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    • 簡(jiǎn)介:EFFECTSOFDHEAONBIOLOGICALCHARACTERISTICSANDITSREGULATINGTESTOSTERONEPRODUCTIONMECHANISMINPR玎訌ARYRATLEYDIGCELLSBYLIUIINSUPERVISORASSOCIATEPROFMAHAITIANADISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFUWDLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYCOMPLETEDINAPRIL2013COMMENCEMENTINJUNE2013目錄目錄摘|要IABSTRACTV本文部分縮寫中英文對(duì)照Ⅸ引言1第一篇文獻(xiàn)綜述3第一章脫氫表雄酮生物學(xué)作用研究進(jìn)展31DHEA的合成、代謝與分布32DHEA的生物學(xué)功能421DHEA對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響422DHEA對(duì)免疫系統(tǒng)的影響423DHEA的抗氧化作用424DHEA對(duì)心血管系統(tǒng)的影響525DHEA對(duì)骨質(zhì)代謝的影響53DHEA調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能的作用機(jī)制531DHEA的激素樣效應(yīng)532DHEA的非激素樣效應(yīng)6參考文獻(xiàn)7第二章睪酮的生物合成及其調(diào)控機(jī)制11L睪酮的生物合成112睪酮合成途徑中關(guān)鍵因子12213B羥基類固醇脫氫酶122217B羥基類固醇脫氫酶1323芳香化酶133MAPKERK信號(hào)通路134類固醇激素與MAPKERK信號(hào)通路間的關(guān)系14參考文獻(xiàn)16第二篇試驗(yàn)研究19第三章DHEA對(duì)原代大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞增殖特性的影響191材料和方法一2011主要試劑和儀器。2012原代大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定2013DHEA對(duì)原代大鼠睪丸問(wèn)質(zhì)細(xì)胞增殖的形態(tài)學(xué)觀察2L14EDU法檢測(cè)DHEA對(duì)原代大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞增殖的影響。2115流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DHEA對(duì)原代大鼠睪丸問(wèn)質(zhì)細(xì)胞周期的影響。2216REALTIMEPCR法檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白MRNA表達(dá)水平22
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    • 簡(jiǎn)介:論文題目英文題河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文CHARACTERISTICSOFAIVH9ISOLATEDSTRAINSINHENANPROVINCE導(dǎo)專論文提交日學(xué)位授予日致謝光陰似箭,三年的研究生生活轉(zhuǎn)眼就要結(jié)束了,在此論文完成之際,首先向我的指導(dǎo)老師崔保安教授致以最崇高的敬意和最真摯的感謝。崔老師淵博的學(xué)識(shí)、活到老學(xué)到老的學(xué)習(xí)精神、一絲不茍的敬業(yè)精神、寬闊的胸襟等都是我值得用一生去學(xué)習(xí)的。崔老師在本試驗(yàn)和論文的撰寫過(guò)程中投入了大量的精力并給與精心的指導(dǎo)。感謝崔老師對(duì)我試驗(yàn)和論文的指導(dǎo)和關(guān)心。感謝實(shí)驗(yàn)室李新生副教授在試驗(yàn)過(guò)程中給于的指導(dǎo)和幫助,他對(duì)工作的認(rèn)真熱情、雷厲風(fēng)行的工作作風(fēng)、勇往直前的拼搏精神,也是我不斷學(xué)習(xí)和進(jìn)步的榜樣。在此論文完成之際,也向尊敬的李新生副教授表示衷心的感謝感謝本實(shí)驗(yàn)室的陳紅英老師在試驗(yàn)和生活中給于我的幫助,陳老師在生活和學(xué)習(xí)上對(duì)學(xué)生的關(guān)心和照顧使我們感動(dòng),她處處為學(xué)生著想,為學(xué)生考慮,非常的熱情,使每一個(gè)學(xué)子都非常的敬佩她。感謝實(shí)驗(yàn)室魏戰(zhàn)勇老師、張紅英老師、楊明凡老師、王學(xué)兵老師、王彥彬老師、金鉞老師、王莉老師等三年來(lái)在學(xué)習(xí)、試驗(yàn)和生活中給于我的關(guān)心和幫助感謝師兄高文明、李雙亮、王澤仁、劉文杰、陳禮朋、岳旭龍、張宇耕、師姐李燕、王淑娟、郭靜、苗銀萍、陸佳、王亞丹等,在我生活和學(xué)習(xí)上給予我的關(guān)心和幫助三年的研究生生活雖然短暫,但卻給我的人生增添了不少的風(fēng)采,在這行三年罩我認(rèn)識(shí)了很多的朋友,跟著實(shí)驗(yàn)室老師也學(xué)到了很多,使我對(duì)學(xué)習(xí)和I生活有了更深、更好的理解和詮釋,對(duì)自己也更加充滿了信心。感謝同學(xué)劉媛媛、王俊亞、吳宇陽(yáng)、盧權(quán)威、鈔安軍、李坤、陳雅君、張莉娟、張?jiān)?、張鵬宇、馬莉芳、姬郭彪、李小佳、李偉豪、楊青原等與我~‘起渡過(guò)難忘的研究生學(xué)習(xí)生涯,在我困難迷惑沒(méi)有方向的時(shí)候有你們給我出謀劃策,指點(diǎn)迷津。『F因?yàn)橛辛四銈兾业难芯可頙L‘豐富多彩,在此向你們表示衷心的感謝感謝師弟朱春平、周云飛、郭宮朋、陳龍彪、馬世杰、劉中原,師妹常婧竹、高曉云、寇亞楠等給予我生活和學(xué)習(xí)E的無(wú)私幫助,在此表示衷心的感謝最后,感謝我的家人和朋友,你們總是在我的身后支持著我,鼓勵(lì)著我,做我堅(jiān)強(qiáng)的后盾,感謝你們對(duì)我的理解與寬容
