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文檔簡介
1、Waters高效液相色譜操作說明一簡介本高效液相色譜實驗包括:waters1525泵waters2487雙波長檢測器色譜柱電腦(breeze圖譜處理軟件)流動相二操作流程0.準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作確定色譜實驗方法,處理好流動相1,換好流動相,確定色譜柱選擇無誤1.開機(jī)開機(jī)打開泵開關(guān),聽到兩聲“嘀”的響聲之后,再打開波長檢測器。檢測器進(jìn)入預(yù)熱階段(此時檢測器面板進(jìn)入5min倒計時)這期間打開電腦,進(jìn)入英文windows操作系統(tǒng)2,待檢測器自檢完
2、畢(整個自檢過程約6~7min),打開電腦桌面的(Breeze軟件)。待程序完全啟動,整個開機(jī)過程結(jié)束。系統(tǒng)默認(rèn)進(jìn)入上次使用的方案。2.建立新方法和新方案建立新方法和新方案2.1新建方案方案主要用來儲存你的各個實驗方法,數(shù)據(jù)等內(nèi)容,你可以把它理解為一個文件夾。2.1.1創(chuàng)建步驟選擇→單擊→單擊“next“→在“projectname“中輸入方案名稱(如abc),“comments“中可填注釋,也可不填?!鷨螕簟癴inish“2.1.2打
3、開創(chuàng)建的方案在界面下→單擊→在“project“中找到你創(chuàng)建的方案(如abc)→點擊“OK“即進(jìn)入到我們自己的方案中了2.2新建方法在新建的方案中,需要建立不同的試驗方法。試驗方法主要設(shè)定的包括洗脫方式,檢測波長等參數(shù)。2.2.1新建方法步驟單擊→單擊→單擊(Flow選項卡)→在programmedflow中設(shè)定你的洗脫方式洗脫設(shè)置完畢繼續(xù)按照2.2.1完成方案的創(chuàng)建。3.洗泵和平衡洗泵和平衡方法設(shè)定完畢,我們還要進(jìn)行洗泵與平衡兩項工作
4、,讓機(jī)器做好進(jìn)樣前的準(zhǔn)備。3.1洗泵在更換流動相,第一次使用機(jī)器,長時間未使用的情況下需要進(jìn)行洗泵的工作。步驟如下:單擊(purgepump)→“next“→按指示圖操作:打開泵面板,取塑料注射器,扭開排液閥旋鈕,用注射器抽取泵中液體10ml左右(無氣泡即可),反向扭緊旋鈕,取出注射器。根據(jù)需要灌洗AB泵。單擊“next“→按圖示操作:向左打開參比閥,單擊“next“→(即是對AB泵以默認(rèn)的5mimin的流速進(jìn)行沖洗,若只充一個泵,只選
5、一個即可。)默認(rèn)沖洗時間5min,5min后自動停止,向右關(guān)緊參比閥→“finish“結(jié)束洗泵3.2平衡洗完泵后,還要將色譜柱內(nèi)雜質(zhì)洗凈。所以我們需要進(jìn)行平衡。在每次進(jìn)樣前,我們都必須洗平衡。步驟如下:單擊(equilibrate)→在彈出的對話框選擇所需方法(一般為你的實驗方法,如abc1)→待基線穩(wěn)定,且達(dá)到小數(shù)點后5位數(shù)字4的時候,即可停止洗平衡(一般十幾鐘到幾十分鐘不等)→(abt)4.進(jìn)樣進(jìn)樣平衡好之后,即可進(jìn)樣(請先將注射器
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