黃酒對TNF-α誘導的大鼠血管內皮細胞功能的影響.pdf

1、目的:
　　觀察黃酒是否有類他汀樣作用，是否對TNF-α誘導的大鼠血管內皮細胞損傷有抑制作用并探討其可能的機制。
　　方法:
　　大鼠原代主動脈血管內皮細胞經分離培養(yǎng)及純化鑒定后，取第3～4代細胞用于實驗。每種酒（酒精度分別為1.0％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2.0％）與50ug/LTNF-α共同孵育VECs48h，MTT法檢測不同酒精度的各個酒類對細胞活性的影響，確定酒的最佳干預濃度后，分為contr

2、ol組、TNF-α組、TNF-α+瑞舒伐他汀組(10umol/L)、TNF-α+酒精組(0.5％、1.0％、1.5％)、TNF-α+黃酒組(0.5％、1.0％、1.5％)9組。培養(yǎng)24h后收集樣品，硝酸還原酶法測定培養(yǎng)液上清液NO的含量，化學比色法測定細胞中eNOS的活性。培養(yǎng)48h后收集蛋白，用于免疫印跡法檢測VECs中eNOS、iNOS和ICAM-1蛋白的表達量。
　　結果:
　　1.與對照組相比，以50μg/L TNF

3、-α刺激VECs，其培養(yǎng)上清液中的NO含量明顯降低(P＜0.05);與TNF-α組相比，瑞舒伐他汀組、黃酒1.0％組和黃酒1.5％組均可增加NO的含量（P＜0.01或P＜0.05）;NO含量在酒精0.5％、1.0％、1.5％組和黃酒0.5％組與TNF-α組相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　2.與對照組相比，TNF-α組eNOS活性降低（P＜0.05）;與TNF-α組相比，eNOS的活性在瑞舒伐他汀組、黃酒1.0％組和黃酒

4、1.5％組顯著升高(P＜0.01或P＜0.05)，在酒精0.5％、1.0％、1.5％組和黃酒0.5％組差異不顯著（P＞0.05）。
　　3.免疫印跡法檢測各組eNOS、iNOS和ICAM-1蛋白在VECs中的表達量
　　(1)各組eNOS蛋白表達量:TNF-α組較對照組eNOS蛋白的表達水平減少（P＜0.01）;與TNF-α組比較，瑞舒伐他汀組、黃酒1.0％組、黃酒1.5％組，均可促進eNOS蛋白的表達（P＜0.01或P＜0

5、.05），而酒精0.5％組、酒精1.0％組、酒精1.5％組與TNF-α組相比，eNOS蛋白表達差異無統(tǒng)計學意義;與瑞舒伐他汀組相比，黃酒1.0％組和黃酒1.5％組與其有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　(2)各組iNOS蛋白表達量:與TNF-α組相比，瑞舒伐他汀組、黃酒1.0％組、黃酒1.5％組iNOS蛋白表達降低（P＜0.01或P＜0.05），酒精0.5％組、酒精1.0％組、酒精1.5％組與TNF-α組相比，iNOS蛋白表達差異

6、無統(tǒng)計學意義;相比瑞舒伐他汀組，黃酒1.0％組和黃酒1.5％組iNOS蛋白的表達與其差異顯著（P＜0.05）。
　　(3)各組ICAM-1蛋白表達量:與TNF-α組比較，瑞舒伐他汀組、黃酒1.0％組、黃酒1.5％組ICAM-1蛋白表達降低（P＜0.01或P＜0.05），酒精0.5％組、酒精1.0％組、酒精1.5％組中ICAM-1蛋白表達差異無統(tǒng)計學意義;相比瑞舒伐他汀組，黃酒1.0％組和黃酒1.5％組ICAM-1蛋白的表達與其同樣

7、差異顯著(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.TNF-α能降低大鼠血管內皮細胞上清中NO的水平，抑制eNOS活性及其蛋白的表達，促進iNOS、ICAM-1蛋白的表達，引起血管內皮功能不全，從而促進動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。
　　2.黃酒和瑞舒伐他汀均能夠增加血管內皮細胞上清中NO的水平，增強eNOS活性，促進eNOS蛋白表達，抑制iNOS、ICAM-1蛋白的表達。
　　3.黃酒具有類似瑞舒伐他汀的作用。