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    • 簡(jiǎn)介:分類號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文昆明犬繁殖性能和成纖維細(xì)胞系生物學(xué)特昆明犬繁殖性能和成纖維細(xì)胞系生物學(xué)特征的研究征的研究STUDYONREPRODUCTIVEPERFMANCEBIOLOGICALACTERISTICSOFTHEFIBROBLASTCELLLINESINKUNMINGDOG碩士研究碩士研究生李靜生李靜指導(dǎo)教師戴志明戴志明教授魏紅江魏紅江教授申請(qǐng)學(xué)位類別申請(qǐng)學(xué)位類別農(nóng)學(xué)碩士農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)培養(yǎng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院二O一四年五月一四年五月
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    • 簡(jiǎn)介:分類號(hào)S823學(xué)校代碼10129UDCS8512學(xué)號(hào)2010201042IBRV對(duì)牛單核巨噬細(xì)胞生物學(xué)特性及主要細(xì)胞表面分子表達(dá)的影響EFFECTSOFIBRVONBIOLOGICALACTERISTICSEXPRESSIONOFMAJCELLSURFACEMOLECULESOFBOVINEMONOCYTEMACROPHAGE論文提交日期二〇一三年六月申請(qǐng)人高晶學(xué)科門類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向獸醫(yī)公共衛(wèi)生指導(dǎo)教師周偉光副教授EFFECTSOFIBRVONBIOLOGICALACTERISTICSEXPRESSIONOFMAJCELLSURFACEMOLECULESOFBOVINEMONOCYTEMACROPHAGEABSTRACTINFECTIOUSBOVINERHINOTRACHEITISVIRUSCANCAUSEBOVINEMULTIPLETISSUESINFECTIONESPECIALLYRESPIRATYINRECENTLYYEARTHISDISEASEISPREVAILCAUSEENMOUSECONOMICLOSSESTHISSTUDYISOLATECULTUREBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESINVITRODETECTPHAGOCYTICFUNCTIONNOSECRETIONOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESAFTERINFECTEDWITHIBRVAT6122448HRESPECTIVELYANALYSETHEEFFECTOFIBRVINFECTIONONIMMUNOLOGYFUNCTIONOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESATCELLULARMOLECULARLEVELTHERESULTOFPHAGOCYTOSISOFCHICKENREDBLOODCELLTESTSHOWSTHATTHEPHAGOCYTICFUNCTIONOFMONONUCLEARMACROPHAGESDECREASEAFTERINFECTEDWITHIBRVP005APOPTOSISOFMONONUCLEARMACROPHAGESAFTERINFECTEDWITHIBRVWASNOTFOUNDEDINAGAROSEGELELECTROPHESISFLUESCENCEMICROSCOPEDETECTIONTHEEFFECTOFIBRVONNOSECRETIONOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESWASDETECTEDBYGRIESSMETHODTHERESULTSSHOWSTHATTHENOSECRETIONHIGHERTHANCONTROLGROUPAFTERINFECTEDWITHIBRVP005REACHTOTHEHIGHESTLEVELAT24HAFTERPOISONTHEDYNAMICCHANGESOFEXPRESSIONOFSURFACEMOLECULESMHCI、MHCII、CD14、CD11AOFMONONUCLEARMACROPHAGESWEREDETECTEDBYFLOWCYTOMETRYTHERESULTSSHOWSTHATTHERELATIONSHIPBETWEENIBRVINFECTIONTHEEXPRESSIONOFCD14CD11AWHICHASSOCIATEDWITHANTIINFECTIONIMMUNITYISPOSITIVEREGULATIONBUTNEGATIVEREGULATIONWITHMHCIMHCIIEXPRESSIONWHICHRELATEDWITHANTIGENPRESENTATIONTHATISTOSAYBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESINFECTEDBYIBRVCANINFLUENCETHEEXPRESSIONLEVELOFCELLSURFACEMOLECULETHERESULTPROVEDTHATINSHTTIMETHEPHAGOCYTOSISFUNCTIONANTIGENPRESENTATIONFUNCTIONWEREDECREASEIMMUNEREGULATIONFUNCTIONWASAFFECTEDOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESAFTERINFECTINGWITHIBRVPROVIDEDTHEYEVIDENCEFFURTHERSTUDYTHEPATHOGENICMECHANISMOFIBRVKEYWDSIBRV;BOVINEMONONUCLEARMACROPHAGE;PHAGOCYTOSIS;CELLSURFACEMOLECULES;APOPTOSISDIRECTEDBYPROFZHOUWEIGUANG
