簡介：分類號R782．1密級公開微納形貌鉭及鉭／羥基磷灰石涂層對骨髓間充質(zhì)干細胞生物學活性的影響EFFECTSOFTANTALUMANDTANTALUM／HYDROXYAPATITECOATINGWITHMICRO／NANOSTRUCTUREONTHEBIOACTIVITYOFBONEMESENCHYMALSTEMCELL作者姓名路榮建學科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學導師劉洪臣教授答辯委員會主席夕Ⅵ∥～論文答辯日期二。一五年五月二十八日基金資助國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃863計劃編號2015AA033502院校地址北京市復興路28號郵政編碼100853豫阢辦玩目錄縮略詞表???????????????????????????1中文摘要???????????????????????????3英文摘要???????????????????????????7前言???????????????????????????13正文???????????????????????????15實驗一純鈦表面微納形貌鉭涂層的制備及其表面特性研究?????151．材料和方法???????1OOOGOO????????????152．結(jié)果????????????????????????183．討論????????????????????????21實驗二微納形貌鉭涂層對骨髓間充質(zhì)干細胞生物學活性的影響???231．材料和方法????????????????????????232．結(jié)果????????????????????????313．討論????????????????????????40實驗三純鈦表面微納形貌鉭／羥基磷灰石復合涂層的制備及其表面特性研究???????????????????????431．材料和方法????????????????????????432．結(jié)果????????????????????????453．討論????????????????????????50實驗四微納形貌鉭／羥基磷灰石復合涂層對骨髓間充質(zhì)干細胞生物學活性影響??????????????????????521．材料和方法????????????????????????522．結(jié)果????????????????????????583．討論????????????????????????65全文總結(jié)???????????????????????????67參考文獻???????????????????????????68文獻綜述??????????????????????????77個人簡歷及研究成果??????????????????????85致謝????????????????????????????86

簡介：造血干細胞（HEMATOPOIETICSTEMCELLS）是一類異質(zhì)性的、具有自我更新和多向血細胞分化潛能的成體干細胞。根據(jù)來源不同，其可分類為骨髓造血干細胞，臍血造血干細胞胎肝造血干細胞和外周血造血干細胞。因外周血造血干細胞（PBHSC）具有采集方法簡便，短期內(nèi)可重復采集，受者輸注后造血、免疫功能重建快，且植入率高等優(yōu)點，在移植和細胞免疫治療方面發(fā)揮日益重要的作用。微泡MV是細胞分泌的亞微米雙層膜結(jié)構(gòu)，包括從內(nèi)涵體分泌的外泌體，以及從絕大多數(shù)細胞膜表面分泌的微粒。其含有母體細胞的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、MRNA以及MICRNA等成分，通過與其它細胞融合，將其內(nèi)容物釋放到靶細胞，影響其功能，從而在不同細胞間信息傳遞過程中發(fā)揮重要作用。微泡可由多種細胞分泌，并廣泛分布于血漿、唾液、乳汁、汗液等各種體液中。不僅正常細胞可分泌微泡，腫瘤細胞也可以分泌微泡在腫瘤病人的體液中可以檢測到微泡。因此在生理和病理狀態(tài)下不同細胞分泌的微泡是一個混合的群體。微泡隨著細胞的來源、數(shù)量、大小和抗原成分的變化而不同。外周血造血干細胞具有免疫調(diào)節(jié)，促進造血恢復等作用。因為微泡帶有母體細胞的信息，所以我們推斷外周干來源的微泡可能也具有同樣的功能。而且研究表明，微泡沒有或者具有很小的免疫原性，如果其具有一定的功能，可具有廣泛的臨床應(yīng)用。