家蠶、野蠶染色體結(jié)構(gòu)變異的細胞生物學研究.pdf

1、浙江大學博士學位論文家蠶、野蠶染色體結(jié)構(gòu)變異的細胞生物學研究姓名：孟智啟申請學位級別：博士專業(yè)：特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)指導教師：徐俊良2000.5.1約為總?cè)旧wi ／8 長度的一段區(qū)域，L a n k y 缺失為中間缺失。4 ．采用G i e m s a 法研究了野蠶染色體的核型。野蠶染色體長度( 偶線期在卜3 1 ．t m 之間) ，變異范圍小，在生物界屬予小染色體類。5 ．在2 5 0 G y ( 劑量率1 ．1 G y ／m i n

2、) ”C o Y 射線輻照下，輻照當代仍能正常生長、交尾、產(chǎn)卵，但輻照后的雌或雄與正常的雄或雌雜交產(chǎn)生的后代均表現(xiàn)為不育，經(jīng)對輻照當代的生殖細胞染色體進行顯微觀察，發(fā)現(xiàn)了缺失、易位、倒位等染色體異常結(jié)構(gòu)，據(jù)此判明染色體結(jié)構(gòu)畸變是造成后代不育的主要原因。6 ．對于Y 射線輻照后的野蠶生殖細胞染色體顯微觀察發(fā)現(xiàn)了染色體斷裂一重接易位的細胞學證據(jù)。根據(jù)這一細胞學證據(jù)，關(guān)于野蠶染色體數(shù)地域差異的成因推論認為：古野蠶染色體數(shù)n = 2 8 ，在棲

3、息進化過程中，日本等地的野蠶因某種環(huán)境條件刺激，其中一條染色體發(fā)生斷裂，大的斷裂片段易位到非同源染色體后融合形成一條大染色體，小的片段在遺傳傳遞過程中丟失，致使染色體數(shù)n = 2 7 ，其后在進化演變過程中，該種群穩(wěn)定遺傳不斷擴大延續(xù)至今，形成了中國和日本二個地域野蠶亞種群。7 ．應(yīng)用R A P D 法對帶有性連鎖平衡致死基因l 。、l 。的雌蠶進行了P C R 擴增。結(jié)果發(fā)現(xiàn)引物B 1 _ O ( S ’C T G C T G C _

4、 K B A C 3 ’) P C R 擴增條帶在W “z l “”和W “z + 眥之間呈現(xiàn)多態(tài)性，即在w “1 z 1 1 + 。和W + n z + l ?有一個約9 0 0 b p 的共同擴增片段Z w a l ，但在W Ⅲz + ”。上分別有一個6 5 0 b p ( Z w a 3 ) 和8 0 0 b p ( z w a 2 ) 左右的特異片段，在w “1 z “m 上分別有一個5 1 0 b p ( Z w a l l

5、) 和4 5 0 b p ( Z w a l 2 ) 左右的特異片段。這四個片段可作為性連鎖平衡致死基因l ，和l ：的特有標記。8 ．將上述四個特異性片段亞克隆，測序后通過互聯(lián)網(wǎng)向D D B J ( D N A D a t aB a s e o f J a p a n ) 同源性檢索表明，Z w a l l 片段與家蠶的黃嘌呤脫氫酶基因的5 ’側(cè)翼區(qū)域有9 0 ％的同源性，初步斷定Z w a l l 是一個與喋啶類化合物代謝有關(guān)的基因