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    • 簡(jiǎn)介:?jiǎn)魏思?xì)胞增生性李斯特菌HFQ基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究研究生康美琴導(dǎo)師殷月蘭副教授焦新安教授中文摘要單核細(xì)胞增生性李斯特菌LISTERIAMONOCYTOGENES,LM是革蘭陽(yáng)性的短桿菌,營(yíng)腐生和寄生生活,是重要的食源性人獸共患病原菌。該菌在環(huán)境中廣泛分布,對(duì)低溫、酸堿和高滲透壓等環(huán)境抵抗力極強(qiáng),是宿主譜較廣的兼性胞內(nèi)寄生菌。LM在各種環(huán)境中適應(yīng)、生存并表現(xiàn)致病力,與調(diào)控因子的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控密切相關(guān)。HFQ蛋白是LM中新發(fā)現(xiàn)的調(diào)控因子,在該菌生長(zhǎng)代謝及毒力調(diào)控中的作用知之甚少。不同血清型LM的生態(tài)分布和致病性存在較大差異,本文分別以血清型為1/2A的標(biāo)準(zhǔn)株EGDE和4B的高毒力菌株NTSN為研究對(duì)象,利用同源重組技術(shù)構(gòu)建了HFQ基因缺失的突變株及回復(fù)株,比較其與野生株對(duì)環(huán)境脅迫及小鼠致病特性,探索調(diào)控因子HFQ在LM致病及抵抗外界壓力方面的作用。1單核細(xì)胞增生性李斯特菌HFQ缺失株及回復(fù)株的構(gòu)建與鑒定利用同源重組技術(shù)分別成功構(gòu)建了單核細(xì)胞增生性李斯特菌EGDE菌株及NTSN菌株辦向基因的缺失株。在擴(kuò)增出待敲除基因兩翼的同源片段之后,利用SOEINGPCR方法將其拼接在一起,插入穿梭載體PKSV7中,經(jīng)電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入EGDE和NTSN感受態(tài)細(xì)胞中。通過(guò)溫度和氯霉素抗性壓力,實(shí)現(xiàn)兩次同源重組,對(duì)重組克隆用PCR方法和RTPCR方法進(jìn)行鑒定,將陽(yáng)性克隆命名為EGDEAHFQ、NTSNAHFQ。另外,將HFQ基因及其啟動(dòng)子序列構(gòu)建進(jìn)PERL3質(zhì)粒中,通過(guò)電轉(zhuǎn)化的方法導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞NTSNAHFQ中,獲得物基因回復(fù)株,命名為NTSNAHFQ一桷。對(duì)親本株、物缺失株及回復(fù)株的生長(zhǎng)曲線、生理生化特性、溶血活性進(jìn)行了測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,EGDEAHFQ、NTSNAHFQ的生長(zhǎng)趨勢(shì)與野生株相似,溶血活性未發(fā)生明顯變化,但EGDEAHFQ喪失0【葡萄糖苷酶活性,NTSNAHFQ喪失亮氨酸芳胺酶LEUA活性及乳糖氧化能力LAC,表明桷基因的缺失對(duì)細(xì)菌正常的生長(zhǎng)未造成明顯影響,但對(duì)碳源、氮源代謝途徑中的特定代謝通路造成一定的影響。2單核細(xì)胞增生性李斯特菌HFQ基因缺失株生物學(xué)特性研究HFQ蛋白廣泛存在于革蘭陰性菌和某些革蘭陽(yáng)性菌中,能同時(shí)調(diào)控大量靶標(biāo)基因的表鏖羞莖墊縫紲盥塑生世奎逝掛笪魚應(yīng)基國(guó)筮塞拯的掬建叢墓生物堂掛世班窺CONSTRUCTIONANDCHARACTERIZATIONOFLISTERIAMONOCYTOGENESAHFQMUTANTSTRAINSMSCANDIDATEMEIQINKANGADVISORSASSOCIATEPROFYUELANYINPROFXIN’ANJIAOABSTRACTLILLLQ11111QLLLLLLLILLITTLLLILLLLLLLTLLLY2632990GRAMPOSITIVEBREVIBACTERIUMLISTERIAMONOCYTOGENESLMISANIMPORTANTZOONOTICFOODBOMEPATHOGENENGAGINGINBOTHSAPROPHYTISMANDPARASITISMASAFACULTATIVEINTRACELLULARPARASITICBACTERIUM,LMHASRELATIVELYBROADHOSTSPECTRUMINADDITION,ITHASSTRONGABILITYTOADAPTTOCOLD,ACID,ALKALINEANDOSMOTICSTRESS,THEREFORE,ITEXISTSWIDELYINNATUREUNDERDIFFERENTENVIRONMENTALSTRESSCHALLENGES,LMCANADAPT,SURVIVEANDDISPLAYPATHOGENICITY,WHICHISASSOCIATEDWITHTHEREGULATORYNETWORKCONSISTINGOFREGULATINGPROTEINSNFQPROTEINISANEWLYDISCOVEREDVIRULENCEREGULATORYFACTOROFLM,ANDCURRENTLYITISLITTLEKNOWNABOUTTHEROLEOFHFQINBACTERIALGROWTH,METABOLISMANDVIRULENCEREGULATIONTHEECOLOGICALDISTRIBUTIONANDVIRULENCEOFDIFFERENTSEROTYPESOFLMAREOBVIOUSVARIATIONS,WECHOSETHESEROTYPE1/2ASTANDARDSTRAINEGDEANDSEROTYPE4BVIRULENTISOLATENTSNASTHEPARENTALSTRAINS,ANDSUCCESSFULLYCONSTRUCTEDDELETIONSTRAINSOFHFQWITHHOMOLOGOUSRECOMBINATIONTECHNOLOGYTHENTHEABILITYOFSTRESSRESISTANCEANDVIRULENCETOMICEOFDELETIONMUTANTSTRAINSWEREEVALUATEDANDCOMPAREDWITHTHEIRPARENTALSTRAINS,INTHISWAYTHEROLEOFLMHFQPROTEININTHESTRESSTOLERANCEANDVIRULENCEWASPROBED1CONSTRUCTIONANDIDENTIFICATIONOFHFQGENEDELETEDANDREVERSELISTERIALSTRAINSBASEDONHOMOLOGOUSRECOMBINATIONTECHNOLOGY,WESUCCESSFULLYCONSTRUCTED物GENEMUTANTSTRAINSEGDEAHFQANDNTSNAHFQ,RESPECTIVELYFIRSTLYHOMOLOGOUSFRAGMENTSOFTARGETGENEWEREAMPLIFIED,THENSPLICEDTOGETHERWITHSOEINGPCRNEXTLYTHEFUSIONFRAGMENTSANDSHUTTLEVECTORPKSV7WEREDIGESTEDWITHDOUBLEENZYMESRESPECTIVELYTHENPURIFIED,LIGATEDANDTRANSFORMEDINTOCOMPETENTCELLECOLIDH5AAFTERIDENTIFIED,THERECOMBINANTPLASMIDSWERETRANSFORMEDBYELECTROTRANSFORMATIONTOCOMPETENTCELLSOFEGDEANDNTSNRESPECTIVELYUNDER
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    • 簡(jiǎn)介:學(xué)校代碼分類號(hào)10126論文題目學(xué)號(hào)呈至Q墨魚壘編號(hào)HFAD3轉(zhuǎn)基因小鼠來(lái)源的胚胎干細(xì)胞生物學(xué)分析THEBIOLOGICALANALYSIS0FEMBRYONICSTEMCELLSFROM月砌3TRANSGENICMICE學(xué)院生盒型堂堂院專業(yè)動(dòng)物堂研究方向喧塾動(dòng)塑生殖生物堂區(qū)生物這苤姓名奎塞羞指導(dǎo)教師奎光鵬教授2015年6月本研究得到國(guó)家科技重大專項(xiàng)“高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)轉(zhuǎn)基因肉牛新品種培育2013ZX08007002,,課題的支持
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    • 簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文家蠶、野蠶染色體結(jié)構(gòu)變異的細(xì)胞生物學(xué)研究姓名孟智啟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)指導(dǎo)教師徐俊良200051約為總?cè)旧wI/8長(zhǎng)度的一段區(qū)域,LANKY缺失為中間缺失。4.采用GIEMSA法研究了野蠶染色體的核型。野蠶染色體長(zhǎng)度偶線期在卜31.TM之間,變異范圍小,在生物界屬予小染色體類。5.在250GY劑量率1.1GY/MIN”COY射線輻照下,輻照當(dāng)代仍能正常生長(zhǎng)、交尾、產(chǎn)卵,但輻照后的雌或雄與正常的雄或雌雜交產(chǎn)生的后代均表現(xiàn)為不育,經(jīng)對(duì)輻照當(dāng)代的生殖細(xì)胞染色體進(jìn)行顯微觀察,發(fā)現(xiàn)了缺失、易位、倒位等染色體異常結(jié)構(gòu),據(jù)此判明染色體結(jié)構(gòu)畸變是造成后代不育的主要原因。6.對(duì)于Y射線輻照后的野蠶生殖細(xì)胞染色體顯微觀察發(fā)現(xiàn)了染色體斷裂一重接易位的細(xì)胞學(xué)證據(jù)。根據(jù)這一細(xì)胞學(xué)證據(jù),關(guān)于野蠶染色體數(shù)地域差異的成因推論認(rèn)為古野蠶染色體數(shù)N28,在棲息進(jìn)化過(guò)程中,日本等地的野蠶因某種環(huán)境條件刺激,其中一條染色體發(fā)生斷裂,大的斷裂片段易位到非同源染色體后融合形成一條大染色體,小的片段在遺傳傳遞過(guò)程中丟失,致使染色體數(shù)N27,其后在進(jìn)化演變過(guò)程中,該種群穩(wěn)定遺傳不斷擴(kuò)大延續(xù)至今,形成了中國(guó)和日本二個(gè)地域野蠶亞種群。7.應(yīng)用RAPD法對(duì)帶有性連鎖平衡致死基因L。、L。的雌蠶進(jìn)行了PCR擴(kuò)增。結(jié)果發(fā)現(xiàn)引物B1_OS’CTGCTGC_KBAC3’PCR擴(kuò)增條帶在W“ZL“”和W“Z眥之間呈現(xiàn)多態(tài)性,即在W“1Z11。和WNZL?有一個(gè)約900BP的共同擴(kuò)增片段ZWAL,但在WⅢZ”。上分別有一個(gè)650BPZWA3和800BPZWA2左右的特異片段,在W“1Z“M上分別有一個(gè)510BPZWALL和450BPZWAL2左右的特異片段。這四個(gè)片段可作為性連鎖平衡致死基因L,和L的特有標(biāo)記。8.將上述四個(gè)特異性片段亞克隆,測(cè)序后通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)向DDBJDNADATABASEOFJAPAN同源性檢索表明,ZWALL片段與家蠶的黃嘌呤脫氫酶基因的5’側(cè)翼區(qū)域有90%的同源性,初步斷定ZWALL是一個(gè)與喋啶類化合物代謝有關(guān)的基因片段;ZWA3片段與家蠶的BML反轉(zhuǎn)座因子的5’側(cè)翼區(qū)域有93%同源性,據(jù)此斷定ZWA3是BML反轉(zhuǎn)座因子片段;ZWA2和ZWAL2分別是FALCOPEREGRINUSCLONE5,L衛(wèi)星DNA片段和MLLEAGRISGALLOPAVO衛(wèi)星DNA片段。Ⅳ
