不同劑量rhEPO對新型支氣管肺發(fā)育不良大鼠肺eNOS和Bcl-2蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察使用不同治療劑量的重組人促紅細(xì)胞生成素（ recombinant human erythropoietion, rhEPO）對SD新生幼鼠的新型支氣管肺發(fā)育不良模型（bronchopulmonary dysplasia, BDP）的肺組織中的，在PI3K/AKT信號傳導(dǎo)通路中的內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelialnitricoxidesynthase, eNOS）、Bcl-2兩個因子表達(dá)水平變化的影響，旨在探討重組人促紅

2、細(xì)胞生成素對新型 BPD的治療作用，及找出在該實驗條件下合適的給藥時間及使用劑量。
　　方法：本實驗利用脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）造成宮內(nèi)感染，并聯(lián)合新生幼鼠生后處于60％高氧環(huán)境兩個可控干預(yù)因素共同制備新型BPD模型。在使用rhEPO干預(yù)前，正常孕鼠組及LPS孕鼠組所生產(chǎn)的新生幼鼠中分別隨機(jī)抽取5只麻醉后，取肺組織行HE染色，觀察肺組織的病理變化；再從正常孕鼠組所生產(chǎn)的新生幼鼠中隨機(jī)抽取18只做為空

3、氣對照組，將剩下LPS孕鼠組所生產(chǎn)的新生鼠中進(jìn)行60%高氧處理，制備新型BPD模型，將其隨機(jī)平均分為五組，分別為生理鹽水對照組（甲組）、rhEPO800組（乙組）、rhEPO1000組（丙組）、rhEPO1200組（丁組）、rhEPO1400組（戊組），各18只，進(jìn)行rhEPO干預(yù)，在背部皮下給藥，第一次給藥的當(dāng)天記為第一天，并第1、7、14天末從各組采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)抽取6只麻醉后，取下肺組織于液氮中快速冷凍，-80℃超低溫冰箱保存

4、。之后采用RT-PCR及Western blot法檢測經(jīng)重組人促紅細(xì)胞生成素干預(yù)后，新型BPD模型的新生幼鼠肺組織中eNOS、BCL-2在蛋白以及mRNA水平的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：（1）LPS干預(yù)過的新生幼鼠的肺組織與正常孕鼠組相比較，可見肺毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血，肺泡間隔及肺泡腔內(nèi)可見少量炎細(xì)胞浸潤；（2）甲組中BCL-2蛋白及mRNA表達(dá)水平比正常對照組明顯降低，而eNOS因子的表達(dá)水平則明顯升高；乙、丙、丁、戊組與甲組相比，隨

5、著rhEPO給藥濃度的升高，BCL-2蛋白和mRNA的表達(dá)水平逐漸升高，而eNOS的表達(dá)量則逐漸降低，戊組中的表達(dá)變化最為明顯，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：（1）脂多糖造就孕鼠孕囊宮內(nèi)感染環(huán)境成功；（2）rhEPO能使新型BPD模型肺組織中BCL-2表達(dá)升高，eNOS的表達(dá)降低，而隨著用藥時間的延長，變化越明顯；四個不同劑量組之間，隨用藥劑量的高的提升，兩個因子表達(dá)量組間的差別逐漸變大，提示rhEPO對新型BP