Hsp70L1在腫瘤瘤苗中的免疫佐劑效應(yīng)觀察.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文Hsp70L1在腫瘤瘤苗中的免疫佐劑效應(yīng)觀察姓名：陳志國申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：宋淑霞20090301中文摘要宿主產(chǎn)生針對腫瘤抗原的免疫耐受。這一現(xiàn)象在近年的系列研究中受到熱切的關(guān)注，并逐步闡明了壞死和凋亡過程中關(guān)鍵性的分子差別：HMGBl及Hsp70等“危險(xiǎn)信號”分子。這些分子的發(fā)現(xiàn)及這些分子對免疫系統(tǒng)的刺激作用的結(jié)果，使得我們對“死亡”的腫瘤細(xì)胞對免疫系統(tǒng)的作用有了新的認(rèn)識：死亡腫瘤細(xì)胞不再是

2、一種被吞噬系統(tǒng)被動清除的“垃圾“，而是主動誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，也可能引起免疫抑制。另外，上述事實(shí)也提示我們，在利用“死亡“腫瘤負(fù)載DC制備DC疫苗時(shí)，應(yīng)選擇壞死而非凋亡的腫瘤細(xì)胞。作為Hsp70家族的新成員，Hsp70L1在“死亡“腫瘤細(xì)胞中對免疫系統(tǒng)的作用如何如果Hsp70L1在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)增加，對“死亡“腫瘤細(xì)胞的免疫原性影響如何對這些問題的回答，有助于對Hsp70L1的免疫佐劑效應(yīng)有新的認(rèn)識。也為臨床制備腫瘤細(xì)胞負(fù)載的DC疫苗的方法提

3、供重要參考依據(jù)。方法：l獲得TRP2153243及Hsp70L1基因利用RTPCR技術(shù)從小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞中獲得TRP2153243及Hsp70L1基因。2獲得TRPHSP融合基因?qū)RP2153243及Hsp70L1的PCR產(chǎn)物分別用BamHI、EcoRI$1]EcoRI、XhoI內(nèi)切酶進(jìn)行雙酶切，分別回收兩個(gè)酶切片段，T4連接酶進(jìn)行連接，得到該融合基因。3構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒pTRP2、pHsp701及pTRP2HSP將上述三種DN