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1、目的:觀察不同葡萄糖濃度對(duì)人肝細(xì)胞(L02)內(nèi)膽固醇合成及HMGCR、LXR α和ANGPTL3基因表達(dá)的影響;并在各組加入辛伐他汀干預(yù),進(jìn)一步說(shuō)明上述影響作用,研究它們對(duì)ANGPTL3基因表達(dá)影響的機(jī)制,及ANGPTL3在代謝綜合征發(fā)生中的作用。 方法:以L02為研究對(duì)象,一組在含不同濃度葡萄糖的培養(yǎng)液中培養(yǎng)24小時(shí);另外一組在含10 μ mol幾辛伐他汀的不同濃度葡萄糖培養(yǎng)液中培養(yǎng)24小時(shí)。采用膽固醇酶聯(lián)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)膽固
2、醇含量,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)L02細(xì)胞HMGCR、LXR α和ANGPTL3的mRNA水平,用免疫印跡技術(shù)檢測(cè)L02細(xì)胞ANGPTL3蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。 結(jié)果:高濃度葡萄糖培養(yǎng)的L02細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量明顯高于正常葡萄糖濃度培養(yǎng)組(P<0.05),且細(xì)胞內(nèi)LXR α、ANGPTL3 mRNA和ANGPTL3蛋白質(zhì)表達(dá)量也明顯高于正常組(P<0.05),HMGCR在各組的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3、在辛伐他汀干預(yù)下,LXR α、ANGPTL3mRNA和ANGPTL3蛋白質(zhì)表達(dá)量均較未加辛伐他汀組下降(P<0.05);膽固醇含量也明顯低于未加辛伐他汀組(P<0.05);HMGCR表達(dá)量也明顯低于未加辛伐他汀組(P<0.05)。在辛伐他汀干預(yù)下,不同葡萄糖濃度組的L02細(xì)胞內(nèi)LXR α、ANGPTL3 mRNA和ANGPTL3蛋白表達(dá)量及膽固醇含量依然與葡萄糖濃度正相關(guān)。 結(jié)論:葡萄糖能增加L02細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量,上調(diào)LXRα
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