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文檔簡介
1、本文從水稻根際分離篩選出1株降解卵磷脂的有機磷降解產(chǎn)堿假單胞菌(Pseudomonas alcaligenes)S2。采用雙親接合的方法將帶有Tn5轉(zhuǎn)座子的質(zhì)粒導(dǎo)入產(chǎn)堿假單胞菌S2菌株中進(jìn)行轉(zhuǎn)座子插入誘變，從5000個卡那霉素抗性的Tn5插入突變株中，篩選得到3株喪失解磷能力的突變株(M808、M1329和M1400)和1株解磷能力增強的突變株(M20)。對Tn5插入位點的基因進(jìn)行DNA測序表明，喪失解磷能力突變株中被突變的基因分別是x
2、cpS,xcpX和xcpW,它們分別編碼XcpS，XcpX和XcpW蛋白，這些蛋白是細(xì)菌Ⅱ型分泌途徑中的主要蛋白成分.將xcpS、xcpX和xcpW基因分別構(gòu)建在pLAFR3載體上，通過雙親接合的方式分別導(dǎo)入上述M808、M1329和M1400三個喪失解磷能力突變株中進(jìn)行功能互補試驗，結(jié)果表明這3個基因都能使各自相對應(yīng)的突變株恢復(fù)解磷能力.以上結(jié)果表明，在產(chǎn)堿假單胞菌中卵磷脂酶的分泌是通過Ⅱ型分泌途徑來完成的.解磷能力的喪失是由于Tn5
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