不同葡萄糖濃度對(duì)HBV表達(dá)HBsAg與HBeAg的影響.pdf

1、目的：
　　觀察 HepG2.2.15細(xì)胞在不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基條件下 HBsAg及HBeAg的表達(dá)差異，并探討其表達(dá)是否與PGC-1a相關(guān)，初步研究乙肝病毒與代謝之間的關(guān)系。
　　方法：
　　1）本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外培養(yǎng)HepG2.2.15細(xì)胞，MTT法檢測(cè)不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞生長(zhǎng)率影響。
　　2）ELISA法分別檢測(cè)各組培養(yǎng)細(xì)胞上清液中HBsAg、HBeAg的表達(dá)量。
　　3）熒光定

2、量 PCR檢測(cè)不同葡萄糖濃度培養(yǎng)基下各組細(xì)胞 PGC-1a mRNA的表達(dá)差異。
　　結(jié)果：
　　1）MTT法檢測(cè)不同葡萄糖濃度培養(yǎng)基對(duì) HepG2.2.15細(xì)胞生長(zhǎng)率影響：高糖組（35mmol/L）葡萄糖培養(yǎng)基抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。除高糖組（35mmol/L）外，HepG2.2.15細(xì)胞在培養(yǎng)24h與48h時(shí)各濃度組細(xì)胞與正常組比較差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。但在培養(yǎng)72h時(shí)，低糖組（2mmol/L）及無(wú)糖組細(xì)胞生長(zhǎng)出現(xiàn)不同程度

3、的抑制（P＜0.05）。
　　2）HBsAg及HBeAg的動(dòng)態(tài)變化：HepG2.2.15表達(dá)HBsAg在72h時(shí)出現(xiàn)高峰，HBeAg的高峰出現(xiàn)在96h。在48小時(shí)可以觀察到兩種蛋白的表達(dá)量已達(dá)到接近高峰。
　　3）觀察不同葡萄糖濃度HepG2.2.15表達(dá)HBsAg、HBeAg的量：低糖組（2mmol/L）及無(wú)糖組細(xì)胞表達(dá)HBsAg、HBeAg量分別為（2.474±0.118、2.458±0.135）及（2.667±0.12

4、9、2.603±0.179）較正常組（1.450±0.220、1.486±0.186）高，并且差異有顯著性（P＜0.01）。低糖組（2mmol/L）與無(wú)糖組兩兩比較差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。而15mmol/L、25mmol/L組與正常組比較差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。
　　4）定量PCR檢測(cè)不同葡萄糖濃度培養(yǎng)下各細(xì)胞中PGC-1amRNA表達(dá)差異：HepG2.2.15細(xì)胞在低糖組（2mmol/L）及無(wú)糖組PGC-1amRNA

5、表達(dá)量分別為（1.584±0.134、1.312±0.199）較正常組（0.930±0.123）高，并且差異有顯著性（P＜0.05），低糖（2mmol/L）及無(wú)糖組之間差異也有顯著性（P＜0.05）。而15mmol/L、25mmol/L組與正常組比較無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1）低糖可能增強(qiáng)HBV表達(dá)HBsAg及HBeAg。
　　2）低糖改變時(shí)能促進(jìn)PGC-1a的表達(dá)量。
　　3）低糖可能通過(guò)