豬GPAT基因克隆、變異和表達(dá)規(guī)律分析.pdf

1、肌苷酸(inosinc acid，inosinc mophosphate，IMP)，又名次黃嘌呤核苷酸，是ATP代謝的中間產(chǎn)物，存在于肌肉中。研究表明肌苷酸是畜禽肉中重要的鮮味物質(zhì)，其增加鮮味的能力比谷氨酸鈉強(qiáng)40倍，目前國(guó)際上已經(jīng)把肌苷酸含量作為衡量肉質(zhì)鮮味的一項(xiàng)重要指標(biāo)。谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺轉(zhuǎn)移酶(Glutamine phosphoribosylpyrophosphate amidotransferase，GPAT)是催化次黃

2、嘌呤核苷酸合成過(guò)程的一種限速酶，催化次黃嘌呤核苷酸合成的第一步反應(yīng)。因此，GPAT是影響肌苷酸生成、決定肉質(zhì)性狀的候選基因。為了進(jìn)一步探索GPAT基因與肉質(zhì)、風(fēng)味性狀的關(guān)系，本研究采用PCR-SSCP方法分析其遺傳多態(tài)性、采用real timePCR方法分析其組織表達(dá)規(guī)律。得到的主要結(jié)果如下：
　　 1)利用RT-PCR方法成功克隆了民豬GPAT基因的完整編碼區(qū)序列，長(zhǎng)2481 bp，預(yù)期編碼826個(gè)氨基酸，在多肽鏈存在一個(gè)LP

3、LAT_DHAPAT-like結(jié)構(gòu)和一個(gè)PlsB結(jié)構(gòu)；
　　 2)通過(guò)PCR-SSCP方法在外顯子1和14中尋找到了3個(gè)單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)，分別是c.151T>C，c.171G>T和c.1937G>T，其中c.151T>C和c.1937G>T是錯(cuò)義突變，分別導(dǎo)致了蛋白質(zhì)多肽鏈p.Phe51Leu、p.Leu646Arg的替代。群體遺傳學(xué)分析表明，各等位基因在民豬、大白、長(zhǎng)白、杜洛克、北京黑豬和野家雜交豬中的分布存在著極顯著的差異(