糖尿病組造模成功。
　　2.牙齦組織病理組織學(xué)檢測顯示糖尿病伴牙周炎組小鼠牙齦炎癥表現(xiàn)最明顯、在單純糖尿病組部分小鼠可見牙齦組織輕度炎癥、健康組小鼠牙齦未見明顯炎癥;CBCT掃描結(jié)果顯示糖尿病伴牙周炎組小鼠牙槽骨喪失程度最明顯，糖尿病組小鼠次之，健康組小鼠未見

6、明顯骨喪失。小鼠糖尿病+牙周炎組造模成功。
　　3.RT-PCR、western blot檢測小鼠牙齦組織中脂聯(lián)素基因及蛋白表達(dá)水平在三組間比較均有差異，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在健康組表達(dá)水平最強(qiáng)，在糖尿病組、糖尿病伴牙周炎組小鼠中表達(dá)水平依次減弱。
　　4.ELISA結(jié)果顯示APN蛋白在健康組小鼠血漿中表達(dá)水平最強(qiáng)，在糖尿病組、糖尿病伴牙周炎組小鼠血漿中表達(dá)水平依次減弱;組間比較均有差異，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.

7、05）。
　　結(jié)論:
　　1.可通過四氧嘧啶(Alloxan)注射法有效建立小鼠糖尿病模型?？赏ㄟ^牙周局部結(jié)扎聯(lián)合高糖喂養(yǎng)有效建立小鼠糖尿病伴牙周炎模型。
　　2.糖尿病伴牙周炎組小鼠與糖尿病組小鼠、健康組小鼠相比，牙齦炎癥及骨喪失程度最明顯，脂聯(lián)素基因和蛋白含量在小鼠牙齦組織中表達(dá)顯著降低。提示糖尿病可能通過降低脂聯(lián)素水平促進(jìn)牙齦局部炎癥的發(fā)生、發(fā)展;與此同時(shí)，牙周炎可能協(xié)同降低脂聯(lián)素水平，促進(jìn)糖尿病的發(fā)展。