姜黃素誘導(dǎo)胃癌細胞SGC-7901中PPAR-γ的表達及相關(guān)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察不同濃度的姜黃素對胃癌細胞 SGC-7901增殖的影響以及對PPAR-γ及TGF-β1表達的影響。初步探討姜黃素誘導(dǎo)胃癌細胞SGC-7901中PPAR-γ表達的可能機制。
  方法:通過常規(guī)體外培養(yǎng)胃癌細胞 SGC-7901,取對數(shù)生長期細胞進行實驗。分別加入0μmol/L,5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,80μmol/L的姜黃素作用于胃癌細胞SGC-790124h、48h、72h及

2、濃度分別為5ng/mL,10ng/mL,15ng/mL的外源性TGF-β1與40μmol/L(約為IC50)的姜黃素共同作用于胃癌細胞SGC-790148h,其中0μmol/L的姜黃素濃度組為空白對照組。四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定姜黃素對胃癌細胞 SGC-7901增殖的影響。使用 RT-PCR法及免疫細胞化學(xué)法測定胃癌細胞 SGC-7901中的PPAR-γ及 TGF-β1的mRNA及蛋白的表達以及40μmol/L的姜黃素與不同濃度的

3、外源性TGF-β1共同孵育下對PPAR-γ mRNA及蛋白的表達變化。
  結(jié)果:
  1.MTT結(jié)果顯示了胃癌細胞SGC-7901在不同濃度(0,5,10,20,40,80μmol/L)的姜黃素處理24h、48h、72h后,隨著濃度及作用時間的增加,對胃癌細胞SGC-7901增殖的抑制率逐漸增加,在80μmol/L的姜黃素作用72h后,其對胃癌細胞SGC-7901增殖的抑制率達到最高值,不同濃度組之間及不同時間組之間的抑制

4、率對比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。由此表明姜黃素能抑制胃癌細胞的增殖,且存在濃度及時間依賴性。
  2.RT-PCR法及免疫細胞化學(xué)法檢測得到姜黃素誘導(dǎo)胃癌細胞 SGC-7901中PPAR-γ的mRNA及蛋白表達隨著姜黃素的濃度增加呈遞增趨勢,而 TGF-β1的mRNA及蛋白表達呈遞減趨勢。40μmol/L的姜黃素作用48h后的PPAR-γ及TGF-β1的mRNA分別為:0.45±0.012,0.69±0.013,則蛋白

5、分別為:0.168±0.003,0.064±0.007, 與空白對照組對比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。表明在胃癌細胞 SGC-7901中,隨著姜黃素濃度的遞增,PPAR-γ呈現(xiàn)高表達,而TGF-β1呈現(xiàn)低表達,且二者的表達呈負相關(guān)性。
  3.使用不同濃度(5、10、15ng/mL)的外源性TGF-β1和40μmol/L的姜黃素共同作用于胃癌細胞SGC-7901后,RT-PCR及免疫細胞化學(xué)法分別檢測PPAR-γ

6、的mRNA及蛋白表達,結(jié)果顯示隨著外源性TGF-β1的濃度增加PPAR-γ的mRNA及蛋白表達均呈下降趨勢,各濃度組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而各組分別與空白對照組及40μmol/L的姜黃素組對比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1.姜黃素可以抑制胃癌細胞SGC-7901的增殖,存在時間及濃度依賴性。
  2.隨著姜黃素的濃度的增加,胃癌細胞SGC-7901中PPAR-γ的表達增加,而

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