但是，目前對外周血造血干細胞來源的微泡研究甚少。本研究旨在對外周血造血干細胞來源的微泡進行生物學特性探究，尤其對其免疫調(diào)節(jié)和促造血功能加以探索。研究目的提取并鑒定正常人外周血造血干細胞來源的微泡，并研究其生物學特性包括探究正常人外周血造血干細胞來源的微泡的免疫調(diào)節(jié)功能及對造血集落形成的影響。研究內(nèi)容將正常人外周血造血干細胞提取并培養(yǎng)，從培養(yǎng)上清中提取出外周血造血干細胞來源的微泡并鑒定，研究其生物學特性探究正常人外周血造血干細胞來源的微泡對外周血單個核細胞是否具有免疫調(diào)節(jié)功能及正常人外周血造血干細胞來源的微泡是否對造血集落形成有影響研究方法（1）利用密度梯度離心法分離正常人動員后外周血造血干細胞，收集培養(yǎng)第48小時上清液，超速離心法分離提取微泡（2）通過電子顯微鏡觀察微泡形態(tài)；采用BICINCHONINICACIDBCA法標定微泡數(shù)量；采用流式細胞儀檢測其表面標志物；（3）將微泡與正常人外周血單個核細胞PBMNC）共培養(yǎng)12H后，通過共聚焦掃描電鏡觀察微泡與單個核細胞的作用方式；共培養(yǎng)48H后采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法ELISA）法檢測上清中IL2IL6IL8IL10IFNΓ及TNFΑ的分泌量；共培養(yǎng)48H后采用流式細胞儀檢測T細胞亞群及T細胞激活變化；共培養(yǎng)48H后采用流式細胞儀檢測不同亞群細胞胞內(nèi)細胞因子染色情況；（4）采用甲基纖維素半固體培養(yǎng)基檢測微泡及微泡與單個核細胞共培養(yǎng)48小時后上清液對外周血造血干細胞集落形成的影響。研究結(jié)果通過密度梯度離心法可提取出動員后外周血造血干細胞。利用超速離心法可成功提取出外周血造血干細胞來源的微泡。透射電子顯微鏡觀察分離得到的微泡為卵圓形膜性小囊泡。流式細胞術(shù)測得微泡高表達其特異性標志CD638586％并帶有其母體細胞標志如干細胞標志CD343352，T細胞標志CD34398、CD45RA2354、CD45RO683，NK細胞標志CD563232等。共聚焦掃描電鏡顯示微泡可以與外周血單個核細胞相融合并促進其分泌IL6IL8，IL10與TNFΑ細胞因子。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示T細胞亞群及T細胞激活無明顯改變。胞內(nèi)因子染色結(jié)果表明CD4CD8CD11C細胞內(nèi)因子無明顯改變。集落培養(yǎng)實驗表明微泡及微泡與單個核細胞共培養(yǎng)48小時后上清液很可能具有促進造血集落形成的作用。研究結(jié)論外周血造血干細胞來源的微泡具有免疫調(diào)節(jié)及可能促進造血集落形成的作用。

簡介：冠狀動脈疾?。–AD）是目前嚴重威脅人類身體的重大疾病之一，在病變部位置入藥物洗脫支架（DESS）是迄今最好的治療方法，可減少血管再狹窄的幾率，但再狹窄率（ISR）并沒有完全消除，因此，再狹窄的預(yù)防和治療成為心血管疾病研究領(lǐng)域中的熱點。如何實現(xiàn)快速內(nèi)皮化和抑制平滑肌過度增生是目前預(yù)防再狹窄面臨的兩大挑戰(zhàn)。本文通過體外細胞實驗，探究新一代抗腫瘤藥物托瑞米芬（T）對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECS）和血管平滑肌細胞（VSMCS）的細胞生物學行為的影響及其作用機制。本文主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下①T影響內(nèi)皮細胞生物學行為。研究表明T能抑制內(nèi)皮細胞增殖且隨著T濃度增大其抑制作用也逐漸加強；顯著促進了內(nèi)皮細胞的早期凋亡，晚期凋亡及細胞壞死；抑制內(nèi)皮細胞的分裂并將細胞阻滯在G0G1期；延遲了內(nèi)皮細胞的粘附時間卻并未影響其粘附總數(shù)；顯著抑制細胞的運動和遷移行為；≥75ΜM的T可以明顯地改變細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。②T影響內(nèi)皮細胞的機制。免疫熒光和免疫印記雙重驗證的方法檢驗PCNA、P53及RHOROCK信號通路的關(guān)鍵蛋白的表達量。