葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)mVSMCsPPARγ表達(dá)及抗炎作用的影響.pdf

1、第一章葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)PPARγ表達(dá)的影響
　　目的:本部分探討葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)小鼠血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)過氧化物酶體增殖物激活受體γ(Peroxisome Proliferator-activated Receptor-γ， PPARγ)的表達(dá)影響。
　　方法:小鼠血管平滑肌細(xì)胞復(fù)蘇傳代后用正常濃度葡萄糖組(NG組，5.5mmol/L葡萄糖)、高濃度葡萄糖組（

2、HG組，25mmol/L葡萄糖）、葡萄糖濃度波動(dòng)組（FG組，白天5.5mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖每三小時(shí)高糖兩小時(shí)低糖交替三次，晚上高糖過夜）、甘露醇等滲對(duì)照組(MG組5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)分別培養(yǎng)小鼠VSMCs，24小時(shí)后應(yīng)用Western Blot和Real-Time PCR觀察PPARγ蛋白及mRNA的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:Western Blot結(jié)果顯示:與正常濃度葡萄

3、糖組相比，高糖組及葡萄糖濃度波動(dòng)組PPARγ表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)，葡萄糖濃度波動(dòng)組與高糖組相比PPARγ表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)。等滲對(duì)照組與正常濃度葡萄糖組PPARγ表達(dá)無明顯差異（P＞0.05）。Real-Time PCR顯示:與正常濃度葡萄糖組相比，高糖組及葡萄糖濃度波動(dòng)組上調(diào)VSMCsPPARγ mRNA表達(dá)（P＜0.05），葡萄糖濃度波動(dòng)組與高糖組比較PPARγ mRNA表達(dá)上調(diào)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。甘露醇

4、等滲對(duì)照組較正常濃度葡萄糖組相比PPARγ mRNA的表達(dá)無明顯差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:高糖及葡萄糖濃度波動(dòng)均可上調(diào)PPARγ表達(dá)，認(rèn)為這與細(xì)胞高糖應(yīng)激的自身保護(hù)有關(guān)，其中葡萄糖濃度波動(dòng)上調(diào)PPARγ表達(dá)作用更為明顯。
　　第二章葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)PPARγ抗炎作用的影響
　　目的:PPARγ激活后可抑制血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)炎癥因子單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)表達(dá)，這可被認(rèn)為是PPARγ的抗炎作用

5、。本部分旨在探討葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)PPARγ激活后小鼠血管平滑肌細(xì)胞(mVSMCs)抗炎作用的影響。
　　方法:用PPARγ受體激動(dòng)劑羅格列酮處理細(xì)胞，觀察PPARγ激活后MCP-1表變化。即將體外培養(yǎng)的小鼠血管平滑肌細(xì)胞隨機(jī)分為八組，分別為正常濃度葡萄糖組（G1，5.5mmol/L葡萄糖）、正常濃度葡萄糖+羅格列酮組（G2，5.5mmol/L葡萄糖+10μmol/L羅格列酮）;高濃度葡萄糖組（G3，25mmol/L葡萄糖）、高濃度

6、葡萄糖+羅格列酮組（G4，25mmol/L葡萄糖+10μmol/L羅格列酮）;葡萄糖濃度波動(dòng)組組(G5，白天5.5mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖每三小時(shí)高糖兩小時(shí)低糖交替三次，晚上高糖過夜)、葡萄糖濃度波動(dòng)組+羅格列酮組（G6，白天5.5mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖每三小時(shí)高糖兩小時(shí)低糖交替三次，晚上高糖過夜+10μmol/L羅格列酮）;甘露醇等滲對(duì)照組(G7，5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol

7、/L甘露醇)、甘露醇等滲對(duì)照組+羅格列酮組（G8，5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇+10μmol/L羅格列酮）。應(yīng)用ELISA對(duì)比羅格列酮誘導(dǎo)前后可了解不同干預(yù)組PPARγ激活后MCP-1降低率。
　　結(jié)果:與G1組相比，G3、G5組細(xì)胞上清液中MCP-1的表達(dá)增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); G5組與G3組相比細(xì)胞上清液中MCP-1的表達(dá)增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。G7組與G1組相

8、比細(xì)胞上清液中MCP-1的表達(dá)降低，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與正常葡萄糖濃度相比，高糖及葡萄糖濃度波動(dòng)條件下，PPARγ激活后MCP-1的降低率減低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，并且葡萄糖濃度波動(dòng)條件下PPARγ激活后MCP-1的降低率低于高糖組(P＜0.05)。甘露醇等滲對(duì)照組較正常濃度葡萄糖組相比PPARγ激活后MCP-1的降低率無明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論:在高糖及葡萄糖濃度波動(dòng)環(huán)境下，PP