腸道桿菌ppt課件

1、1,腸桿菌科,2,本章重點及難點,掌握致病性大腸埃希菌及其所致疾病掌握志賀菌屬與沙門菌屬的致病性掌握志賀菌屬與沙門菌屬微生物學(xué)檢查步驟熟悉腸桿菌科的共同特性了解大腸埃希菌的微生物學(xué)檢查及防治原則、志賀菌和沙門菌的防治原則、沙門菌分類、其他腸道細(xì)菌,3,腸桿菌科細(xì)菌,是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭陰性桿菌，常寄居在人和動物的腸道內(nèi)，亦存在于土壤、水和腐物中。目前已有44個屬，170多個種。引起人類感染的并不多。,4,與醫(yī)學(xué)的關(guān)系：

2、,致病菌：有少數(shù)細(xì)菌總是引起人類疾病，如傷寒沙門菌、志賀菌、鼠疫耶爾森菌等；機會致病菌：一部分細(xì)菌屬于正常菌群，但當(dāng)宿主免疫力降低或細(xì)菌移位至腸道以外部位時，即可引起機會性感染，如大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌等；,5,由正常菌群轉(zhuǎn)變而來的致病菌：由于獲得位于質(zhì)粒、噬菌體或毒力島上的毒力因子基因后而成為致病菌，如引起胃腸炎的大腸埃希菌。,6,腸桿菌科細(xì)菌共同生物學(xué)特性：,形態(tài)與結(jié)構(gòu) 中等大小G-桿菌。大多有菌毛，多數(shù)有周鞭毛

3、，少數(shù)有莢膜，不產(chǎn)生芽胞。培養(yǎng) 兼性厭氧或需氧。,7,生化反應(yīng) 活潑，可發(fā)酵多種糖類乳糖發(fā)酵試驗有重要鑒別意義,腸道致病菌與非致病菌鑒定中重要的生化反應(yīng),乳糖發(fā)酵試驗,腸道非致病菌（埃希菌）發(fā)酵乳糖,（志賀菌、沙門菌等）不發(fā)酵乳糖,,,,8,抗原結(jié)構(gòu)菌體抗原（O）: LPS最外層的特異性多糖，刺激機體產(chǎn)生IgM抗體。鞭毛抗原（H） ：鞭毛抗原，IgG抗體。莢膜抗原（K或Vi抗原）。,9,10,,抵抗力 不強膽鹽

4、、煌綠等染料對腸道非致病菌有選擇抑制作用，藉以制備選擇培養(yǎng)基來分離有關(guān)病原菌。,11,變異 易變異,耐藥性變異毒性變異生化反應(yīng)變異,接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶源性轉(zhuǎn)換等,,,12,,第一節(jié) 埃希菌屬Escherichia,大腸埃希菌最為重要腸道內(nèi)正常菌群引起腸道外感染少數(shù)致病性血清型引起人類胃腸炎衛(wèi)生監(jiān)測指標(biāo),13,生物學(xué)性狀,G-桿菌，多數(shù)菌株有周身鞭毛，有菌毛，無芽胞兼性厭氧生化反應(yīng)有O、H和K三種抗原能產(chǎn)生大腸

5、菌素（colicine）,葡乳麥甘蔗 尿素酶 H2S IMViC 動力 ⊕+⊕⊕⊕ - - + + - - +,14,SS培養(yǎng)基,15,致病性與免疫性,致病物質(zhì)黏附素定植因子抗原（CFA）、集聚黏附菌毛（AAF）、束形成菌毛（bundle forming pili, Bfp）、緊密黏附素（intimin）、P菌毛、Dr菌毛、I型菌毛和侵襲質(zhì)粒抗原（invasion p

6、lasmid antigen, Ipa）蛋白等。外毒素志賀毒素（Stx）、耐熱腸毒素（ST）、不耐熱腸毒素（LT）；內(nèi)毒素、莢膜、載鐵蛋白和III型分泌系統(tǒng)（type III secretion systems）,16,所致疾病腸道外感染敗血癥、新生兒腦膜炎、泌尿道感染最常見由尿路致病性大腸埃希菌（UPEC）引起。胃腸炎某些血清型可引起人類胃腸炎，與食入污染的食品和飲水有關(guān)。,17,引起胃腸炎的大腸埃希菌,18,腸產(chǎn)毒性

7、大腸埃希菌Enterotoxigenic E.coli ETEC,旅游者腹瀉、嬰幼兒腹瀉致病物質(zhì)enterotoxin腸毒素不耐熱腸毒素heat labile enterotoxin(LT)耐熱腸毒素heat stable enterotoxin(ST)the colonization factor定植因子(菌毛）,19,不耐熱腸毒素（LT）：分LT-I和LT-Ⅱ兩型 蛋白質(zhì)，對熱不穩(wěn)定，與霍亂腸毒素相似。