研究結(jié)果表明T濃度愈高，PCNA的表達量明顯降低，暗示T抑制內(nèi)皮細胞增殖的作用就愈明顯；而P53的表達隨T濃度的增加而增加，說明T是通過促進P53的表達而加速細胞的凋亡；T顯著抑制了整合素INTEGRINΒ1及RHO的表達，進而降低了ROCK信號通路中下游因子MLC和PMLC的表達水平。說明T可能是通過INTEGRINΒ1RHOROCKPMLC信號通路抑制內(nèi)皮細胞的遷移行為。③T影響平滑肌細胞生物學行為。研究表明該藥物也能抑制平滑肌細胞增殖且隨著濃度增大抑制作用逐漸增強；顯著促進了平滑肌細胞的早期凋亡，晚期凋亡及細胞壞死；抑制平滑肌細胞的分裂并將細胞阻滯在G0G1期；延遲了平滑肌細胞的粘附時間并影響其粘附總數(shù)；顯著抑制平滑肌細胞群體的運動和遷移行為；高濃度的T可以明顯改變細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。④T影響平滑肌細胞的機制。采用免疫熒光和免疫印記雙重驗證的方法分別對PCNA，P53及RHOROCK信號通路中的關(guān)鍵蛋白的表達量進行分析，并運用流式細胞術(shù)對T影響平滑肌細胞的調(diào)亡行為作進一步的探討。結(jié)果表明隨著T濃度增高，PCNA表達量明顯降低，抑制平滑肌細胞增殖的作用就愈明顯；而P53的表達隨T濃度的增加而增加，說明T是通過促進P53的表達而加速細胞的凋亡；高濃度T促進了平滑肌線粒體膜電位下降進而使釋放的活性氧水平升高，激活CASPASE3及9，最終促進了平滑肌細胞的凋亡。遷移機制的研究結(jié)果表明T顯著抑制了整合素INTEGRINΒ1及RHO的表達，進而降低了ROCK信號通路中下游因子MLC和PMLC的表達水平。說明T可能是通過INTEGRINΒ1RHOROCKPMLC信號通路抑制細胞的遷移行為。

簡介：不同剛度三維脫細胞支架的制備及其對乳腺腫瘤細胞生物學行為的影響重慶大學碩士學位論文（學術(shù)學位）學生姓名李貴指導教師楊力教授呂永鋼教授專業(yè)生物學學科門類理學重慶大學生物工程學院二O一七年四月重慶大學碩士學位論文中文摘要I摘要目的本文擬通過制備不同剛度的三維THREEDIMENSION3D脫細胞基質(zhì)DECELLULARIZEDEXTRACELLULARMATRIXDECM離體模擬人乳腺腫瘤組織微環(huán)境，探究基質(zhì)剛度對乳腺腫瘤細胞MDAMB231細胞活力和細胞浸潤等生物學行為的影響。方法構(gòu)建干擾和過表達賴氨酰氧化酶LYSYLOXIDASELOX基因的慢病毒載體，并分別轉(zhuǎn)染乳腺腫瘤細胞MDAMB231細胞，通過實時熒光定量多聚核苷酸鏈式反應(yīng)QUANTITATIVEREALTIMEPOLYMERASECHAINREACTIONQPCR和免疫印跡WESTERNBLOT檢測LOXMRNA與蛋白的表達。將表達不同量LOX的MDAMB231細胞注射裸鼠腋窩皮下，成瘤后經(jīng)脫細胞方法得到3DDECM支架，并使用材料試驗機測得其彈性模量。使用掃描電子顯微鏡觀察DECM顯微結(jié)構(gòu)。通過石蠟切片及組織學染色進一步檢測細胞外基質(zhì)EXTRACELLULARMATRIXECM重要組分。在不同剛度DECM進行再細胞化，利用LIVEDEAD染色及MTS檢測1、4、7與10天的細胞活力，通過蘇木素伊紅HEMATOXYLINEOSINHE染色檢測再細胞化7天后細胞浸潤。最后通過QPCR檢測再細胞7天后上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化EPITHELIALMESENCHYMALTRANSITIONEMT間質(zhì)標志物波形蛋白VIMENTIN和轉(zhuǎn)錄因子SNAIL1以及I型膠原COLLAGENI、纖連蛋白FIBRONECTIN與LOXMRNA的表達。結(jié)果經(jīng)脫細胞法形成的不同剛度3DDECM完好保存了ECM組分與結(jié)構(gòu)，再細胞化實驗表明這種不同剛度的3DDECM對乳腺腫瘤細胞MDAMB231細胞的生物學行為具有重要影響。①Q(mào)PCR與WESTERNBLOT結(jié)果表明轉(zhuǎn)染干擾LOX慢病毒載體的MDAMB231細胞中LOX基因與蛋白的表達被顯著抑制，而過表達組中LOX表達量明顯提升。②組織學染色結(jié)果表明各組DECM中細胞被完全脫去，而且完整保持了ECM結(jié)構(gòu)及膠原、糖胺聚糖等主要組分。③掃描電子顯微鏡及力學性能測定結(jié)果表明對照組DECM孔隙率為4847527，剛度為324039KPA；低剛度組的DECM孔隙率為增加為6812574，剛度減小為257026KPA；相反地，高剛度組的DECM孔隙率減小為3268430，剛度增加為491031KPA。④再細胞化實驗結(jié)果表明MDAMB231細胞可浸潤至不同剛度的支架內(nèi)部并且生長狀態(tài)良好。⑤QPCR結(jié)果表明高剛度組脫細胞基質(zhì)促進MDAMB231LOXMRNA的表達；低剛度組脫細胞基質(zhì)促進VIMENTINMRNA的表達，抑制FIBRONECTINMRNA的表達。

