模擬胃腸消化制備蠶蛹蛋白活性多肽及其生物活性研究.pdf

1、蠶蛹是蠶繭繅絲后的副產(chǎn)物，我國年產(chǎn)干蠶蛹約50萬t。蠶蛹營養(yǎng)成分豐富，干蛹中蛋白質(zhì)含量約占60％，油脂含量25%～30%，另外還有多種維生素以及鐵、鋅、硒等微量元素。蠶蛹蛋白是一種完全蛋白質(zhì)，含人體所需18種氨基酸，其中8種必需氨基酸含量約占40%，且比例適當(dāng)，符合FAO/WHO聯(lián)合食品標(biāo)準(zhǔn)建議的理想氨基酸模式，是一種優(yōu)質(zhì)的動物蛋白資源。
　　試驗主要從以下幾個方面對蠶蛹蛋白模擬消化多肽的制備及生物學(xué)活性進(jìn)行了研究，成果如下：

2、r>　　選用了正己烷、環(huán)己烷、石油醚作為提取劑，優(yōu)化建立了蠶蛹蛋白的脫脂工藝。結(jié)果表明，3種提取劑中，環(huán)己烷對蛹粉的脫脂效果最好；正己烷對整蛹的脫脂效果最好，且得到的蛹油品質(zhì)較好。選取正己烷對整蛹進(jìn)行脫脂，通過單因素試驗，考察了提取溫度、提取時間和液料比對脫脂率的影響。提取溫度40℃，提取時間4 h，液料比1:8時，浸提三次，脫脂率達(dá)98.3%。通過噴霧干燥和真空冷凍干燥兩種干燥方式制備蠶蛹蛋白粉，兩種蛋白粉外觀性狀有顯著差異：噴霧干燥

3、蛋白粉色澤淺，異味小，結(jié)構(gòu)細(xì)密均勻；真空冷凍干燥蛋白粉色澤較深，制備時間長，干燥成本高，易引起褐變反應(yīng)。噴霧干燥蛋白粉的溶解性低于真空冷凍干燥蛋白粉；噴霧干燥的集粉率低于真空冷凍干燥；兩種蛋白粉的持水力接近，但真空冷凍干燥蛋白的吸油性顯著高于噴霧干燥蛋白。最終采用真空冷凍干燥方式制備蠶蛹蛋白粉。
　　對蠶蛹蛋白及其模擬消化多肽進(jìn)行氨基酸分析，通過分析兩種樣品都含有常見的18種氨基酸，其組成符合FAO/WHO的標(biāo)準(zhǔn)蛋白模式。在體外模

4、擬消化試驗中，蠶蛹蛋白表現(xiàn)出了很高的消化速率，總氮釋放量達(dá)到92.72%。蠶蛹蛋白模擬消化多肽具有很好的抗氧化活性，總還原力、對DPPH·和OH·的清除能力都較高。
　　蠶蛹蛋白模擬消化多肽經(jīng)超濾分離，得到Mr（分子量）＞50 kDa，10 kDa≤Mr≤50 kDa，5 kDa≤Mr≤10 kDa和Mr＜5 kDa4種組分，其中小于5 kDa的組分得率最高，占多肽總量的64.13%。4種組分都具有很好的抗氧化活性，綜合還原力、D

5、PPH自由基清除率和·OH抑制率3個指標(biāo)，Mr＜5 kDa的組分抗氧化活性最強(qiáng)。Mr＜5 kDa的多肽經(jīng)凝膠滲透色譜法分析結(jié)果表明，1 kDa以下的組分占97.54%。
　　采用MTT比色法考察不同分子量的模擬消化多肽對肝癌細(xì)胞HepG2、前列腺癌細(xì)胞PC-3和乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231三種腫瘤細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果表明，在一定濃度范圍內(nèi)，＜5 kDa、5~10 kDa、10~50 kDa和＞50 kDa4種多肽對3種腫瘤細(xì)胞都