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文檔簡介
1、目的:
觀察重組人促紅細胞生成素(recombinant human erythrop oietion,rhEPO)對支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型肺組織中jak2,stat5兩個因子表達的影響,旨在探討rh EPO對BPD模型肺組織的保護機制可能與活化jak2/stat5通路信號相關。
方法:
于孕囊內(nèi)注射脂多糖(lipopolysaccharide,
2、LPS)構造宮內(nèi)感染環(huán)境,并將新生幼鼠生后置于60%高氧等兩個可控因素制備BP D模型。在SD大鼠孕第15天分別將LPS和NS(生理鹽水)注入孕囊內(nèi),從NS注入組所產(chǎn)的新生幼鼠中隨機抽取18只做為空氣對照組(A組),從LPS注入組所娩出24 h內(nèi)的新生幼鼠隨機選取36只,并分為2組,每組18只:LPS+高氧組(B組)、rhEPO組(C組);A組則將新生幼鼠置于自然空氣下,B組及C組生后第1天置于氧濃度為60%的高氧環(huán)境中,其中C組則從高
3、氧處理第1天起,予皮下注射rhEPO(1400 IU/kg)。在rhEPO干預前,從LPS及正常孕鼠組所生產(chǎn)的新生幼鼠中隨機抽取6只麻醉后,取肺組織HE染色,觀察肺組織的病理變化;并于第1、7、14天末從各組隨機抽取6只麻醉后,將其斷頭放血處死,于氣管插管維持肺充氣狀態(tài)下迅速取下肺組織,予液氮速凍后存放于-80℃冰箱備用;之后采用RT-PCR及Wester n blot法檢測經(jīng)rhEPO干預BPD模型的新生幼鼠肺組織中jak2,st a
4、t5蛋白以及mRNA的表達水平。
結(jié)果:
?。?)與A組相比,B組新生幼鼠的肺組織可見肺毛細血管擴張、充血,肺泡間隔及肺泡腔內(nèi)可見少量炎細胞浸潤;
?。?)與A組相比,B組jak2、stat5蛋白和mR NA表達減少,C組jak2、stat5蛋白和mRNA表達增加;
?。?)實驗第1、7、14天末,各組間jak2、stat5蛋白和mRNA表達的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結(jié)論:
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