簡介：山東師范大學碩士學位論文用于細胞內(nèi)具有重要生物學意義的活性小分子物種的高選擇性識別的新型熒光探針的合成研究及其在生物體系中的應(yīng)用姓名于法標申請學位級別碩士專業(yè)分析化學指導教師唐波20090405近紅外熒光活性物種檢測成的機理常見的有光誘導電子轉(zhuǎn)移、電荷轉(zhuǎn)移激發(fā)態(tài)、單體一激基締合、熒光共振能量轉(zhuǎn)移、電子能量轉(zhuǎn)移。為了實現(xiàn)高選擇性、高靈敏度快速識別和檢測生物體內(nèi)的礦、C1’和FE2，并使之達到可視化的目的，本論文開展了以下兩方面的工作一設(shè)計合成了一種近紅外中性PH值熒光探針。探針結(jié)構(gòu)采用“熒光團一橋體一受體’’設(shè)計模式，通過光誘導電子轉(zhuǎn)移機理來操控熒光強度的增減。在結(jié)構(gòu)設(shè)計策略基礎(chǔ)上，我們選擇了具備有高吸光系數(shù)的七甲川花菁CY染料作為熒光團，4’一芐胺基2，2’67，2_三聯(lián)吡啶TPY為質(zhì)子受體。通過PH滴定實驗，我們發(fā)現(xiàn)此探針可用于監(jiān)測生理PH值微小的波動。經(jīng)測定，探針的P‰約為710。在PH值670790范圍內(nèi)，熒光強度對H濃度變化有強的依賴性和迅速響應(yīng)靈敏性，并且在此范圍內(nèi)熒光強度和PH值之間有著良好的線性關(guān)系。此探針可以在生化體系中有效地避開生物自發(fā)熒光和生物內(nèi)源性物種的干擾。同時探針也展現(xiàn)出高靈敏性、良好的光穩(wěn)定性和優(yōu)異的胞膜穿透性等優(yōu)點。本文成功地實現(xiàn)了對HEPG2細胞和HL7702細胞內(nèi)H原位監(jiān)測成像。二設(shè)計合成了一種連有三聯(lián)毗啶基團的磺酸花菁結(jié)構(gòu)的熒光分子探針用于選擇性檢測生物體內(nèi)的FE2和C1。。探針的工作原理是基于探針金屬離子陰離子絡(luò)合配位和重原子的三重態(tài)熒光淬滅效應(yīng)。探針本身有強的熒光，在氯離子存在下與FE2絡(luò)合后，導致磺酸花菁的熒光猝滅，而且熒光強度的猝滅程度分別與FE2的濃度和CL。的濃度成一定的比例關(guān)系。探針在與FE2和CL’反應(yīng)前后的顏色由藍色變?yōu)樽仙?，實驗結(jié)果顯示探針對FE2和CL。有高度的選擇性。據(jù)此，我們分別固定了FE2和CL‘濃度，成功地實現(xiàn)了對FE2和C1。的分別檢測，探針的熒光強度變化分別與亞鐵離子和氯離子的濃度呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系。探針對介質(zhì)的酸堿度不敏感，熒光性質(zhì)穩(wěn)定。該探針成功用于血漿和血清中FE2和CL’的選擇性檢測。選擇性實驗表明該探針是檢測生物體內(nèi)FE2和CL’的理想近紅外熒光探針。關(guān)鍵詞氫離子氯離子亞鐵離子近紅外熒光探針共聚焦顯微成像比色法II

簡介：本研究成功建立了雞胚原始生殖細胞PRIMDIALGERMCELLS，PGCS的體外培養(yǎng)體系，并對其生物學特性進行鑒定。探討了雞胚PGCS減數(shù)分裂過程及精子發(fā)生相關(guān)基因表達量的變化。分離培養(yǎng)8W綿羊的羊水干細胞AMNIOTICFLUIDSTEMCELLS，AFSCS并鑒定其生物學特性，為AFSCS應(yīng)用于組織工程學及細胞移植治療提供理論依據(jù)。研究發(fā)現(xiàn)1使用在孵化箱中孵化55D的雞胚進行PGCS的分離。