體外葡萄糖濃度改變對3T3-L1細(xì)胞脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目前認(rèn)為,脂肪組織不僅僅是一個(gè)能量存儲和代謝的器官,亦能表達(dá)和分泌出多種能影響機(jī)體能量代謝平衡的蛋白質(zhì),又稱脂肪細(xì)胞因子(adipocytekines)包括瘦素(leptin)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、抵抗素(resistin).脂肪細(xì)胞因子與2型糖尿病、胰島素抵抗、脂代謝紊亂和動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展之間的相關(guān)性越來越受到人們的重視.材料與方法以鼠前脂肪細(xì)胞系3T3-L1(中國科學(xué)

2、院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所惠贈)為研究對象.3T3-L1細(xì)胞按照常規(guī)的貼壁細(xì)胞方法培養(yǎng).在細(xì)胞狀態(tài)良好時(shí),傳代分瓶(1×10<'5>/ml),細(xì)胞接觸抑制兩天后加入10﹪胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液(含0.5mM3-異丁基-1甲基黃嘌呤,10μg/ml胰島素,0.25μM地塞米松)培養(yǎng)兩天,接著換成10﹪胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液(今10μg/ml胰島素)培養(yǎng)兩天,最后改為10﹪胎牛血清的DMEM培養(yǎng),每兩天換液,直至90﹪的細(xì)胞為成熟的脂

3、肪細(xì)胞.成熟的脂肪細(xì)胞中加入含不同葡萄糖濃度的10﹪胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,葡萄糖濃度變化范圍在5.5mM~~45mM,培養(yǎng)時(shí)間是48小時(shí).用β-actin為內(nèi)對照,RT-PCR法半定量測定不同葡萄糖濃度梯度作用下3T3-L1的脂聯(lián)表表達(dá)的差異結(jié)論20mM以下的各葡萄糖濃度梯度不能顯著降低3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素mRNA表達(dá),在20mM及以上濃度梯度時(shí)3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素mRNA表達(dá)顯著降低.高糖濃度對3T3-L1細(xì)胞脂聯(lián)素m