8、 A亞單位——毒素活性成分機制 B亞單位—與腸上皮細(xì)胞受體（GM1神經(jīng)節(jié)苷脂）結(jié)合 A進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)→激活腺苷酸環(huán)化酶 耐熱腸毒素（ST）：分STa、STb兩型，對熱穩(wěn)定。 機制為激活細(xì)胞鳥苷酸環(huán)化酶，使cGMP↑導(dǎo)致腹瀉。,,ATP CAMP↑,,,腸腔積液、腹瀉,,,20,腸侵襲性大腸埃希菌Enteroinvasi

9、ve E.coli EIEC,侵犯較大兒童和成人發(fā)熱，腹痛，有膿血便，似菌痢樣致病機制：侵襲并破壞結(jié)腸黏膜上皮,21,腸致病性大腸埃希菌Enteropathogenic E.coli EPEC,嬰幼兒腹瀉致病機制黏附到小腸上皮細(xì)胞，破壞刷狀緣，導(dǎo)致鄰近微絨毛破壞，A/E組織病理損傷，引起嚴(yán)重水樣腹瀉。過程：BfP (bundle forming pili)介導(dǎo)細(xì)菌與細(xì)胞疏松黏附，細(xì)菌主動分泌的緊密素與

10、宿主細(xì)胞膜上相應(yīng)受體緊密結(jié)合，細(xì)胞內(nèi)肌動蛋白重排，微絨毛破壞，干擾腸道對液體的吸收功能。,22,腸出血性大腸埃希菌Enterohemorrhagic E.coli EHEC,主要血清型：O157:H7所致疾病可逾萬人流行輕度水瀉 伴劇烈腹痛的血便出血性結(jié)腸炎 溶血性尿毒綜合癥死亡率 ：3%～5%致病物質(zhì)志賀毒素(Stx-I and Stx-II).,,23,出血性腸炎（HC）的典型臨床表現(xiàn)為

11、：鮮血樣便、 腹部痙攣性疼痛、低燒或不發(fā)燒。患者可表現(xiàn)為先水樣腹瀉，約數(shù)小時至1天后轉(zhuǎn)為血性腹瀉。溶血性尿毒綜合癥（HUS）主要發(fā)生在兒童，常出現(xiàn)在腹瀉后數(shù)天或1-2周后，病例主要表現(xiàn)為血小板減少、溶血性貧血、急性腎功能衰竭三大特征。大多數(shù)HUS發(fā)生在急性腹瀉之后， 兒童和老人易感。病死率一般在10%，個別可高達(dá)50%。,臨床表現(xiàn),24,腸集聚型大腸埃希菌Enteroaggregative E.coli EAEC,嬰兒、旅行

12、者持續(xù)性水樣腹瀉致病機制黏附腸細(xì)胞表面聚集，形成磚狀排列。導(dǎo)致微絨毛變短，單核細(xì)胞浸潤和出血產(chǎn)生腸毒素,25,（一）標(biāo)本 腸外感染：采取中段尿、血液、膿液、腦脊液等； 胃腸炎：取糞便。,三、微生物學(xué)檢查法,（三）衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查 大腸菌群數(shù),（二）分離培養(yǎng)與鑒定,（1）腸外感染。 ① 涂片染色檢查：革蘭染色陰性短桿菌。 ② 分離培養(yǎng)： 標(biāo)本→血瓊脂平板→菌落特征→鑒定→ I

13、MViC（++- -）試驗和 ↑ ↑ 系列生化反應(yīng) 血液→肉湯增菌 離心沉淀物←體液 尿路感染尚需記數(shù)菌落量，每毫升≥10萬才有診斷價值。（2）腸內(nèi)感染 糞便→鑒別培養(yǎng)基→可疑菌落→鑒定為大腸桿菌后→ 腸毒素、毒力因子和血清型 方法：ELISA、核酸雜交、PCR,我國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，大腸菌群在每升飲

14、水中不得超過3個； 每100ml瓶裝汽水、果汁中不得超過5個。,26,預(yù)防疫苗正在研制中加強水和食品、環(huán)境的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)監(jiān)測，注意飲食衛(wèi)生進(jìn)行診療技術(shù)時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，減少醫(yī)院感染 隔離治療腹瀉病人，切斷傳染源治療耐藥性菌株普遍（一種或多種抗生素）抗生素治療應(yīng)在藥物敏感試驗的指導(dǎo)下進(jìn)行,四、防治原則,27,第二節(jié) 志賀菌屬 Shigella,引起細(xì)菌性痢疾俗稱痢疾桿菌,28,1、形

