SrPCS基因的克隆和表達(dá)分析以及長喙田菁再生體系研究.pdf

1、　　 　　毒性重金屬污染已成為世界性的重大環(huán)境和人體健康問題。尤其是土壤重金屬污染，它通過食物鏈對人類造成的危害是不容忽視的。植物修復(fù)無疑是治理土壤重金屬污染最有前途的治理方式之一。然而，已知的超富集植物大多數(shù)傾向于生長速度慢、生物量低。 　　本實驗研究材料長喙田菁(Sesbaniarostrata)是一種源于非洲熱帶的豆科植物，與Azohizobiumcauliaodons共生，形成莖瘤和根瘤。固氮效率很高，是良好的水田綠肥。長喙

2、田菁具有生長速度快、生物量大、生長周期短、固氮能力強、耐受高濃度的鋅、鉛、銅、鎘等多種重金屬、可作為鉛鋅尾礦廢棄地植被重建的先鋒植物等特性，使之成為重金屬污染土壤的修復(fù)植物是有前途的。但長喙田菁對重金屬的富集能力不強，所以，期望通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得對重金屬具有高富集能力和耐性的長喙田菁。 　　在重金屬污染脅迫下，植物會啟動不同防御機制來降低重金屬離子對細(xì)胞的毒害。其中，植物絡(luò)合素是一類富含Cys的多肽化合物，能以Cys的巰基與重金屬發(fā)生

3、絡(luò)合作用而實現(xiàn)解毒功能。此類物質(zhì)是由植物絡(luò)合素合酶催化合成的。 　　本研究克隆了長喙田菁植物絡(luò)合素合酶(Sesbaniarostrataphytochelatinsynthase，SrPCS)的全長cDNA及其基因，并構(gòu)建了其中一個SrPCScDNA釀酒酵母表達(dá)載體。同時嘗試建立長喙田菁植株再生體系及其農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化體系，為進一步在長喙田菁中過量表達(dá)SrPCS基因奠定基礎(chǔ)。通過實驗獲得以下結(jié)果：1、分離、克隆得到了長喙田菁植物絡(luò)合素