三七總皂苷對(duì)兔激素性股骨頭缺血性壞死VEGFmRNA和BMP2mRNA的影響.pdf

1、目的：
　　通過(guò)觀察三七總皂苷對(duì)激素性兔股骨頭壞死骨組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF)和骨形態(tài)形成蛋白-2(Bone Morphogenetic Protein-2，BMP-2)的表達(dá)的變化情況以及病理改變，探討三七總皂苷防治激素性股骨頭缺血性壞死的效果和作用機(jī)制，為傳統(tǒng)中醫(yī)藥三七防治激素性股骨頭缺血性壞死提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　將135只雄

2、性新西蘭兔運(yùn)用改進(jìn)馬血清聯(lián)合甲強(qiáng)龍?jiān)炷７椒ń⑼眉に匦怨晒穷^壞死模型，造模完成后運(yùn)用病理切片等相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行鑒定模型。模型鑒定成功后采用隨機(jī)數(shù)字表法進(jìn)行隨機(jī)分三組，即生理鹽水組、復(fù)方骨肽組及三七總皂苷組。分別給予生理鹽水、復(fù)方骨肽及三七總皂苷在股骨頭局部穿刺給藥治療,給藥劑量為0.1ml/kg/w，每周一次，連續(xù)治療四周。治療四周后，空氣栓塞法處死，分別取一側(cè)股骨頭經(jīng)進(jìn)行股骨頭HE染色組織形態(tài)學(xué)觀察及空骨陷窩率等檢測(cè)，并超低溫冷凍另一

3、側(cè)行實(shí)時(shí)熒光定量 PCR檢測(cè)股骨頭中 VEGFmRNA及BMP-2mRNA的表達(dá),實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS.22統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　1.造模后大白兔精神狀態(tài)稍萎靡，兔毛稍暗淡、蓬松，活動(dòng)較造模前減少，下肢變得笨拙。食欲稍減退，大小便正常，體重稍減輕。股骨頭HE染色觀察可見(jiàn)骨小梁稀疏、斷裂，骨細(xì)胞散亂分布不規(guī)則，骨髓腔骨細(xì)胞減少，脂肪細(xì)胞增生明顯，空骨陷窩增多，證實(shí)造模成功。
　　2.治療后各組大體形態(tài)及

4、股骨頭觀察：
　?、偕睇}水組：精神較萎靡，毛色暗淡蓬亂、脫毛，活動(dòng)明顯減少，食欲減退，體重減輕明顯。股骨頭未見(jiàn)明顯塌陷，失去光澤變暗淡，整體呈青灰色，股骨頭表面軟骨變薄，股骨頸較骨質(zhì)疏松，易于鑿切。
　?、趶?fù)方骨肽組：精神狀態(tài)尚可，毛色蓬松但有光澤，無(wú)明顯脫毛，偶有彈跳活動(dòng)，食欲較正常，體重?zé)o明顯改變。兔股骨頭形態(tài)完整，表面有光澤稍暗淡，整體呈淡白色，股骨頸骨質(zhì)較堅(jiān)硬，較難鑿切。
　　③三七總皂苷組：精神狀態(tài)良好，毛

5、色有光澤稍蓬松，彈跳活動(dòng)尚可，食欲正常，體重稍增加。股骨頭形態(tài)完整，表面有光澤，整體呈淡白色，股骨頸骨質(zhì)較堅(jiān)硬，較難鑿切。
　　3.各組股骨頭HE染色觀察：
　　①生理鹽水組：骨組織連續(xù)性中段，骨小梁出現(xiàn)斷裂，破壞，骨小梁出現(xiàn)纖維化，死骨形成，骨小梁間骨髓造血細(xì)胞減少，骨細(xì)胞散亂分布不規(guī)則，脂肪細(xì)胞增多明顯，空骨細(xì)胞窩明顯增多，空骨陷窩率為20.0％；
　?、趶?fù)方骨肽組：骨組織連續(xù)性尚可，骨小梁稍變細(xì)，部分出現(xiàn)骨小梁纖

6、維化，可見(jiàn)新骨生成，骨細(xì)胞分布規(guī)則，股骨頭髓腔內(nèi)可見(jiàn)造血細(xì)胞，脂肪細(xì)胞無(wú)明顯增多，空骨陷窩率為15.93%；
　?、廴呖傇碥战M：骨組織連續(xù)性尚可，骨小梁稍變細(xì)，破壞不明顯，可見(jiàn)新骨生成，骨細(xì)胞分布規(guī)則，股骨頭髓腔內(nèi)可見(jiàn)造血細(xì)胞，空骨細(xì)胞窩無(wú)明顯增多，空骨陷窩率為15.10%。各組空骨陷窩率結(jié)果經(jīng)方差分析，復(fù)方骨肽組和三七總皂苷組分別與生理鹽水組比較差異明顯，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），復(fù)方骨肽組與三七總皂苷組比較無(wú)明顯差異

7、，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P>0.05）。
　　4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)每組股骨頭中VEGFmRNA及BMP-2mRNA的表達(dá)結(jié)果：復(fù)方骨肽組和三七總皂苷組分別與生理鹽水組比較,BMP2mRNA的表達(dá)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，三七總皂苷組與復(fù)方骨肽組中BMP2mRNA的表達(dá)比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；復(fù)方骨肽組和三七總皂苷組分別與生理鹽水組比較，VEGFmRNA的表達(dá)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，且三七總皂苷組優(yōu)于骨