梅魚(yú)蛋白肽的制備及其生理活性研究.pdf

1、梅魚(yú)是水產(chǎn)品中一種低值魚(yú)類(lèi)，是我們國(guó)家的比較廣泛的捕撈對(duì)象之一。梅魚(yú)魚(yú)肉中蛋白質(zhì)含量較高，這種魚(yú)類(lèi)資源還未得到精深加工利用，利用梅魚(yú)魚(yú)肉酶解制備具有生理活性的功能多肽，可以充分利用梅魚(yú)蛋白資源，提高生產(chǎn)加工中下腳料的產(chǎn)品價(jià)值。
　　本研究主要以梅魚(yú)原料，挑選出最適宜的酶對(duì)梅魚(yú)進(jìn)行單酶酶解，利用挑選的最適宜的兩種酶進(jìn)行復(fù)合酶酶解，利用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)對(duì)梅魚(yú)酶解進(jìn)行優(yōu)化，再進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化和鑒定梅魚(yú)魚(yú)肉蛋白多肽；最后研究了梅

2、魚(yú)魚(yú)肉蛋白多肽的抗氧化性和降血壓活性，并且與金屬離子螯合、與市售的三種藥品進(jìn)行比較。主要結(jié)論如下：
　　1、選用3種蛋白酶對(duì)梅魚(yú)魚(yú)肉蛋白進(jìn)行酶解反應(yīng)，其中胰蛋白酶和中性蛋白酶的水解度較高，抗氧化性也較高，因此選用這兩種蛋白酶進(jìn)行復(fù)合酶解。以酶解時(shí)間、酶解溫度、pH、胰蛋白酶和中性蛋白酶的比例為優(yōu)化條件，對(duì)梅魚(yú)多肽制備進(jìn)行優(yōu)化。得到梅魚(yú)多肽的 DPPH自由基清除能力最高的優(yōu)化條件為：酶解時(shí)間為4h，酶解溫度44℃，pH值6.2，胰蛋

3、白酶與中性蛋白酶的比例5:2。在最優(yōu)條件下驗(yàn)證DPPH自由基清除率為81.11％±0.028，說(shuō)明梅魚(yú)蛋白多肽具有較強(qiáng)的抗氧化性。
　　2、通過(guò)質(zhì)譜分析出梅魚(yú)魚(yú)肉多肽的相對(duì)分子量為8170.17，進(jìn)行超濾后，在分子量小于5KDa的多肽中具有降血壓活性的多肽段的相對(duì)分子量為585.39，分子量在10-20KDa中具有抗氧化性的多肽段的相對(duì)分子質(zhì)量為7166.31。在10-20KDa中谷氨酸的含量最高已達(dá)到了13.56%，其次是亮氨酸

4、達(dá)到10.22%，再次是丙氨酸達(dá)到了9.49%，這三種氨基酸是10-20KDa多肽中氨基酸含量較多的。在小于5KDa的多肽中亮氨酸的含量最高，達(dá)到17.87%，其次是苯丙氨酸的含量達(dá)到11.62%，再其次是賴(lài)氨酸含量是9.98%。
　　3、比較各種分子量的抗氧化性和抑制ACE的比較，在不同分子量的抗氧化活性不同，在分子量為10-20KDa的多肽溶液中 DPPH自由基清除率為最高，在分子量為5KDa以下的多肽溶液降血壓活性為最強(qiáng)。將