交替假單胞菌（Pseudoalteromonas）CHS菌株產(chǎn)堿性蛋白酶的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文采集連云港海域的貝類、海水、深海魚類、海底沉積物等樣品，篩選產(chǎn)堿性蛋白酶的菌株。從分離到的217株細(xì)菌中，獲得23株堿性蛋白酶酶活高的菌株，對其中兩株海洋細(xì)菌CHS和SY菌株進(jìn)行生理生化和16SrDNA序列分析，初步鑒定為交替假單胞菌。以CHS和SY兩株菌為出發(fā)菌株，研究它們發(fā)酵產(chǎn)堿性蛋白酶的條件，并分離提純了CHS菌株產(chǎn)生的堿性蛋白酶，初步研究了其酶學(xué)性質(zhì)。　　CHS和SY菌株最適產(chǎn)酶發(fā)酵條件為：15℃，24h，種齡16h，2.

2、5％接種量，搖床轉(zhuǎn)速180r/min；CHS菌株起始pH為9.0，SY菌株為pH8.0。葡萄糖，蛋白胨是兩菌株發(fā)酵產(chǎn)酶較好的碳、氮源。　　CHS菌株發(fā)酵液經(jīng)離心、硫酸銨鹽析、透析、離子交換層析和分子篩層析后，酶的比活由59.4U/mg提高到860.8U/mg，提高了14.5倍，回收率為3.24％。在SDS-PAGE上顯示一條帶，達(dá)電泳純，由SDS-PAGE初測分子量為56.9kDa?！　HS菌株堿性蛋白酶的性質(zhì)研究表明，酶最適作

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