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    • 簡(jiǎn)介:?jiǎn)挝淮a106350學(xué)號(hào)1120133170012900碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文硬骨魚類膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子硬骨魚類膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子GDNF的分離鑒定、表達(dá)及生物學(xué)活性研究的分離鑒定、表達(dá)及生物學(xué)活性研究論文作者劉林燕指導(dǎo)教師魏靜(副教授)學(xué)科專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向分子免疫與分子藥學(xué)提交論文日期2016年4月17日論文答辯日期2016年5月28日學(xué)位授予單位西南大學(xué)中國(guó)?重慶2016年4月理學(xué)碩士學(xué)位論文理學(xué)碩士學(xué)位論文生物化學(xué)與分子生物學(xué)專業(yè)碩士研究生生物化學(xué)與分子生物學(xué)專業(yè)碩士研究生劉林燕劉林燕指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師魏靜魏靜副教授副教授西南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院西南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院二零一六年四月二零一六年四月中國(guó)中國(guó)重慶重慶
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    • 簡(jiǎn)介:中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)碩士學(xué)位論文同步輻射小麥引起的生物學(xué)效應(yīng)血源與基因工程Α干擾素抑制貯脂細(xì)胞增殖及膠原合成的比較研究姓名趙凌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師顧月華200141中國(guó)科學(xué)技術(shù)人學(xué)預(yù)上學(xué)位論文第一部分同步輻射對(duì)小麥引起的生物學(xué)效應(yīng)摘要研究了不同劑量的同步輻射軟X射線源輻照小麥種子后產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng),以期從細(xì)胞和分子水平蛋白質(zhì)、酶及DNA等上揭示同步輻射軟X射線源對(duì)生物體的誘變效應(yīng)及其作用機(jī)制,為其應(yīng)用于輻射育種提供理論依據(jù)。I我們進(jìn)行了以下研究I檢測(cè)小麥幼苗細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化作用及保護(hù)酶活性。可以看出,隨著同步輻射軟X射線劑量的增加,脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛MDA的含量也隨之增加;在保護(hù)酶系統(tǒng)中,過(guò)氧化氫酶CAT、過(guò)氧化物酶POD、超氧化物歧化酶SOD的活性變化不表現(xiàn)出同步性,表明三者之間存在相互協(xié)調(diào)的關(guān)系,處理組葉綠素含量及葉綠體中關(guān)鍵的保護(hù)酶抗壞血酸過(guò)氧化物酶APX的活性始終低于空白對(duì)照組。結(jié)果表明同步輻射軟X射線輻照對(duì)于小麥細(xì)胞保護(hù)酶活性及脂質(zhì)過(guò)氧化作用的影響很大。II采用單細(xì)胞凝膠電泳方法檢測(cè)了同步輻射軟X射線源對(duì)DNA造成的單鏈損傷,通過(guò)測(cè)定DNA遷移效應(yīng),表明DNA損傷程度與輻照劑量呈顯著的正相關(guān)性。1ID采用TUNEL方法來(lái)進(jìn)行原位細(xì)胞凋亡檢測(cè),并結(jié)合DAPI熒光染色,表明同步輻射軟X射線源輻照小麥種子可以使之產(chǎn)生不同程度上的細(xì)胞凋亡。通過(guò)統(tǒng)計(jì)細(xì)胞凋亡率,也表明損傷程度與輻照劑量成『F相關(guān)性。以上實(shí)驗(yàn)表明,作為一種新的誘變?cè)?,同步輻射軟X射線輻照麥類作物種子的生物學(xué)效應(yīng)顯著,它不僅能夠?qū)π←溂?xì)胞遺傳物質(zhì)造成損傷同時(shí)也能對(duì)相關(guān)的體內(nèi)保護(hù)酶系統(tǒng)產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用,因此應(yīng)用同步輻射進(jìn)行農(nóng)業(yè)育種將有、極大的發(fā)展?jié)摿颓熬啊?關(guān)鍵詞同步輻射軟X射線源;小麥細(xì)胞;脂質(zhì)過(guò)氧化;保護(hù)酶系統(tǒng);單細(xì)胞凝膠電泳;細(xì)胞凋亡
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    • 簡(jiǎn)介:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文綿羊胚胎期血漿促性腺激素生物學(xué)活性的變化和垂體細(xì)胞體外無(wú)血清培養(yǎng)模型的建立姓名曹興元申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生理學(xué)指導(dǎo)教師崔勝200261里奎些查堂墮主絲苧90、120天和分娩時(shí)分別為10.190.27NG/ML、9.320.13NG/ML、7.320.21NG/ML、7.02/0.29N咖1?!危蠜把芯拷Y(jié)果提示『血漿B.FSH和B.LH在妊娠前期生物學(xué)濃度較骶,在妊娠中期生物學(xué)濃度達(dá)到最高,隨后生物學(xué)活性下降或保持恒定。并且雌雄胚胎BFSH和BLH之問(wèn)存在著性別差異。與先前RIA方法對(duì)FSH和LH的研究相比,存在著較大的差異,說(shuō)明促性腺激素生物學(xué)活性的測(cè)定方法比RJA方法更能準(zhǔn)確反應(yīng)胚胎期FSH和LH的生理功能。此外,本實(shí)驗(yàn)還建立了綿羊垂體細(xì)胞體外無(wú)血清培養(yǎng)模型,并且對(duì)培養(yǎng)不同時(shí)間的垂體細(xì)胞進(jìn)行了LHB的免疫細(xì)胞化學(xué)染色,以檢測(cè)培養(yǎng)過(guò)程中垂體細(xì)胞自主分泌LH的能力。結(jié)果在無(wú)血清培養(yǎng)4天后的垂體細(xì)胞,LHFL免疫陽(yáng)性染色的細(xì)胞顯著性增加,說(shuō)明此時(shí)垂體細(xì)胞具有較強(qiáng)的LH合成能力。∥夠P切紹論『2關(guān)鍵詞卵泡刺激素,促黃體生成素,綿羊胚胎,生物學(xué)活性,細(xì)胞培養(yǎng),垂體,”1。。VX