在體視顯微鏡下小心剝離出雞胚兩側(cè)性腺，剪碎后使用0125％胰蛋白酶002％EDTA吹打消化，然后接種在培養(yǎng)皿中使用HDMEM培養(yǎng)，并添加10％胎牛血清FETALBOVINESERUM，F(xiàn)BS，1MM丙酮酸鈉，1％GLUTAMAX，5NGMLSCF，5NGMLLIF，10NGMLBFGF，10NGMLIGF等因子促進PGCS的增殖及抑制分化。培養(yǎng)24H后，可在顯微鏡下觀察到PGCS克隆團的出現(xiàn)，此時的飼養(yǎng)層為雞胚性腺基質(zhì)細胞。48H后顯微鏡下觀察到PGCS克隆團數(shù)量增多，體積變大，呈典型的鋪路石樣。繼代培養(yǎng)時使用雞胚成纖維細胞CHICKENEMBRYOFIBROBLAST，CEF飼養(yǎng)層。無論是CEF飼養(yǎng)層還是雞胚性腺基質(zhì)細胞都能夠PGCS保持穩(wěn)定的未分化狀態(tài)。在本研究中PGCS可在體外連續(xù)培養(yǎng)2個月，經(jīng)AKP和PAS染色鑒定為陽性形態(tài)上PGCS較一般細胞大，折光性強RTPCR、免疫細胞化學鑒定IMMUNOCYTOCHEMISTRY和流式細胞分析FLOWCYTOMETRYFCM結(jié)果顯示，PGCS對生殖細胞及胚胎干細胞EMBRYONICSTEMCELL，ESCS的特異性標志物呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。2雞胚PGCS在骨形態(tài)發(fā)生蛋白BONEMPHOGEICPROTEINS，BMPS、激活素AACTIVINA和維甲酸RETINOICACID，RA的作用下可啟動減數(shù)分裂過程，進而在BOVINEPITUITARYEXTRACT，BPE、FOLLICLESTIMULATINGHMONE，F(xiàn)SH和睪酮TESTOSTERONE，T的促進下誘導生成精子。從QPCR結(jié)果可證明這些激素促進了PGCS向精子的分化。3在無菌狀態(tài)下使用注射器抽取8W綿羊胚胎羊水10ML，并以1500RPM的速度離心15MIN使細胞富集于離心管底部，最終將細胞接種至12孔板中進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基選擇DMEMF12添加10NGMLBFGF。羊水中含有多種細胞類型，不同類型的細胞形態(tài)也不盡相同。傳代時選擇長梭形細胞占多數(shù)的那一孔進行傳代操作。消化條件為025％胰蛋白酶002％EDTA于375℃培養(yǎng)箱中消化1MIN。在經(jīng)過數(shù)次傳代細胞純度較高時，對AFSCS的生物學特性進行鑒定。RTPCR及免疫細胞化學檢測結(jié)果顯示AFSCS既表達間充質(zhì)干細胞表面標記物又表達胚胎干細胞特異性標志物。生長曲線實驗結(jié)果顯示AFSCS的增長呈現(xiàn)典型的S型。核型分析結(jié)果顯示綿羊AFSCS染色體數(shù)目為2N54，形態(tài)正常未發(fā)生變異。將AFSCS向成脂、成骨、成軟骨三個方向進行誘導，特異性染色結(jié)果及RTPCR檢測都說明成功誘導生成了脂肪細胞、成骨細胞和成軟骨細胞。表明AFSCS擁有向三個胚層分化的潛能。

簡介：分類號分類號R78密級密級公開公開研究生學位論文論文題目（中文）論文題目（中文）模擬微重力效應(yīng)與XRAY輻射對人MEC1細胞生物學的影響論文題目（外文）論文題目（外文）THEBIOLOGICALEFFECTSOFHUMANMEC1CELLSSIMULATEDBYMICROGRAVITYXRAYRADIATION研究生姓名研究生姓名王衛(wèi)平學科、專業(yè)學科、專業(yè)口腔醫(yī)學口腔修復學研究方向研究方向口腔修復學學位級別學位級別碩士校內(nèi)校內(nèi)導師姓名導師姓名、職稱職稱何祥一教授校外導師姓名校外導師姓名、職稱職稱黨秉榮副研究員論文工作論文工作起止年月起止年月2015年10月至2016年12月論文提交日期論文提交日期2017年4月論文答辯日期論文答辯日期2017年5月學位授予日期學位授予日期2017年6月校址甘肅省蘭州市校址甘肅省蘭州市I模擬微重力效應(yīng)與XRAY輻射對人MEC1細胞生物學的影響中文摘要中文摘要目的目的通過研究模擬微重力效應(yīng)與XRAY輻射后黏液表皮樣癌MUCOEPIDERMOIDCARCINOMA，MEC細胞生物學的影響，探討模擬微重力效應(yīng)應(yīng)用于在臨床的可行性。方法方法按設(shè)定條件的不同進行分組，即空白對照組（C），XRAY輻射組（X），模擬微重力組（M），模擬微重力XRAY輻射組（XM）。