牡丹籽油中脂肪酸的超高效液相色譜新分析方法研究.pdf

1、牡丹籽是一種非常理想的油料資源，它的含油量十分豐富。由牡丹籽提取出的植物油——牡丹籽油是我國特有的木本堅(jiān)果油，它營養(yǎng)豐富而獨(dú)特，且具有良好的醫(yī)療保健功效，因而被有關(guān)專家稱為“世界上最好的油”。牡丹籽油是植物油中的珍品，其于2011年3月22日正式獲批成為我國新資源食品。本研究以牡丹籽油作為脂肪酸新分析方法研究的對象，通過一系列的方法學(xué)考察、優(yōu)化、驗(yàn)證以及對比實(shí)驗(yàn)的實(shí)施從而最終建立起了一整套準(zhǔn)確而可靠的脂肪酸新分析測定方法（超高效液相色譜

2、-蒸發(fā)光散射檢測法，也即UPLC-ELSD法），并緊接著通過使用該方法對幾個(gè)不同品種的油樣進(jìn)行檢測從而很好地對該方法進(jìn)行了應(yīng)用。
　　首先對超高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法（UPLC-ELSD法）的色譜條件及檢測器的工作參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，色譜條件為:采用Welch Ultimate(R) UHPLCXB-C18色譜柱（2.1mm×100mm，1.8μm）;流動(dòng)相A為0.2％乙酸甲醇溶液，流動(dòng)相B為0.2％乙酸水溶液，A∶B=85∶1

3、5，流速為0.40 mL/min;色譜柱溫度為30℃;進(jìn)樣量為1μL;蒸發(fā)光散射檢測器的漂移管溫度為95℃;載氣流速2.8L/min。
　　接著對該方法進(jìn)行了方法學(xué)考察實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:亞麻酸、亞油酸、棕櫚酸、油酸以及硬脂酸各脂肪酸的線性關(guān)系良好，它們的線性相關(guān)系數(shù)(R)分別達(dá)到了:0.9932、0.9996、0.9955、0.9952和0.9915。使用該方法測定油樣中亞麻酸、亞油酸、棕櫚酸、油酸以及硬脂酸的實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性高（各脂

4、肪酸的RSD值分別為:1.79％、1.44％、0.76％、1.38％和2.12％），重現(xiàn)性好（各脂肪酸的RSD值分別為:1.75％、2.38％、1.56％、2.27％和2.16％），靈敏度高（各脂肪酸的最低檢出限分別為:0.01、0.01、0.02、0.02和0.02 mg/mL），回收率高（各脂肪酸的平均回收率分別為:98.8％、98.6％、98.6％、97.1％和98.2％）。
　　樣品的皂化條件經(jīng)過優(yōu)化后為:KOH-甲醇溶液

5、濃度0.70 mol/L，皂化時(shí)間70min，皂化溫度62.2℃;通過驗(yàn)證試驗(yàn)最終測得總脂肪酸的含量為700.26mg/g，與理論值（693.82mg/g）之間的誤差僅為0.93％，不足1％。
　　對皂化樣品中殘存的甘三酯進(jìn)行測定后發(fā)現(xiàn):牡丹籽油樣在經(jīng)過皂化以后原本甘三酯類物質(zhì)的色譜峰完全消失了，這也就更加證明最佳皂化工藝參數(shù)確實(shí)是十分可靠的。另外，通過與氣相色譜法進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，使用該方法(UPLC-ELSD法)和氣相色譜法進(jìn)行

6、檢測的實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性和重現(xiàn)性并無太大差異，但使用UPLC-ELSD法所測定出來的脂肪酸總量（700.26 mg/g）要比酯交換甲酯化法和三氟化硼甲酯化法測定出來的結(jié)果（分別為540.02 mg/g和568.96 mg/g）都要高，其原因有可能是由于酯交換法反應(yīng)不完全所致。
　　通過使用UPLC-ELSD法對幾種食用油脂進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，牡丹籽油中所含有的亞麻酸的量(336.04 mg/g)非常的高，僅次于亞麻籽油(490.01 mg/g)

7、，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了常見的茶油（126.18 mg/g）、米糠油（95.76 mg/g）以及我們?nèi)粘Ｋ秤玫慕瘕堲~調(diào)和油（192.83 mg/g）;其次，牡丹籽油中還含有豐富的油酸(148.75mg/g)及亞油酸（163.21 mg/g），而且它的飽和脂肪酸（即棕櫚酸和硬脂酸）的含有量最低，即其所含有的不飽和脂肪酸的比例最高。此外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示牡丹籽油中脂肪酸總量為700.26 mg/g，這也就更加充分的說明了牡丹籽油具有著巨大的開發(fā)利用價(jià)值