華支睪吸蟲31.8ku表膜蛋白的基因克隆表達(dá)、組織定位及免疫學(xué)功能研究

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文華支睪吸蟲31.8ku表膜蛋白的基因克隆表達(dá)、組織定位及免疫學(xué)功能研究姓名：黃艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：病原生物學(xué)指導(dǎo)教師：余新炳20080525華支睪吸蟲3 1 ．8 k u 表膜蛋白的基因克隆表達(dá)、組織定位及免疫學(xué)功能研究 中山大學(xué)博士學(xué)位論文l 研究目的識(shí)別、克隆華支睪吸蟲3 1 - 8 k u 表膜蛋白( C 汀P 3 1 ．8 ) 的全長(zhǎng)編碼序列( C D S ) ，表達(dá)重組o T P 3 1 ．8 蛋白，

2、在此基礎(chǔ)上對(duì)重組西T P 3 1 ．8 蛋白進(jìn)行免疫原性和免疫反應(yīng)性鑒定；確定Q T P 3 1 ．8 在華支睪吸蟲不同發(fā)育階段的表達(dá)和定位情況；了解重組o T P 3 1 ．8 蛋白與其它寄生蟲感染者血清的免疫反應(yīng)情況，以進(jìn)一步了解華支睪吸蟲表膜的生物學(xué)功能和篩選在華支睪吸蟲病防治中具有應(yīng)用前景的蛋白。2 研究方法2 ．1 華支睪吸蟲3 1 ．8 k u 表膜蛋白( t e g u m e n t a Ip m t e i n3 1

3、．8 k u o fc 腸刀口砌豇s 跏明s 豇，o T P 3 1 ．8 ) 的基因識(shí)別對(duì)華支睪吸蟲成蟲c D N A 質(zhì)粒文庫(kù)中的表達(dá)序列標(biāo)簽測(cè)序后進(jìn)行U I l i G e n e歸并、拼接獲得大批華支睪吸蟲成蟲c D N A 序列。利用美國(guó)生物技術(shù)信息中心網(wǎng)站提供的基本局部比對(duì)搜索工具( B L A S T ) 搜索G e n B a n k 中與目的序列具有一致性的蛋白序列，判斷目的序列是否為C D S ；利用該網(wǎng)站提供的O

4、R Ff i n d e r軟件識(shí)別目的序列的開放讀碼框( O I 疆) ；利用該網(wǎng)站提供的S p e c i a l i z e dB L A S T軟件尋找目的序列的保守功能域，從大批華支睪吸蟲c D N A 序列中篩選出C 譬T P 3 1 ．8 的C D S 。2 ．2 C ：I 汀P 3 1 ．8 的生物信息學(xué)分析利用瑞士生物信息學(xué)研究所的蛋白分析專家系統(tǒng)站點(diǎn)提供的生物信息學(xué)工具分析預(yù)測(cè)西T P 3 1 ．8 的理化特點(diǎn)、二級(jí)