輻照劑量為0，05，1，2，4GY。根據(jù)CCK8法來觀察XM組與X組中MEC1細胞相關(guān)檢測指標的差異來分析其增殖能力的變化；通過平板細胞克隆形成實驗計算XM組與X組細胞形成的克隆數(shù)，并統(tǒng)計出各自的克隆形成率以此反映MEC1細胞的生長活力的差異；利用TRANSWELL細胞侵襲實驗根據(jù)MEC1細胞數(shù)量的變化分析模擬微重力效應(yīng)對其侵襲力的影響；采用流式細胞儀檢測并計算XM組與X組MEC1細胞各分期占整個細胞周期的比例并以此來探討其意義。結(jié)果結(jié)果1）XM組MEC1細胞在24H時平均OD值分別為0559，0489，0474，0357，0321均小于X組（P005）。2）XM組MEC1細胞的克隆形成率平均為383，30233，16667，8533，4134均小于X組（P005）。3）XM組MEC1細胞在24H時侵襲細胞數(shù)平均為10267，90，72，55，3933均少于X組（P005）。4）XM組MEC1細胞在24H時，G2M期所占的比例分別為258，3003，348，5096，5957與X組相比有明顯阻滯（P005）。結(jié)論結(jié)論模擬微重力效應(yīng)與XRAY輻射對人MEC1細胞的增殖及侵襲能力均起到了抑制作用并可增強其放射敏感性，這為研究模擬微重力效應(yīng)應(yīng)用于臨床提供了一定的實驗依據(jù)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞模擬微重力效應(yīng)，XRAY射線，人MEC1細胞

簡介：EFFECTSOFESTROGEN，ANDROGENONTHEBIOLOGICALFUNCTIONOFCHICKENOSTEOCLASTBYZHUJIESUPERVISORPROHOUJIAFAATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSF0RTHEMASTERDEGREEOFTHEAGRONOMYCOMPLETEDINMAY，2009COMMENCENMENTINJUN，2009原創(chuàng)性聲明LLLLLILL／LL／／L／／LLL／LLLIILIIILL／LLIIILIIILLRLFULY1763106本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作、所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學位論文作者需親筆簽名采斑砷年6月9日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并’向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編學位論文。保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。本學位論文屬于不保密彤請在以上方框內(nèi)打“4”學位論文作者需親筆簽名采捷導師需親筆簽，卿占月夕日緲呷年彩月哆日

簡介：分類號密級華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文豬白細胞介素一34PIL34的分子克隆、表達和生物學活性驗證MOLECULARCLONING，EXPRESSIONANDBIOACTIVITYVERIFICATIONOFPORCINEINTERLEUKIN一34PIL一34研究生胡彝指導教師陳煥春院士指導小組陳煥春院士方六榮教授肖少波副教授江云波副教授專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學研究方向動物病原分子生物學和基因工程獲得學位名稱農(nóng)學碩士獲得學位時間2010年6月華中農(nóng)業(yè)大學動物科學動物醫(yī)學院二OO年六月華中農(nóng)業(yè)大學學位論文獨創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書學能論文否如需保密，解密時間年月日是否保密獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，指導教師對此進行了審定與我一同工作的同態(tài)對本研究所做的任何貢獻均已在論文中做了明確的說明，并表示了謝意。研究生簽名塌斯時間。。