EPOR和STAT5在乳腺癌細胞中的表達及rhuEPO對乳腺細胞增殖作用研究.pdf

1、目的:紅細胞生成素(EPO)是促進紅細胞生成的糖蛋白激素，可作用于未成熟紅系細胞表面的紅細胞生成素受體促進細胞生存、增殖和分化。：EPO和EPOR也表達于在多種非造血組織和細胞中如中樞神經(jīng)系統(tǒng)，內(nèi)皮細胞以及實體腫瘤等。信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)是EPO/EPOR信號傳導中起關鍵作用的一種蛋白質(zhì)，參與細胞的增殖、分化以及調(diào)節(jié)細胞的轉(zhuǎn)化。在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮一定的作用。EPOR和STAT5之間的否存在相關性，臨床上對乳腺

2、癌和其他癌癥患者使用重組人紅細胞生成素(rhuEPO)治療時，其表達的EPOR就可能會通過誘導細胞增殖和血管生成促進腫瘤生長，使得對癌癥患者使用重組人紅細胞生成素安全性提出質(zhì)疑。本研究探討了EPOR和其信號傳導通路蛋白STAT5在乳腺癌細胞和組織中的表達及臨床意義，分析了rhuEPO是否對乳腺癌細胞MCF-7增殖反應和對惡性腫瘤預后的影響。 方法 1、采用RT-PCR分析人乳腺癌細胞MCF-7和MDA-MB-231中EP

3、OR、STAT5A、STAT5B mRNA的表達情況。 2、選取河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院外科2005年12月～2006年4月確診的原發(fā)性乳腺癌而未做放化療患者的癌組織標50例(均經(jīng)針吸術前細胞學或病理證實)，其中病理組織學分級Ⅰ級16例，Ⅱ級17例，Ⅲ級17例。以10例正常乳腺組織或良性乳腺組織標本作為對照?；颊呔鶠榕?，年齡30～50歲，中位年齡43歲。所有病理切片均由兩位高年資病理醫(yī)師診斷復核。采用免疫組織化學S-P(鏈霉素抗

4、生物素蛋白．過氧化物酶連結(jié))法分析乳腺癌組織和正常乳腺組織中EPOR、STAT5蛋白的表達情況，分析其表達強度同組織學分級之間的關系，以及EPOR和STAT5蛋白之間的相關性。 3、采用MTT法檢測經(jīng)rhuEPO處理的人乳腺癌細胞株MCF-7細胞生長增殖反應和細胞凋亡水平變化。 4、采用流式細胞技術檢測經(jīng)rhuEPO處理的人乳腺癌細胞株MCF-7的細胞周期變化，以及EPO/EPOR信號傳導通路中STAT5、BCL-2

5、、BCL-XL蛋白表達的差異。 5、實驗數(shù)據(jù)采用SPSS11.5軟件進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果 1、EPOR、STAq、5A和STAT5B mRNA均表達于MCF-7和MDA-MB-231細胞中。但是MCF-7和MDA-MB-231細胞株之間三種基因表達無差異。 2、EPOR在正常乳腺細胞呈陰性或弱陽性表達，無強陽性表達。EPOR在組織學分級為、Ⅱ、Ⅲ級的陽性表達率分別為56.3％、76.5％、94.1％，E

6、POR和乳腺癌組織學分級正相關(P=0.004)。STAAT5在正常乳腺細胞呈陰性著色，無強陽性表達。STAT5在組織學分級為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級的陽性表達率分別為68.8％、76.5％、88.2％，STAT5和乳腺癌組織學分級正相關(P=0.03)。乳腺癌組織中EPOR和STAT5蛋白表達相關(X<'2>值=5.227，P=0.022)。 3、經(jīng)rhuEPO處理后，MCF-7細胞凋亡水平無明顯變化(P>0.05)。 4、經(jīng)

7、rhuEPO處理后，MCF-7細胞周期沒有明顯差異(P>0.05)。對EPO/EPOR信號傳導通路中STAT5、BCL-2、BCL-XL蛋白表達均無明顯影響(P>0.05)。 結(jié)論 1、EPOR、STAT5A和STAT5B在MCF-7和MDA-MBA-231細胞中均表達。 2、EPOR和STAT5在乳腺癌組織中的高表達可能與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關，與病理組織學分級成正相關，EPOR和STAT5的表達存在相關。