高血壓及不同降壓藥物對去卵巢自發(fā)性高血壓大鼠骨代謝的影響.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，OP)與高血壓病均是年齡相關(guān)性疾病，且都是遺傳因素與環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，兩者常常合并存在，尤其在絕經(jīng)后婦女。
　　骨質(zhì)疏松癥的嚴(yán)重后果是發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折（脆性骨折）。常見的骨折部位為脊椎、髖部和前臂遠(yuǎn)端，導(dǎo)致病殘率和死亡率明顯增加，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，并造成沉重的家庭、社會和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。隨著人口老齡化，OP的患病率逐年增加，OP及其相關(guān)的骨折已經(jīng)成為嚴(yán)重影響老年人尤其是絕經(jīng)后女性健康的

2、重要問題。
　　同樣，隨著社會人口老齡化及生活方式的改變，高血壓病的患病率也呈明顯增加的趨勢。高血壓病已經(jīng)成為老年人最常見的慢性病，也是心腦血管病最主要的危險因素，其中腦卒中、冠心病、慢性心力衰竭及慢性腎臟病等主要并發(fā)癥，不僅致殘、致死率高，而且嚴(yán)重消耗醫(yī)療和社會資源，給家庭和國家造成沉重負(fù)擔(dān)。國內(nèi)外的實踐證明，高血壓病是可以預(yù)防和控制的疾病，降低患者的血壓水平，可明顯減少心腦血管事件的發(fā)生，改善患者的生存質(zhì)量，減少家庭和社會的負(fù)

3、擔(dān)，所以高血壓病患者需長期甚至終生服藥治療。因此，對合并有骨質(zhì)疏松癥的高血壓病患者，選用長期服用的降壓藥物時，需考慮到其對骨代謝及骨質(zhì)疏松性骨折的影響。
　　然而，目前關(guān)于高血壓病及常用降壓藥物，包括噻嗪類利尿劑、β受體阻滯劑、鈣離子拮抗劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)、血管緊張素受體拮抗劑(ARB)等與骨質(zhì)疏松癥及脆性骨折相關(guān)性的研究結(jié)論尚不一致，表現(xiàn)為正面影響、負(fù)面影響，或無影響。因此，深入研究高血壓病及常用降壓藥物對骨

4、代謝的影響，明確骨質(zhì)疏松癥的相關(guān)危險因素及其發(fā)生機(jī)制，及早進(jìn)行干預(yù)，對骨質(zhì)疏松癥及脆性骨折的防治具有重要的理論意義和現(xiàn)實意義。
　　第一部分 自發(fā)性高血壓大鼠骨密度及骨代謝指標(biāo)的變化
　　目的：
　　以自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)為研究對象，以WKY(Wistar-Kyoto rats)大鼠為對照組，通過測定大鼠的骨密度(BMD)、松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)和血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)

5、志物1型原膠原N末端前肽(PINP)和1型膠原交聯(lián)C末端肽(CTX)，研究SHR的骨密度及骨代謝指標(biāo)的變化，從而了解高血壓與骨質(zhì)疏松癥的相關(guān)性。
　　方法：
　　選取11周齡雌性SHR和WKY大鼠各8只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。每2周監(jiān)測體重及血壓，共14周。然后下腔靜脈采血處死大鼠，分離并分裝血清，置于-80°冰箱保存，待測定血清鈣、磷、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)、1型原膠原N末端前肽(Proc

6、ollagen I N-terminal Propeptide，PINP)和1型膠原交聯(lián)C末端肽(C-terminal cross-linked telopeptides of type1 collagen，CTX)。留取右側(cè)脛骨近端，置于10％中性甲醛溶液固定，行顯微CT(microCT)檢測骨密度(bonemineral density，BMD)和松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：
　　1.SHR的血壓明顯高于WKY，且隨著鼠齡

7、的增加血壓進(jìn)行性升高（p=0.001）。SHR的體重明顯低于同齡的WKY(p=0.001)。
　　2.與WKY相比，SHR的血清PINP和CTX水平增高;BMD降低;松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)破壞:表現(xiàn)為骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)和骨小梁厚度(Tb.Th)降低，骨小梁分離度(Tb.Sp)和結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(SMI)升高（p＜0.05）。
　　3.相關(guān)分析顯示，BV/TV、Tb.N、Tb.Th與BMD呈正相關(guān)，高血壓病史及