，D年占月，7日學位論文使用授權(quán)書本人完全了解“華中農(nóng)業(yè)大學關(guān)于保存。使用學位論文的規(guī)定”，印學生必須按照學校要求提交學位論文的印刷本和電予版本；學校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版，并提供目錄檢索和閱覽服務(wù)，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文本人同意華中農(nóng)業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表傳播學位論文的全部或部分內(nèi)容J‰。注保密學位論文在解密后適用于本授權(quán)書學夠謄名塌畸導師麟膳蝣。簽名日期■DLO年‘月I，日簽名日期≯矽年多月，，日

簡介：CLONING，EXPRESSION●ANDBIOACTIVITYANALYSISOFGOATINTERLEUKIN一1PANDINTERLEUKIN一6BYLIXUEZHAOSUPERVISEDBYPROFLIXIANGRUIATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEMASTERDEGREEOFAGRONOMYINVETERINARYMEDICINECOMPLETEDINMAY2010COMMENCEMENTINJUNE2010原創(chuàng)性聲明LIIIIIIIIIIIIIIIIIIIILY1764649本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文巾已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含F(xiàn)T何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學位論文作者需親筆簽名孿曾移‘紗T年6月F口學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編學位論文。』甲L款UNLL，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學位論文屬于不保密函。請在以上方框內(nèi)打“4”學位論文作者需親筆簽名孿寫2否矽年占月T1日導師需親筆簽名沙、暉B月T舊

簡介：STUDYONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFBOVINEMSCSANDDIFFERENTIATINGINTOCADIOCYTE／NVITROTHESISSUBMITTEDTOQINGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRONOMYAUTHORGONGYICHAOCOLLEGEOFANIMALSCIENCEANDVERTERINARYMEDICINESUPERVISORPROFDONGYAJUANPROFBAIXUEJINQINGDAOCHINAJUNE，200933牛MSCS的生物特性檢測174討論21試驗二5AZA誘導MSCS分化為心肌細胞的分子生物學檢測241材料和方法2411主要試劑及溶液的配制和染色方法2412試驗儀器242試驗方法2421牛骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞誘導分化2522逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RTPCR鑒定253結(jié)果一2831誘導后形態(tài)學變化2832心肌細胞轉(zhuǎn)化率2833RTPCR反應(yīng)，294討論J32結(jié)論34參考文獻35附錄41附錄A主要試劑一41附錄B試驗儀器42附錄C主要溶液配制方法43附錄D細胞染色液的配制及染色方法JJ44附錄E細胞冷凍和復蘇方法46

簡介：浙江師范大學碩士學位論文假高粱（SORGHUMHALEPENSE）及其3個近緣種細胞學和種子生物學比較姓名李娜申請學位級別碩士專業(yè)植物學指導教師郭水良印麗萍20090601及其近緣種的鑒別。綜上所述，基于種子生物學、細胞學及紫外光譜指標，可以提高對假高粱及其近緣種鑒別的正確率。關(guān)鍵詞假高粱；黑高粱；高粱；蘇丹草；形態(tài)學；萌發(fā)；核型分析；細胞學指標；光譜；鑒定

