Radixin表達(dá)下調(diào)對(duì)SGc-7901細(xì)胞中MRP2表達(dá)及外排功能的影響.pdf

1、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體，作為一種特殊的膜蛋白家族，在藥物的吸收，分布與清除中發(fā)揮了重要的作用，藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體在腫瘤細(xì)胞中的過(guò)量表達(dá)所引起的多藥耐藥更是腫瘤治療失敗的主要原因。因此，了解藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)功能的分子調(diào)控機(jī)制對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)研究及腫瘤臨床治療具有積極作用。MRP蛋白家族是藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體家族的亞家族。MRP2是MRP蛋白家族的第二個(gè)成員，主要介導(dǎo)有機(jī)陰離子的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。有報(bào)道已證實(shí)ERM(ezrin/radixin/moesin)蛋白家族中的radix

2、in參與了MRP2在肝細(xì)胞微管膜上定位的調(diào)控。然而有關(guān)兩者關(guān)系的報(bào)道主要集中在radixin對(duì)MRP2定位的調(diào)控上，鮮有關(guān)注到radixin對(duì)MRP2表達(dá)及功能的影響;并且大部分的研究都是在以肝細(xì)胞為代表的僅有radixin單獨(dú)表達(dá)的體系中進(jìn)行，甚少在ERM三個(gè)蛋白都存在的體系中。
　　為了檢驗(yàn)radixin在MRP2及MRP家族其他成員的表達(dá)及功能上的作用，ERM三個(gè)蛋白均表達(dá)的人胃癌SGC-7901細(xì)胞被選擇作為模型。本研究通

3、過(guò)RNAi方法構(gòu)建radixin表達(dá)下調(diào)的穩(wěn)定細(xì)胞株，運(yùn)用RT-PCR方法檢測(cè)了MRP1-6成員mRNA表達(dá)水平;實(shí)時(shí)熒光PCR和western結(jié)果表明radixin的表達(dá)下調(diào)使MRP2在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)都下調(diào)了大約50％，并由此影響了SGC-7901中calcein的外排;MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明radixin表達(dá)下調(diào)穩(wěn)定細(xì)胞克隆中calcein外排效率的降低并非由各細(xì)胞株活力的差異所導(dǎo)致。綜上，在ERM三個(gè)蛋白共表達(dá)的體系中，r