8、血壓水平與BMD呈負(fù)相關(guān)。多重線性回歸分析顯示，Tb.N、高血壓病史和血壓水平是BMD的獨(dú)立影響因素。
　　結(jié)論：
　　與正常血壓的WKY相比，自發(fā)性高血壓大鼠的骨轉(zhuǎn)換增高，骨密度降低，骨微結(jié)構(gòu)破壞，提示高血壓可以誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生。
　　第二部分 不同降壓藥物對自發(fā)性高血壓大鼠去卵巢后骨代謝的影響
　　目的：
　　運(yùn)用去卵巢的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)作為原發(fā)性高血壓病合并絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型，通過mi

9、croCT檢測SHR脛骨骨密度(BMD)和松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)，同時檢測血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物PINP和CTX，從骨“量”、骨“質(zhì)”及骨代謝三個方面研究不同的降壓藥物對去卵巢SHR骨代謝的影響。
　　方法：
　　11周齡健康雌性未孕自發(fā)性高血壓大鼠42只，隨機(jī)分為7組，每組6只。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，然后行雙側(cè)卵巢切除術(shù)(OVX)或假手術(shù)。
　　組1:假手術(shù)(Sham)組（假手術(shù)+飲用水1ml/次）;
　　組2:對照(Control

10、)組（OVX+飲用水1ml/次）;
　　組3:氫氯噻嗪組(OVX+氫氯噻嗪10 mg/kg);
　　組4:美托洛爾組（OVX+琥珀酸美托洛爾緩釋片50mg/kg）;
　　組5:氨氯地平組(OVX+苯磺酸氨氯地平5mg/kg);
　　組6:纈沙坦組(OVX+纈沙坦30mg/kg);
　　組7:貝那普利組(OVX+貝那普利10mg/kg)。
　　術(shù)后2周開始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)12周。然后，下腔靜脈采

11、血處死大鼠，留取血清、子宮及右側(cè)脛骨標(biāo)本。測量子宮濕重;測定血清雌二醇(E2)、鈣、磷、堿性磷酸酶(ALP)、PINP和CTX水平;使用顯微CT(microCT)測定脛骨骨密度及松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：
　　1.子宮濕重與E2結(jié)果
　　與假手術(shù)組相比，切除雙側(cè)卵巢的各組SHR的子宮濕重和E2水平均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.001），說明去卵巢手術(shù)成功。
　　2.BMD結(jié)果
　　(1)與假手術(shù)組相

12、比，去卵巢對照組的BMD明顯降低(p＜0.001)，說明本實驗絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥大鼠模型造模成功。
　　(2)氫氯噻嗪組及貝那普利組的BMD較對照組明顯升高(p＜0.001)，與假手術(shù)組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3)美托洛爾組、氨氯地平組及纈沙坦組的BMD較假手術(shù)組明顯降低(p＜0.001)，與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)指標(biāo)結(jié)果
　　(1)與假手術(shù)組相比，對照組的BV/TV和Tb.N明顯

13、降低（p＜0.01），Tb.Sp和SMI明顯升高（p＜0.01）。
　　(2)氫氯噻嗪組的BV/TV和Tb.N較對照組明顯升高(p＜0.05)，Tb.Sp和SMI較對照組明顯降低(p＜0.01);而與假手術(shù)組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3)貝那普利組的Tb.N較對照組明顯升高(p＜0.01)，Tb.Sp和SMI較對照組明顯降低(p＜0.05);而與假手術(shù)組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(4)美托洛爾組及纈沙坦組的BV/

14、TV和Tb.N較假手術(shù)組明顯降低(p＜0.01)，Tb.Sp和SMI較假手術(shù)組明顯升高（p＜0.01）;而與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(5)氨氯地平組的Tb.N較假手術(shù)組明顯降低(p＜0.01)，Tb.Sp和SMI較假手術(shù)組明顯升高（p＜0.05）;而與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.骨代謝相關(guān)血生化指標(biāo)結(jié)果
　　(1)與假手術(shù)組相比，對照組的血清PINP和CTX水平明顯升高(p＜0.05;p＜0.001

15、)。
　　(2)氫氯噻嗪組、氨氯地平組及貝那普利組的血清PINP和CTX水平較對照組明顯降低（p＜0.05），與假手術(shù)組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3)美托洛爾組及纈沙坦組的血清PINP和CTX水平較假手術(shù)組明顯升高(p＜0.05)，與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(4)各組大鼠血鈣、磷及堿性磷酸酶水平無明顯差異（p＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.雙側(cè)卵巢切除可誘發(fā)自發(fā)性高血壓大鼠出現(xiàn)骨密度降低，