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文雪松性別決定的細胞學機理及花粉生物學特性研究姓名尹海燕申請學位級別碩士專業(yè)園林植物與觀賞園藝指導教師豐震趙蘭勇20090601雪松性別決定的細胞學機理及花粉生物學特性研究染色體中僅有一條染色體具有隨體。研究顯示第9對染色體可能與性別分化有關(guān)。⑥雪松不同性別株的平均臂比，染色體長度比相差不大，但也有區(qū)別。雪松雄株的平均臂比大于雌株，雌株大于雌雄同株。而染色體長度比，雄株大于雌株，雌株大于雌雄同株。根據(jù)平均臂比反應(yīng)其原始性，染色體長度比反應(yīng)其核型的對稱性，得出雪松不同性別株之間的進化性從原始到進化雌雄同株一雌株一雄株。2對雪松雄株、雌雄同株的花粉進行生活力及儲藏條件研究。①從花粉生活力上不能看出性別差異，即花粉研究不能解決雪松的性別決定機理。②在撒粉盛期采集的花粉萌發(fā)率要高于未開放、剛剛開放、及撒粉末期?；ǚ鄣牟杉瘯r間集中在上午9001400，下午采集也可以。采集是選用密封較好的紙袋。③花粉萌發(fā)的最佳溫度為20℃；最適宜的培養(yǎng)基為培養(yǎng)基II10％蔗糖2％瓊脂O01％硼酸。④雪松花粉的最佳貯藏條件為冷藏、干燥。不同的貯藏條件及貯藏期與花粉生活力有明顯的關(guān)系。隨著貯藏期的延長生活力主要呈下降趨勢。在不同的貯藏條件及貯藏期，生活力變化情況不盡相同，以4℃冷藏花粉生活力的下降速度最慢，室內(nèi)黑暗條件下貯藏，花粉生活力下降最快，一個月左右?guī)缀鯙榱?，室溫自然條件保存的花粉生活力下降次之。冷藏條件下貯藏，3個月后仍保持較高萌發(fā)率，一年后仍有一定的生活力。綜合花粉生活力研究，影響花粉萌發(fā)率的重要因子為培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基類型以及花粉的貯藏條件和貯藏時期。3雪松球花在樹體上的分布規(guī)律。研究表明，雪松雄球花在樹冠不同方向的水平分布上存在差異，南部樹冠球花分布最多。在垂直分布上也存在差異，主要分布在樹冠中下部，其中中部分布量最大。雌球花主要分布在樹冠的中上部。雪松的傳粉機制主要以風作為媒介。4通過對泰城成齡雪松進行性別比例調(diào)查發(fā)現(xiàn)①泰城成齡雪松多數(shù)分布在校園老校區(qū)、醫(yī)院、政府大院、修筑較早的街道。②泰城雪松雌株2

簡介：REGULARIONOFDHEAONHEPATICLIPIDMETABOLISMINBROILCHICKENSANDITSCELLULARMOLECULARMECHANISMSINVOLVEDBYXUETANGSUPERVISORPROFZOUSIXIANGADISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORDOCTORDEGREEOFBASICVETERINARYMEDICINECOMPLETEDINMARCH2009COMMENCEMENTINJUNE2009原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。淞姍C一攀聲毒。凈∑只蝴學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編學位論文。保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。本學位論文屬于不保密Z請在以上方框內(nèi)打“寸，山沁肛眥，L1LJ年年伊伊、承刁＼∥孫陟簽可筆親名需簽／，者筆作親文需淪0位師學導

簡介：農(nóng)學碩士學位論文黃瓜花粉發(fā)育及細胞生物學特性研究STUDIEDONTHEPOLLENDEVELOPMENTCYTOBIOLOGICALACTERISTICSOFCUCUMBERCUCUMISSATIVUSL陳芬芬作物延邊大學學校代碼10184分類號分類號密級UDC學號2014050276延邊大學碩士學位論文黃瓜花粉發(fā)育及細胞生物學特性研究STUDIEDONTHEPOLLENDEVELOPMENTCYTOBIOLOGICALACTERISTICSOFCUCUMBERCUCUMISSATIVUSL研究生姓名陳芬芬培養(yǎng)單位延邊大學農(nóng)學院指導教師姓名、職稱金東淳副教授學科專業(yè)作物研究方向植物生殖生物學論文提交日期2016年5月24日