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文檔簡介
1、目的:對比研究波動性高濃度葡萄糖與恒定性高濃度葡萄糖對體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞粘附分子VCAM-1、ICAM-1表達及NO分泌的影響,從而探討波動性高血糖在糖尿病慢性血管并發(fā)癥中的致病機制?! 》椒?從人臍靜脈中提取并體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞,實驗分為4組,分別加入含不同濃度葡萄糖(5.5mmol/L、20mmol/L、5.5/20mmol/L每8小時輪換1次)及甘露醇(20mmol/L)的條件培養(yǎng)液,每間隔8小時更換新鮮條件培養(yǎng)液
2、一次,一共作用7天。應用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測VCAM-1、ICAM-1基因mRNA的表達,免疫細胞化學檢測VCAM-1、ICAM-1蛋白表達,硝酸還原酶法檢測細胞培養(yǎng)液上清中NO的含量?! 〗Y(jié)果:(1)恒定性高濃度葡萄糖(20mmol/L)與波動性高濃度葡萄糖(5.5/20mmol/L)作用于人臍靜脈內(nèi)皮細胞7天后,兩組內(nèi)皮細胞VCAM-1與ICAM-1mRNA的表達水平均增高。其中VCAM-1mRNA的表達水平分別
3、為對照組的151%(P<0.01)、212%(P<0.001),以波動性高濃度葡萄糖組增高幅度尤為明顯,與恒定性高濃度葡萄糖組比較,差異有顯著性(P<0.01);兩組內(nèi)皮細胞ICAM-1mRNA的表達水平均增高,分別為對照組的173%(P<0.01)、198%(P<0.01),相對于恒定性高濃度葡萄糖組,波動性高濃度葡萄糖組ICAM-1mRNA表達水平的增高幅度更加明顯,差異有顯著性(P<0.01)?! ?2)恒定性高濃度葡萄糖(20
4、mmol/L)與波動性高濃度葡萄糖(5.5/20mmol/L)作用于人臍靜脈內(nèi)皮細胞7天后,兩組內(nèi)皮細胞VCAM-1與ICAM-1蛋白的表達水平均增高。其中VCAM-1蛋白的表達水平分別為對照組的222%(P<0.001)、487%(P<0.001),以波動性高濃度葡萄糖組增高幅度尤為明顯,與恒定性高糖濃度葡萄組比較,差異有顯著性(P<0.01);ICAM-1蛋白的表達水平分別為對照組的150%(P<0.05)、228%(P<0.01)
5、,相對于恒定性高濃度葡萄糖組,波動性高濃度葡萄糖組ICAM-1蛋白表達水平的增高幅度更加明顯,差異有顯著性(P<0.01)?! ?3)經(jīng)恒定性高濃度葡萄糖與波動性高濃度葡萄糖處理7天后,兩組內(nèi)皮細胞分泌NO均減少,分別為對照組的80%(P<0.01)、50%(P<0.01),其中波動性高濃度葡萄糖組內(nèi)皮細胞分泌NO減少尤為明顯,與恒定性高濃度葡萄糖組比較差異有顯著性(P<0.01)?! 〗Y(jié)論1、波動性高濃度葡萄糖相對于恒定性高濃度葡
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