TNFR-1在小鼠毛囊周期中的表達(dá)及其作用初步探討.pdf

1、毛囊是表皮重要的附屬器官，它控制著毛發(fā)的生長，對動物的生存有重要的作用。在動物的一生中毛囊都會經(jīng)歷生長期、退化期和靜止期的周期性的循環(huán)變化來實(shí)現(xiàn)毛發(fā)生長和更新。在生長期，毛母質(zhì)細(xì)胞會迅速增殖分化形成內(nèi)根鞘和毛干，毛囊得以向下生長，與此同時(shí)，部分毛囊細(xì)胞也發(fā)生一定程度的細(xì)胞凋亡，以此避免細(xì)胞的過度增殖；退化期，毛囊因其下段細(xì)胞發(fā)生大量凋亡而變短且毛乳頭逐漸上移；在毛乳頭上移至毛囊隆突區(qū)bulge下方時(shí)毛囊即進(jìn)入靜止期。在與毛囊周期性循環(huán)的

2、維持相關(guān)的各種信號通路中，TNF-α信號通路起著重要作用。TNF-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)可引起許多細(xì)胞內(nèi)的反應(yīng)來促進(jìn)細(xì)胞增殖，分化，調(diào)亡和誘發(fā)炎癥。TNFR-1作為 TNF-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要的也是起最主要作用的膜受體，其在出生后的小鼠毛囊周期中的表達(dá)部位及在小鼠毛囊周期中的表達(dá)規(guī)律尚沒有系統(tǒng)的研究。
　　目的：研究腫瘤壞死因子受體1（TNFR-1）在毛囊周期中表達(dá)的規(guī)律及初步作用?？梢詾榻沂酒湓诿l(fā)周期中及周期的各階段轉(zhuǎn)換中所起的作用奠定一

3、定基礎(chǔ)，也可以為研究胞外信號通路在毛囊中的作用機(jī)制帶來啟發(fā)，特別是為進(jìn)一步研究TNF-α信號通路對毛囊周期的調(diào)控提供了基礎(chǔ)依據(jù)。
　　方法：采用石蠟切片免疫熒光、Western blot、RT-PCR等方法檢測小鼠毛囊生長期、退化期和靜止期各時(shí)期TNFR-1的表達(dá)情況（取出生后P8d、P15d、P18d、P24d4個(gè)時(shí)相點(diǎn)）；免疫熒光檢測毛囊細(xì)胞分化標(biāo)記物AE13和AE15的周期性表達(dá)；TUNEL檢測毛囊周期中的細(xì)胞凋亡情況。

4、r>　　結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在所有4個(gè)時(shí)相點(diǎn)的皮膚中TNFR-1都存在不同強(qiáng)度的表達(dá)，TNFR-1 mRNA從生長期中期(P8d)到生長期末期(P15d)表達(dá)量升高到較高水平，退化期(P18d)和靜止期(P24d)表達(dá)維持在較低水平；TNFR-1蛋白在生長期中期(P8d)和生長期末期(P15d)表達(dá)最強(qiáng)，而退化期(P18d)到靜止期(P24d)表達(dá)減弱并維持較弱的表達(dá)。免疫熒光的結(jié)果顯示:TNFR-1在生長期主要表達(dá)于表皮層，毛囊的毛干和

5、內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì)，生長末期在外根鞘還出現(xiàn)明顯表達(dá)；退化期在外根鞘、毛干及表皮層有表達(dá)，在次級毛芽出現(xiàn)很強(qiáng)的特異性表達(dá)；在靜止期表皮層及杵狀毛中呈現(xiàn)弱表達(dá)。AE13在生長期主要表達(dá)于表皮層以及毛干的皮質(zhì)和毛小皮；退化期P18d在毛干尤其是毛干基部端（即角質(zhì)化區(qū)域和杵狀毛形成區(qū)）強(qiáng)表達(dá)；在靜止期P24d弱表達(dá)于表皮層及杵狀毛中。AE15在生長中期P8d主要表達(dá)于毛囊內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì)，從熒光亮度來看表達(dá)最強(qiáng)；生長末期P15d在內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì)

6、也有表達(dá)，但是表達(dá)強(qiáng)度明顯變?nèi)酰煌嘶赑18d僅在毛囊殘余內(nèi)根鞘有少許表達(dá)；在靜止期P24d毛囊中無明顯AE15表達(dá)。TUNEL檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示：在生長期TUNEL陽性染色主要出現(xiàn)在表皮層，毛囊的毛干、內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì)，生長末期還出現(xiàn)在外根鞘；在退化期P18d出現(xiàn)在外根鞘、表皮層以及毛干基部端；在靜止期P24d出現(xiàn)在表皮層、杵狀毛、bulge區(qū)和皮脂腺。
　　結(jié)論：在毛囊周期中，TNFR-1的表達(dá)具有高度的時(shí)空特異性，其表達(dá)與