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    • 簡(jiǎn)介:揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文馬立克氏病病毒類白細(xì)胞介素8基因表達(dá)及生物學(xué)特性研究姓名張?chǎng)斡钌暾?qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師秦愛(ài)建20030501塑矍盔蘭矍查蘭壘笙苧一一2分離盤滇,靂闋接受疫熒光法檢測(cè)撓俸滾度。蘇PERIL8擺矮粒與黼活疫鎣聯(lián)合免疫雛雞。試驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn)組與對(duì)照組抗體滴度無(wú)顯著荔異,這些結(jié)果表明,上述免疫途徑簸方法船入辯VLL一8,對(duì)梳體俸液免疫無(wú)疆顯靜調(diào)節(jié)依靂,然而透過(guò)其它途徑能否對(duì)機(jī)體免疫有調(diào)節(jié)作用還裔特進(jìn)一步的研究。關(guān)鍵詞馬立克氏病病毒;病毒類白細(xì)胞介素8;序歹0分祈;表達(dá);趨化性;兔疫源性;免疫調(diào)節(jié)
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    • 簡(jiǎn)介:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文利用分子生物學(xué)與細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測(cè)小型昆蟲(chóng)的共生微生物沃爾巴克氏體(WOLBACHIA)姓名張照琳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲(chóng)與害蟲(chóng)防治指導(dǎo)教師叢斌200361沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)硬士學(xué)位論文攘要沃爾巴克氏體WOLBACHIA是廣泛分布于節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)的~類共生菌,通過(guò)生殖細(xì)胞盼細(xì)胞質(zhì)傳播,參與多種調(diào)控其宿主生糠活動(dòng)的稅鑭,W隧誘導(dǎo)宿主發(fā)生生殖不親和、產(chǎn)雌弧雌生娥、雌性化等現(xiàn)象。研究沃爾巴克氏體對(duì)于了解昆蟲(chóng)瓣生殖生物學(xué)、住剮決定稅制、物種遴純及天工調(diào)控昆蟲(chóng)生殖行為方面意義麓大。試驗(yàn)驀在建立沃爾澄克氏侮WOLBACHIA懿PCR技術(shù)襝溺體系,利用這一體系檢測(cè)沃爾巴克氏體在不同分類階元的小型昆墩中的分布;利用細(xì)胞學(xué)技術(shù)麓察沃爾巴克氐俸的努酃形態(tài)。附試驗(yàn)綴采進(jìn)行分拆,德弱戳下結(jié)論1利用三種昆蟲(chóng)總DNA攝取的方演一SDS法、單個(gè)昆蟲(chóng)總DNA提取法、CTAB法分裂褥蘩供試琵蟲(chóng)卷娥券眼蜂TRICHOGRAMMACACOECIAE、食憝赤眼蜂TEMBRYOPHAGUM、玉米蠛赤眼蜂TOSTRINIAE、稻水象甲LISSORHOPTRUSORYZOPHILUSKUSCHE玟瀣室自羧氳TRIALEURODESVAPORARIORUMWESTWOOD、桃蚜MYZUSPERSICAESULZER和煙蚜黻蜂APHIDIUSGIFUENSISASHMEAD的總£雕A。2三種昆蟲(chóng)總DNA提取方法的OD比值和DNA濃度P∥P1的結(jié)果如下,SDS法138、066,L,57、14,L。43、06,154、L。2,L。38、0。54,L。56、150;單個(gè)昆煦總DNA提取法195、129,L,79、O75,150、O54,152、0。96,18E、O27,194、105;CTAB法16、ET3;L。9、L。77,L。57、O99,166、228,171、144。雖然三種方法的結(jié)果與研磨稷度、昆搬種類、蟲(chóng)體大,L、稆個(gè)數(shù)套一定關(guān)系,但綜會(huì)寒說(shuō),CTAB法在試驗(yàn)成本、聯(lián)提取惑DNA的濃度和質(zhì)量、PCR反應(yīng)的效果和重復(fù)性三方砸優(yōu)于其他兩種方法,怒一種適臺(tái)提毅小型瞧蟲(chóng)惑DNA的遙熙方法。3建立并驗(yàn)證了沃爾巴克氏體的PCR技術(shù)檢測(cè)體系。PCR反應(yīng)體系的終髂積為209L,含騫TUTAQDNA聚合酶期50~200NG模扳DNA。反應(yīng)程序94。C3MIN94℃LMIN,55℃LMIN,72℃1RAIN,循環(huán)30次_72℃7MIN。4利用沃爾豈克氏體WSP基因的一對(duì)通用弓|物81F,691R,以7葶孛供試?yán)ハx(chóng)的總DNA為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)。從卷蛾赤眼蜂TCACOECIAP、食胚赤跟蜂TEMBRYOPHAGUM和稻水象甲三ORYZOPHILUS的總DNA中擴(kuò)增到
