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1、目的: 本實(shí)驗(yàn)采用體外培養(yǎng)人單核細(xì)胞株(THP-1)的方法,觀察不同濃度葡萄糖及葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)單核細(xì)胞表達(dá)CD11b、白介素6和腫瘤壞死因子-α的影響,同時(shí)研究滲透壓改變和細(xì)胞凋亡是否參與了葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)單核細(xì)胞表達(dá)炎性因子影響的過程。旨在探討血糖波動(dòng)在糖尿病大血管病變發(fā)生機(jī)制中的作用,從而為糖尿病大血管病變的治療提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法: 1.單核細(xì)胞培養(yǎng):取THP-1細(xì)胞株,于超凈工作臺(tái)內(nèi)解凍復(fù)蘇后
2、,接種于培養(yǎng)瓶中,置于5%CO2培養(yǎng)箱中孵育(37℃)。培養(yǎng)的單核細(xì)胞采用胎盤藍(lán)染色法計(jì)算細(xì)胞活率。 2.實(shí)驗(yàn)分組:根據(jù)葡萄糖濃度及其變化分為對(duì)照組(5mmol/L)、高葡萄糖組(15mmol/L,)、葡萄糖濃度波動(dòng)組(5-15mmol/L)、滲透壓控制組(甘露醇濃度5-15mmol/L)。 3.炎性因子檢測(cè):采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組單核細(xì)胞表面CD11b表達(dá)和細(xì)胞凋亡,酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)IL-6和TNF-α水平,比較各組
3、差異有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: (1)高葡萄糖組較對(duì)照組CD11b、IL-6和TNF-α表達(dá)明顯增高。 (2)葡萄糖濃度波動(dòng)組較高葡萄糖組CD11b、IL-6和TNF-α表達(dá)明顯增高。 (3)滲透壓控制組CD11b、IL-6和TNF-α表達(dá)介于高葡萄糖組與葡萄糖濃度波動(dòng)組之間,與高葡萄糖組、葡萄糖濃度波動(dòng)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (4)各組間細(xì)胞凋亡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:
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