肢體反復短暫缺血預處理對高脂血癥大鼠局灶性腦缺血再灌注后IL-6、JAK2、STAT3表達的影響.pdf

1、目的：探討肢體反復短暫缺血預處理對高脂血癥大鼠局灶性腦缺血/再灌注后腦組織IL-6、JAK2、STAT3表達的影響，以及肢體反復短暫缺血預處理對腦缺血/再灌注損傷時JAK2/STAT3信號轉導通路的作用及肢體反復短暫缺血預處理可能的腦保護機制。
　　方法：高脂血癥大鼠建模:將SD大鼠100只采用隨機數值表分為2組:普通飼料喂養(yǎng)組10只，以普通飼料自由喂養(yǎng);高脂飼料喂養(yǎng)組90只，以高脂飼料自由喂養(yǎng)。模型制備時間為4周。造模完成后，禁

2、食10h，取大鼠尾尖靜脈血，所采靜脈血離心后使用全自動生化儀檢測大鼠血脂指標:總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度膽固醇(HDL-C)、低密度膽固醇(LDL-C)，對兩組大鼠間各項血脂指標進行比較。將造模成功的90只高脂血癥大鼠隨機分為3組:假手術組(30只)，腦缺血再灌注組（30只），肢體缺血預處理組（30只）。假手術組:麻醉大鼠后，分別將其右側頸總動脈、頸內動脈、頸外動脈暴露、分離，但大腦中動脈中不插入栓線，保持血流通暢，再依

3、次縫合。腦缺血再灌注模型組:根據Longa的線栓法制備大腦中動脈缺血再灌注(MCAO)模型，大鼠右側大腦中動脈于線栓阻斷2小時后行再灌注。肢體缺血預處理組:制備LIP模型后即刻進行大腦中動脈栓塞模型的制備，給予阻斷大鼠右側大腦中動脈2小時后進行再灌注。各模型組于再灌注后6h、12h、24h、48h、72h5個時間點分為5個亞組，每個亞組5只大鼠。于上述5個對應時間點，對各組大鼠行神經功能缺損評分、干濕重法測定各組大鼠腦組織含水量、HE染

4、色觀察各組大鼠腦組織病理改變、免疫組織化學方法觀察IL-6、JAK2、STAT3的動態(tài)表達。此外，各組均于再灌注24h時間點，再增加5只大鼠以TTC染色法測量腦梗死體積。
　　結果：⑴高脂飼料喂養(yǎng)組的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇明顯高于普通飼料喂養(yǎng)組(P＜0.01)。⑵在各個時間點，假手術組均未出現明顯神經功能障礙;腦缺血再灌注組和肢體缺血預處理組都出現程度不等的神經功能缺損，但肢體缺血預處理組神經功能損傷評分與相應時間

5、點腦缺血再灌注組比較，顯著高于腦缺血再灌注組(P＜0.01)。⑶TTC染色、腦梗死體積:假手術組高脂血癥大鼠的腦組織呈現均勻一致的紅色，顏色正常，形態(tài)較為規(guī)則，未觀察到腫脹與蒼白狀態(tài)，再灌后24h時未出現腦梗死病灶;而腦缺血再灌注組與肢體缺血預處理組在腦缺血再灌注24h的腦組織中可以清晰的觀察到邊界較為清晰、顏色為蒼白色、大小不等的腦組織缺血梗死病灶。在腦缺血再灌注24h時，腦缺血再灌注組大鼠腦梗死體積顯著大于假手術組(P＜0.01)，

6、肢體缺血預處理組大鼠腦梗死體積顯著低于腦缺血再灌注模型組(P＜0.01)。⑷在各個時間點，假手術組大鼠腦組織含水量無明顯增加;腦缺血再灌注組大鼠腦組織含水量顯著高于假手術組(P＜0.01);缺血預處理組大鼠腦組織含水量顯著低于腦缺血再灌注組(P＜0.05)。⑸在再灌注6h、12h、24h、48h、72h時間點，腦缺血再灌注組大鼠腦組織白介素-6陽性細胞均顯著高于假手術組;在再灌注各時間點，肢體缺血預處理組大鼠腦組織白介素-6陽性細顯著低

7、于腦缺血再灌注組(P＜0.01)。⑹在再灌注6h、12h、24h、48h、72h時間點，假手術組未見JAK2、STAT3免疫陽性細胞的表達;腦缺血再灌注組大鼠腦組織JAK2、STAT3免疫陽性細胞均顯著高于假手術組(P＜0.01);在再灌注各時間點，肢體缺血預處理組大鼠腦組織JAK2、STAT3免疫陽性細胞顯著低于腦缺血再灌注組(P＜0.01)。
　　結論：①高脂血癥大鼠發(fā)生局灶性腦組織缺血再灌注損傷后會導致神經功能缺損、腦組織含