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    • 簡(jiǎn)介:中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院木材工業(yè)研究所博士學(xué)位論文毛白楊的形成層活動(dòng)及其木材形成的組織和細(xì)胞生物學(xué)研究姓名殷亞方申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)木材科學(xué)與技術(shù)指導(dǎo)教師姜笑梅20020625摘要摘要從組織和細(xì)胞水平上研究形成層細(xì)胞向木質(zhì)部細(xì)胞的分化,揭示木材的形成過(guò)程,是了解木材各種性質(zhì)成因的前提,也是開(kāi)展木材形成的分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。盡管已經(jīng)針對(duì)體外培養(yǎng)模式系統(tǒng)和針葉樹(shù)種開(kāi)展了許多工作,但對(duì)于木質(zhì)部細(xì)胞類型多且木材結(jié)構(gòu)復(fù)雜的闊葉樹(shù)種,己有的研究對(duì)其術(shù)材形成的過(guò)程和機(jī)理了解得還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。本研究是以形成層細(xì)胞向木質(zhì)部細(xì)胞的分化為主線,在組織和細(xì)胞水平上,從形成層的活動(dòng)規(guī)律和木質(zhì)部細(xì)胞的分化過(guò)程,以及形成層細(xì)胞與其衍生木質(zhì)部細(xì)胞在解剖形態(tài)上的關(guān)系這三個(gè)方面,系統(tǒng)地研究了闊葉樹(shù)模式樹(shù)種MODELHARDWOODSPECIES毛白楊POPULUSTOMENTOSACARR.的木材形成過(guò)程。在形成層活動(dòng)規(guī)律的研究中,通過(guò)光學(xué)顯微鏡LM觀察,明確了毛白楊形成層一個(gè)完整活動(dòng)周期的活動(dòng)式樣以及次生組織的分化方式。并采用聚丙烯酰胺凝膠電泳PAGE和過(guò)氧化物酶POD組織化學(xué)染色,了解了不同時(shí)期形成層帶POD的分布、POD同工酶的變化及其對(duì)次生木質(zhì)部分化的影響。利用透射電子顯微鏡TEM首次得到了毛白楊完整活動(dòng)周期內(nèi)不同階段形成層帶超微結(jié)構(gòu)的變化信息。在木質(zhì)部細(xì)胞分化過(guò)程的研究中,通過(guò)TEM和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù),了解了細(xì)胞分化過(guò)程不同階段細(xì)胞壁和原生質(zhì)體超微結(jié)構(gòu)的變化方式,并首次提出了闊葉樹(shù)種不同類型細(xì)胞分化過(guò)程的示意圖。采用冰凍切片和直接碳復(fù)型技術(shù)DCR,首次揭示了各類型細(xì)胞分化過(guò)程中纖維素微纖絲CMFS在細(xì)胞壁上的沉積方式,并提出了木纖維細(xì)胞壁上CMFS沉積方式的模式圖。應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法結(jié)合激光共聚焦顯微鏡CLSM,首次得到了各類型細(xì)胞分化過(guò)程中周質(zhì)微管CMTS排列方式的動(dòng)態(tài)變化情況,并討論了其與細(xì)胞壁上CMFS沉積方式的相互關(guān)系,研究結(jié)果為樹(shù)木木質(zhì)部細(xì)胞分化過(guò)程中CMTS排列方式控制細(xì)胞壁上CMFS沉積方式的假設(shè)提供了新的證據(jù)。通過(guò)KMN04溶液染色方法結(jié)合TEM觀察,了解了木質(zhì)素在細(xì)胞壁上的沉積方式。最后采用酶細(xì)胞化學(xué)定位方法,觀察了細(xì)胞分化過(guò)程中POD在細(xì)胞壁上的分布,并討論了POD的位置與細(xì)胞壁上木質(zhì)素沉積之間的關(guān)系。在形成層細(xì)胞與其衍生木質(zhì)部細(xì)胞解剖形態(tài)關(guān)系的研究中,應(yīng)用定量解剖學(xué)和顯微圖像分析技術(shù),得到了兩者的解剖特征在活動(dòng)期的變化情況;采用X射線微密度測(cè)定技術(shù),了解了同一生長(zhǎng)輪內(nèi)木材密度沿徑向方向上的變異,討論了其與木質(zhì)部細(xì)胞解剖特征的關(guān)
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    • 簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文EGCG與銅離子的相互作用及其細(xì)胞生物學(xué)行為姓名于海寧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)茶學(xué)指導(dǎo)教師沈生榮20040201摘要據(jù)調(diào)查,在歐美,人類因患前列腺癌引起的死亡率現(xiàn)已位居第二,僅次于肺癌。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究初步證實(shí)EGCG具有一定的預(yù)防、治療前列腺癌的作用。銅離子是人體必需的微量元素,過(guò)量積累或缺乏會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生,包括癌癥。金屬離子與兒茶素的相互作用是近年來(lái)茶葉生物化學(xué)和生物無(wú)機(jī)化學(xué)的研究熱點(diǎn),而銅離子與EGCG的相互作用及其細(xì)胞生物學(xué)行為至今國(guó)內(nèi)外少有報(bào)道。本文利用前列腺癌細(xì)胞包括激素依賴型前列腺癌細(xì)胞LNCAP和非激素依賴型前列腺癌細(xì)胞PC一3培養(yǎng)體系研究了EGCG、CU”對(duì)前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響和損傷機(jī)理;EGCG與CU2共存對(duì)前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,及兩者生物學(xué)活性的變化;細(xì)胞培養(yǎng)條件下EGCG含量變化速度;EGCG、CU2存在及兩者共存時(shí),F(xiàn)12培養(yǎng)液發(fā)光強(qiáng)度的動(dòng)態(tài)變化和自由基的產(chǎn)生情況。