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1、目的:探討甘精、地特與人胰島素對3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素Mrna表達(dá)的影響。方法:1.體外培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞,誘導(dǎo)分化成熟后用基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)24h,以消除分化培養(yǎng)基的影響;接著加入含有1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L人胰島素(純品)、甘精胰島素(純品及注射液)、地特胰島素(注射液)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h,并設(shè)立基礎(chǔ)培養(yǎng)基組為空白對照組,培養(yǎng)24h,用實時定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(R
2、T-PCR)法檢測脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素Mrna水平。2.統(tǒng)計學(xué)處理:數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x ? S)表示;多組定量資料的比較采用單因素方差分析,兩兩比較用LSD-t 檢驗或Dunnet's 法。P≤0.05 認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1.不同濃度相同胰島素對脂聯(lián)素Mrna表達(dá)的影響:不同濃度(1、10、100、1000)nmol/L的各種胰島素作用于成熟的3T3-L1脂肪細(xì)胞24h,隨著胰島素濃度的增加,脂聯(lián)素Mrna的表達(dá)逐漸降低。胰島
3、素濃度≤10nmol/L時,脂聯(lián)素表達(dá)的降低沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);濃度≥100nmol/L時,脂聯(lián)素的表達(dá)明顯降低,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且1000nmol/L 胰島素的抑制作用強(qiáng)于100nmol/L 胰島素。2.相同濃度不同胰島素對脂聯(lián)素Mrna表達(dá)影響的比較:1~10nmol/L 各組間比較無差別。100nmol/L、1000nmol/L 地特胰島素(注射液)的抑制作用弱于甘精胰島素(純品及注射液)及人胰島素(純
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