固載表面毛細(xì)流定向組裝成環(huán)技術(shù)及其在生化藥物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、西南師范大學(xué)博士學(xué)位論文固載表面毛細(xì)流定向組裝成環(huán)技術(shù)及其在生化藥物分析中的應(yīng)用研究姓名：劉穎申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：黃承志20040601固載裹面毛細(xì)流定向組裝成環(huán)技術(shù)及其在生化藥物分析中的應(yīng)用研究自組裝熒光環(huán)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)四環(huán)素的定量分析，方法的檢測(cè)限為85fmol(020l液滴)，成功地應(yīng)用于口服藥及合成樣分析。該方法具有背景干擾小、耗樣量少及對(duì)環(huán)境和分析工作者無損壞作用等特點(diǎn)。盡管在Tri爭HCI(pH520)酸性

2、條件下，四環(huán)素的熒光較弱，但當(dāng)加入一定量的砧“之后，四環(huán)素(TQ與烈“生成的配合物熒光增強(qiáng)，且最大激發(fā)波長為380Bin，最大發(fā)射波長為498nm。實(shí)驗(yàn)表明，將TCA13復(fù)合物滴加在疏水處理的載玻片上時(shí)，經(jīng)過環(huán)直徑的配合物最大熒光強(qiáng)度正比于四環(huán)素的濃度。當(dāng)點(diǎn)樣體積為010l時(shí)，四環(huán)素的線性范圍為75～8000fmol(或79。8000x108M)，檢測(cè)限達(dá)到O8fmol(或79x104M)。比四環(huán)素自身SOR法靈敏度提高6倍以上。用本法

3、實(shí)測(cè)了藥片、膠囊、尿液和牛奶中的四環(huán)素，回收率在970—1065％。該方法對(duì)人體組織、血清、尿液和食用食品中四環(huán)素殘留量的測(cè)定提供了可行的分析方法。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在SOR技術(shù)中采用烘箱干燥小液滴存在烘干時(shí)間較長、相鄰較近的液滴之間由于受熱不勻而導(dǎo)致液滴蒸發(fā)時(shí)溶劑揮發(fā)速度不同，環(huán)線上溶質(zhì)分布有時(shí)不是十分均勻，使處理數(shù)據(jù)時(shí)間拖長等不足。本文以鎮(zhèn)痛藥羥甲香豆素和熒光素為分析物，研究了微波加熱條件，并初步探討了不同加熱方式對(duì)成環(huán)的影響。在六氫吡啶溶

4、液中羥甲香豆素的激發(fā)波長為363rim，發(fā)射波長約為447nm。將含有羥甲香豆素的六氫吡啶和PVA124的混合溶液滴在由二氯二甲基硅烷處理的載玻片上，在微波爐高火檔加熱15min后，羥甲香豆素可以形成毫米大小的自組裝環(huán)，且環(huán)線上溶質(zhì)分布十分均勻，熒光強(qiáng)度比烘箱干燥時(shí)明顯增強(qiáng)，環(huán)線寬更窄。由于其熒光可以被苦味酸猝滅，猝滅程度與苦味酸的濃度成正比，由此建立了測(cè)定苦味酸的SOR分析方法。當(dāng)點(diǎn)樣體積為O10山時(shí)，苦味酸線性響應(yīng)為3050OxlO

5、14mol，檢測(cè)限達(dá)到30fmol，與液相熒光法相比，靈敏度顯著提高。用于水樣、無機(jī)和有機(jī)合成樣中痕量苦味酸的測(cè)定，回收率在970～1060％，RSD為2肚35％。本方法在臨床藥物分析、生命科學(xué)、環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域具有重要意義。同樣，當(dāng)使用微波爐加熱，熒光顯微分析表明飛摩爾量熒光素鈉可以在DMCS處理的載玻片上形成綠色熒光環(huán)，其外半徑小于060mm，環(huán)帶寬約為0024mm。當(dāng)點(diǎn)樣體積為010山時(shí)，熒光素鈉的線性范圍在06～1200飛摩爾f或

6、62～12000nM)，檢測(cè)限達(dá)到620阿摩爾(或06nM)。用本法測(cè)定了熒光素鈉注射液中的熒光素鈉，回收率在950—105O％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為35％和42％。建立了簡單、高靈敏、快速的測(cè)定探針?biāo)幬锏腟OR分析方法。基因工程技術(shù)的一個(gè)主要方向是利用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)蛋白藥物，因此，對(duì)核酸結(jié)構(gòu)和功能研究對(duì)有效設(shè)計(jì)和合成新藥具有重要意義。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在pH754(TrisHCI)溶液中，Hoechst33258可以與A—DNA形成復(fù)合物，