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文檔簡介
1、雄蠶蛾是滋補強身的佳品,其抗疲勞功效也在臨床實踐中得到證實,但目前的研究和產(chǎn)品開發(fā)多集中于雄性激素、蛻皮激素等活性成分。雄蠶蛾中蛋白含量高達40%以上,可通過酶解技術挖掘其功能因子,拓寬其利用領域。本論文以雄蠶蛾為原料,利用酶解技術制備雄蠶蛾多肽,通過超濾進行分級分離,系統(tǒng)研究了其體外抗氧化活性及穩(wěn)定性,并通過動物實驗評價了其抗疲勞作用。本研究有助于開發(fā)天然、安全、高效的抗疲勞食品基料,同時為科學全面地利用雄蠶蛾資源提供了依據(jù)。
2、 1、建立了高效的酶解工藝。實驗以蠶蛾粉為原料,對pH、溫度、時間、酶配比、料液比及酶用量等進行單因素實驗,控制雄蠶蛾蛋白酶解的水解度和肽得率雙指標,得到的最佳條件為pH10,溫度為50℃,時間120min,底物濃度7.5%,雙酶(Alcalase堿性蛋白酶、丹尼斯克堿性蛋白酶)復配比例為1∶2,酶活為5000U/g。隨后采用Box-Benhnken中心組合實驗設計法對酶解條件進行優(yōu)化,建立pH、溫度、時間、料液比等四因素的酶解效率回
3、歸模型。經(jīng)過Design-Expert軟件對數(shù)據(jù)進行回歸分析并結合試驗驗證的結果,確定的最佳酶解條件為:pH9.5、溫度55℃、時間130min、底物濃度7.0%。在此工藝條件下驗證結果為水解度27.32%,肽得率50.43%,綜合值40.47%。建立的回歸模型可以較好的預測酶解效果,對實際生產(chǎn)應用有一定指導意義。
2、對雄蠶蛾多肽進行分離分級及抗氧化活性研究。確定了雄蠶蛾蛋白質和水解物的分子量分布情況,將透析后的雄蠶蛾酶解物
4、進行超濾分級,得到五個組分,分別為MSH-Ⅰ(MW>30kDa), MSH-Ⅱ(10-30kDa), MSH-Ⅲ(5-10kDa), MSH-Ⅳ(3-5kDa)和MSH-Ⅴ(<3kDa),對超濾組分的氨基酸組成進行了分析和抗氧化活性體外測定,發(fā)現(xiàn)小于3KDa的組分抗氧化能力最強,相應ORAC和DPPH的Trolox當量值分別為1950μmol/g和275μmol/g。
3、系統(tǒng)研究了雄蠶蛾多肽的穩(wěn)定性。發(fā)現(xiàn)雄蠶蛾多肽在NaCl
5、濃度低于4%,25-60℃及中性pH的加工貯藏條件下,抗氧化活性能保持較高水平,而隨著光照時間的延長,其抗氧化活性有所減弱,宜采用避光保存。經(jīng)模擬胃腸消化后,雄蠶蛾多肽仍具有較高的抗氧化活性,說明其抗消化穩(wěn)定性較好,具有在人體內發(fā)揮功效的潛力。
4、研究雄蠶蛾多肽對小鼠抗疲勞作用及機理。動物實驗將小鼠分為五組,分別為空白對照組,實驗對照組,低劑量組,中劑量組和高劑量組,飼喂時間為期一月,然后對各實驗組進行睡眠剝奪處理,隨后進行
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