TGF-β及其受體在激光脫毛后毛囊生長周期中的表達變化研究.pdf

1、多毛在激光整形科較為常見，常給患者帶來嚴重的精神負擔和心理壓力，臨床目前較為有效和常用的治療方法為激光脫毛，激光整形科和皮膚科學者雖已對激光脫毛作了大量研究，但一般都停留在臨床研究上，有關激光脫毛后組織學變化及分子機制的研究較少。 為了尋找一種最適合的激光脫毛動物模型，科研工作者們已經(jīng)研究了許多動物的皮膚結構，包括豚鼠、犬、豬等，在所有研究過的物種中，豬的皮膚結構是和人類最為相似的。西藏小型香豬作為中國獨特的實驗用小型豬種，具有

2、體型小，遺傳穩(wěn)定，個體差異小等商品豬所不能比擬的優(yōu)點，黑毛白皮的特征尤其適合作為激光脫毛動物模型。 近年來毛囊生物學及毛發(fā)疾病的病理生理學正成為國內外生物學界、皮膚科領域、美容學科的研究熱點。有關毛發(fā)的基礎研究已取得了很大的進展，隨著研究的深入，關于毛囊誘導和早期形態(tài)發(fā)生的分子機制逐漸明了，但對于毛囊生長周期精確的調控機制尚不清楚。其可能機制還涉及生長因子的調控。已證實有四大類調節(jié)因子對毛囊有直接作用，其中，TGF-β是目前研究

3、較多且對毛囊發(fā)育比較重要的因子之一，對調控毛囊的形態(tài)學發(fā)生和周期性循環(huán)起著非常重要的作用，但迄今為止，TGF-β及其受體在激光脫毛這一特殊過程中的變化規(guī)律和作用機制國內外尚未見相關報道。 我們提出假設：激光可使毛囊休止期延長、毛囊小型化或毛囊永久性破壞的原因：激光的光熱作用、光機械、光壓強等可能作為激動因素引起局部的炎癥反應→分泌炎性因子作用于炎性細胞、成纖維細胞、角質形成細胞或黑色素細胞等→分泌TGFβ→抑制毛囊細胞增殖，促進

4、毛囊角質形成細胞凋亡→達到脫毛作用。 如果假設成立，促進毛發(fā)由休止期向生長期轉變或延長毛發(fā)生長期從而延長生長周期均可延長毛發(fā)生長，反之則可治療多毛。局部應用TGF-β拮抗劑有望治療雄激素性脫發(fā)及其它脫發(fā)的治療，應用其激動劑則可以治療多毛癥等生長期延長的毛發(fā)疾病。為開發(fā)治療毛發(fā)疾病相關新藥的研發(fā)提供參考。 目的: 一、建立激光脫毛動物模型，研究激光脫毛后毛發(fā)數(shù)量的變化、毛囊及皮膚組織學改變和超微結構的改變及毛囊周期

5、生物學變化。 二、研究TGF-β及其受體在激光脫毛過程中的變化規(guī)律，探討其在激光脫毛中的作用。 第一部分建立激光脫毛動物模型并進行組織學研究方法: 動物實驗選用4-6月齡黑毛白皮西藏小型香豬12只，按臨床方法激光脫毛，肉眼觀察治療區(qū)術前、術后毛發(fā)的變化；在術前、術后即刻、1h及1、3、5、10、15、30、60天分別取材，常規(guī)HE染色，光鏡觀察毛囊及皮膚組織學改變及電鏡觀察超微結構的改變； RdUTP缺口末端標記

6、法（Tunel法）檢測毛囊細胞的凋亡情況；銀染光鏡觀察和透射電鏡觀察激光脫毛前后毛囊黑色素含量的變化。 結論: 黑毛白皮西藏小型香豬可作為臨床激光脫毛的良好的動物模型。激光照射后通過破壞毛囊和誘導毛囊直接由生長期直接進入退行期或靜止期，達到脫毛的目的，與臨床中激光脫毛治療相符。 本研究初步揭示了激光照射后毛囊組織的病理變化過程。認為激光不僅通過直接熱凝固導致細胞壞死和誘導細胞凋亡兩方面的作用造成毛囊的不可逆損傷，

7、達到永久性脫毛的目的；而且激光脫毛后誘導毛囊由生長期直接進入退行期或靜止期，毛發(fā)暫時停止生長，從而達到非永久性脫毛的目的。激光脫毛后毛囊組織中的黑色素含量進一步減少甚至消失，原因可能是激光照射后部分黑素細胞壞死和凋亡而殘余的部分黑素細胞不再生成黑色素顆粒。 第二部分激光脫毛前后TGF-β異構體及其受體在激光脫毛后的表達研究方法: 將激光脫毛術前、術后即刻、1h及1、3、5、10、15、30、60天標本采用免疫組織化學方法

8、檢測TGF-β1、TGF-βR1、TGF-βR2蛋白表達情況，采用RT-PCR的方法檢測4 TGF-β1mRNA、 TGF-βR1 mRNA、TGF-β2 mRNA、TGF-βR2mRNA、TGF-β3 mRNA及TGF-βR3 mRNA表達情況結論: 激光脫毛前TGF-β1表達較弱，且主要分布于毛囊以外的角質形成細胞，激光脫毛后TGF-β1表達逐漸增強后再減弱，且主要分布于毛囊中，和毛囊細胞凋亡的步調相一致，因此我們認為激光脫

9、毛后TGF-β1表達增強，促使殘余毛發(fā)從生長后期向退行期轉換，可能是通過抑制角質細胞增殖和誘導凋亡實現(xiàn)的；抑制毛囊細胞增殖，促進毛囊角質形成細胞凋亡，達到脫毛的目的。 TGF-βR1主要分布于毛囊外根鞘，激光脫毛術前TGF-βR1表達較弱，激光脫毛后TGF-βR1表達逐漸增強后再減弱，和TGF-β1的表達相同，因此我們認為激光脫毛后TGF-βR1表達增強，促使殘余毛發(fā)從生長后期向退行期轉換，達到脫毛的目的。 激光脫毛術前

10、TGF-β2表達較弱，激光脫毛后TGF-β2表達逐漸增強后再減弱，和毛囊細胞凋亡的步調相一致，因此我們認為激光脫毛后TGF-β2表達增強，可能是通過誘導毛囊上皮細胞凋亡和內源性的細胞凋亡途徑促進毛囊角質形成細胞凋亡從而促使殘余毛發(fā)從生長期向退行期轉換，達到脫毛的目的。 激光脫毛后TGF-βR2在毛囊外根鞘細胞中表達逐漸增強后再減退，但略滯后于TGF-βR1，促使毛囊進入退行期，達到脫毛的目的。 激光脫毛術前、術后即刻、1