新型抗高血壓藥QR01009的降壓及體外S9代謝研究.pdf

1、目的：進(jìn)行新型抗高血壓藥QR01009的藥效學(xué)初步研究，通過單次和長期灌胃給藥，觀察QR01009對大鼠的血壓和心率的影響。通過QR01009在肝S9（線粒體細(xì)胞器上清組分，postmitochondrial supernatant，簡稱S9）、腸S9的孵育試驗，觀察QR01009在S9中的體外代謝穩(wěn)定性。通過NO（一氧化氮）體外釋放檢測，觀察QR01009體外釋放NO的能力。
　　方法：1.對正常血壓SD大鼠和自發(fā)性高血壓大鼠（

2、spontaneously hypertensive rat, SHR）單次給藥后，將大鼠置于39℃恒溫加熱套內(nèi)加溫至心率穩(wěn)定，觸摸其尾部較之前明顯溫暖后開始用軟隆無創(chuàng)血壓計測給藥前、給藥后的收縮壓（systolic blood pressure, SBP）值和心率(heart rate, HR)值。對SHR連續(xù)給藥14天，用軟隆無創(chuàng)血壓計監(jiān)測血壓和心率，觀察治療作用。
　　2.自制大鼠肝S9和腸S9，用BCA試劑盒進(jìn)行蛋白含量檢

3、測，將QR01009在合適的緩沖條件下分別與肝S9和腸S9于37℃孵育，于各時間點取樣檢測，以了解體外代謝情況。將QR01009分別與含有和不含有L-cys（L-半胱氨酸）的甲醇-PBS緩沖液于37℃孵育，用一氧化氮總試劑盒檢測各時間點樣品中一氧化氮的濃度，以觀察一氧化氮體外釋放能力。
　　結(jié)果：1.對于正常血壓大鼠，單次給藥1mg/kg，QR01009組收縮壓變化幅度較小，<8.5mmHg，各個時間點的血壓變化值和陰性對照0.5

4、％CMC-Na溶媒組相似，基本上維持在0h水平，較陽性對照阿齊沙坦酯組對正常大鼠收縮壓的影響要小。QR01009組各個時間點的心率變化百分率均為負(fù)值，顯示對心率有降低作用，但降低幅度很小，最大為5.42%，整體變化趨勢與陰性對照組相似，變化幅度小于陽性對照組。對于SHR，給予QR010090.2mg/kg、1mg/kg、5mg/kg三劑量后，在3～5h內(nèi)達(dá)到最大降壓幅度，收縮壓變化值分別為：-11.48mmHg、-25.56mmHg、-

5、26.92mmHg，均弱于阿齊沙坦酯組（-38.15 mmHg），之后呈緩慢降低趨勢。24h時， QR010091mg/kg組、QR010095mg/kg組和阿齊沙坦酯組血壓變化值為-22.24mmHg、-37.48mmHg和-52.35mmHg，依然保持較大降壓幅度。QR010090.2mg/kg組與溶媒組相似，對心率基本無影響，QR010091mg/kg組、QR010095mg/kg組和阿齊沙坦酯組對心率變化百分率最大分別為-4.3

6、%、-6.7%和-11.9%，經(jīng)t檢驗，三者均與CMC-Na溶媒組無顯著性差異。按1mg/kg劑量對SHR連續(xù)兩周給藥， QR01009組和阿齊沙坦酯組均保持穩(wěn)定的收縮壓降壓幅度，且QR01009組最大收縮壓降低幅度-38.17 mmHg，大于阿齊沙坦酯組。QR01009組在給藥結(jié)束兩周后漸漸恢復(fù)至給藥前水平，阿齊沙坦酯組在給藥結(jié)束后一周內(nèi)即恢復(fù)至給藥前水平。
　　2.自制的大鼠肝S9和腸S9濃度分別為34.2mg/mL和10.2

7、mg/mL。QR01009在如下緩沖體系中是穩(wěn)定的:0.1%甲酸/乙腈、1%甲酸/甲醇、pH7.4的KH2PO4-K2HPO4。孵育實驗結(jié)果顯示，阿齊沙坦酯在肝S9和腸S9的孵育體系中均代謝迅速，5min已經(jīng)水解90%和50%，15 min時水解完全。QR01009在肝S9和腸S9孵育中呈緩慢降低趨勢，4h時尚有60%和80%。一氧化氮體外釋放實驗結(jié)果顯示，QR01009在L-cys存在的條件下，4h的孵育時間內(nèi)能夠維持平穩(wěn)釋放NO，釋