MTT法實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),EGCG與CU2均能抑制LNCAP細(xì)胞和PC.3細(xì)胞的生長(zhǎng),并與劑量呈正相關(guān),EGCG與CU2抑制作用的最佳作用時(shí)間均為24小時(shí);加入CU“,只有EGCG與CU”的相對(duì)濃度較高時(shí),EGCG對(duì)CU2誘導(dǎo)的LNCAP細(xì)胞毒性有一定的抑制作用,否則促進(jìn)細(xì)胞死亡;在PC一3細(xì)胞培養(yǎng)體系中,CU”存在下,EGCG對(duì)CU”誘導(dǎo)的PC3細(xì)胞的毒性明顯減弱;LNCAP細(xì)胞培養(yǎng)體系中,當(dāng)后加入CU”時(shí),CU2對(duì)EGCG誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性有極顯著促進(jìn)作用,在同樣水平下,CU2對(duì)EGCG誘導(dǎo)的PC3細(xì)胞毒性無(wú)顯著影響。增加PC.3細(xì)胞體系中EGCG的濃度,CU2對(duì)EGCG誘導(dǎo)的PC.3細(xì)胞毒性有促進(jìn)作用。而在EGCG存在下,CU2對(duì)LNCAP細(xì)胞的毒性顯著降低。PC3細(xì)胞體系中,低濃度EGCG對(duì)CU2誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性明顯減弱,但高濃度EGCG對(duì)低濃度CU2誘導(dǎo)的PC.3細(xì)胞的毒性無(wú)影響,只有高濃度CU2誘導(dǎo)的PC.3細(xì)胞的毒性才能被抑制。當(dāng)后加入EGCG時(shí),只有EGCG與CUZ濃度比達(dá)到一定值時(shí)CU2對(duì)LNCAP細(xì)胞的毒性被抑制,而PC.3細(xì)胞體系中,EGCG對(duì)CU2誘導(dǎo)的毒性無(wú)影響。凝膠電泳及流式細(xì)胞儀測(cè)定結(jié)果表明,壞死是導(dǎo)致LNCAP細(xì)胞和PC.3細(xì)胞生長(zhǎng)受到抑制的主要原因。利用透射電鏡觀察,發(fā)現(xiàn)處理后的前列腺癌細(xì)胞多數(shù)呈壞死癥狀,細(xì)胞膜有不同程度的損傷,細(xì)胞膜是EGCG、CU2或兩者相互作用時(shí)對(duì)細(xì)胞損傷的主要作用位點(diǎn)。
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    • 簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文大麥根尖和邊緣細(xì)胞鋁毒生物學(xué)特性及其機(jī)理研究姓名潘建偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)遺傳學(xué)指導(dǎo)教師朱睦元200251不可逆的過(guò)程。通過(guò)基因工程方法導(dǎo)入凋亡抑制基因是作物抗逆性遺傳改良的一條新策略,也是細(xì)胞凋亡研究成果的具體應(yīng)用,目前國(guó)內(nèi)仍未見(jiàn)正式報(bào)道。本研究試圖通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將凋亡抑制基因CED09導(dǎo)入煙草,獲得高耐鋁性的轉(zhuǎn)基因植株。結(jié)果表明,利用PGEM一7Z“載體上的SACI和XBAI位點(diǎn),將PBS載體上的CED9基因成功地克隆到表達(dá)載體PBIL21含CAMV35S上,定名為PBITED一9。通過(guò)農(nóng)桿菌感染煙草葉盤,經(jīng)篩選、誘導(dǎo)和分化后,共獲得96株再生植株TO。經(jīng)PCR檢測(cè)和SOUTHERN雜交表明,目的基因CED9已整合到煙草基因組中。有關(guān)轉(zhuǎn)基因植株的CED9表達(dá)活性及其對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育的影響、耐鋁性鑒定將在TL、T2、T3代進(jìn)行。根邊緣細(xì)胞BC研究是最近幾年植物學(xué)和遺傳學(xué)的新領(lǐng)域之一。本實(shí)驗(yàn)表明,大麥CVHANG981BC發(fā)育啟動(dòng)與根發(fā)育幾乎同步,這與豆科植物BC發(fā)育不同。在懸空氣培中,大麥BC發(fā)育屬于非組成型表達(dá)的過(guò)程。在水培中,每個(gè)根每天仍釋放300350個(gè)BC,屬于組成型表達(dá)過(guò)程。根冠PME活性檢測(cè)表明,大麥BC發(fā)育與PME活性具有密切的相關(guān)性,PME活性在BC游離過(guò)程中起著重要作用。溫度對(duì)大麥根伸長(zhǎng)有明顯的抑制作用,但對(duì)BC發(fā)育影響不大。鋁毒對(duì)離體收集的BC活性影響非常明顯。大麥耐鋁品種CVHUMAI16的BC經(jīng)20和501TMOI/LAI處理后,其活性無(wú)顯著性差異,而敏感品種CV20002的BC活性卻受到顯著抑制,說(shuō)明BC的耐鋁性與其個(gè)體植株水平的耐鋁性相一致。到目前為止,國(guó)內(nèi)外有關(guān)鋁毒對(duì)植物BC發(fā)育的影響仍未見(jiàn)正式報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)表明,鋁毒對(duì)大麥BC發(fā)育有明顯的抑制作用。20“M01/LAI對(duì)CV20002的BC發(fā)育有顯著性抑制PO05,但對(duì)CVHUMAI16的BC發(fā)育的影響不大。50UMOL/LAL對(duì)這兩個(gè)品種的BC發(fā)育均有顯著性抑制POOI。PME活性檢測(cè)表明,鋁毒很可能通過(guò)抑制根冠細(xì)胞壁PME活性從而抑制BC發(fā)育。另外,根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn),BC及其粘液對(duì)鋁毒誘導(dǎo)的大麥根伸長(zhǎng)抑制的保護(hù)功能很小。但在低濃度鋁或短時(shí)間護(hù)作用。關(guān)鍵詞細(xì)胞程序性死亡基因工程根邊緣細(xì)胞、/∥。V一定的保/甲基酯酶
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