15、態(tài)結(jié)構(gòu) G－短小桿菌、有菌毛,無鞭毛2、培養(yǎng)特性 營養(yǎng)要求不高 S.S等選擇培養(yǎng)基上，呈無色半透明菌落,生物學(xué)性狀,3、生化反應(yīng) 分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。 除宋內(nèi)志賀菌個別菌株遲緩發(fā)酵乳糖 （一般需3—4天）外，均不分解乳糖 動力陰性，硫化氫陰性。,29,4. 抗原與分類O抗原與K抗原,,我國以福氏、宋內(nèi)流行多見,30,,抵抗力 低于其他腸道桿菌，對酸敏感 多重耐藥問題嚴(yán)重,31,

16、菌毛,,穿入回腸未端、結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞,,黏膜固有層上皮細(xì)胞內(nèi)增殖、炎癥,Ⅲ型分泌系統(tǒng),M細(xì)胞,Ipa,,黏附,誘導(dǎo)內(nèi)吞,致病性與免疫性,致病物質(zhì)侵襲力,32,內(nèi)毒素,,,,,膿血粘液便,,刺激腸壁植物神經(jīng)功能紊亂,破壞局部黏膜,加重壞死及潰瘍形成,,腹痛、里急后重等,典型痢疾癥狀,全身表現(xiàn)：內(nèi)毒素血癥、發(fā)燒、神志障礙、嚴(yán)重者中毒性休克,,,,,內(nèi)毒素 志賀菌致病的主要因素,,腸黏膜通透性內(nèi)毒素吸收,,,,3

17、3,外毒素（A群Ⅰ、Ⅱ型）志賀毒素 ST(VT)結(jié)構(gòu)與功能： 1個A亞單位——進(jìn)入細(xì)胞后，阻斷蛋白質(zhì)合成。 5個B亞單位——與宿主細(xì)胞糖脂受體結(jié)合， 介導(dǎo)A亞單位入細(xì)胞 A亞單位裂解60S核糖體亞單位的28S rRNA， 阻止其與氨酰tRNA的結(jié)合，致使蛋白質(zhì)合成中斷。毒素作用的基本表現(xiàn)： 上皮細(xì)胞損傷 小部分病人可表現(xiàn)

18、為腎小球內(nèi)皮細(xì)胞損傷， 導(dǎo)致溶血性尿毒綜合征(HUS),34,細(xì)菌核糖體 真核細(xì)胞核糖體,35,所致疾病細(xì)菌性痢疾傳染源：患者和帶菌者感染劑量：103個，最低10個傳播方式：糞-口途徑特點：感染限于腸道，細(xì)菌不入血,36,,細(xì)菌性痢疾,,急性典型 發(fā)熱、腹痛、水樣便而后發(fā)展為膿血粘液便、里急后重、下腹部疼痛非典型 易誤診，導(dǎo)致帶菌和慢性

19、中毒性痢疾 小兒，無消化道癥狀而是全身中毒癥狀慢性反復(fù)發(fā)作，病程＞2個月帶菌者 細(xì)菌長期存在于結(jié)腸，重要傳染源,,20%,37,1、粘膜局部抗感染免疫 主要是消化道粘膜表面的分泌型IgA（sIgA）；2、病后免疫期短暫，也不鞏固。 原因： ① 細(xì)菌僅侵入腸壁組織，不入血 ② 菌屬內(nèi)型別多3、感染恢復(fù)后，血清中

20、可產(chǎn)生循環(huán)抗體，但無保護作用。,免疫性,38,及時送檢/暫用30%甘油緩沖鹽水保存,SS平板（無色透明小菌落）,血清學(xué)試驗（玻片凝集）,最后診斷,分離培養(yǎng),新鮮膿血便/肛拭,雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）,,,,,,,,,快速診斷,微生物學(xué)檢查法,39,預(yù)防控制傳染源，切斷傳播途徑研制減毒活疫苗：如依鏈株治療抗生素易引起耐藥性，應(yīng)聯(lián)合用藥,防治原則,40,第三節(jié) 沙門菌屬 Salmonella,一大群人與動物腸道中的寄生菌兩個種：

21、腸道沙門菌、邦戈沙門菌菌群菌型甚多，僅少數(shù)對人致病，且多為人畜共患病,41,對人致病的血清型 傷寒沙門菌、 甲型副傷寒沙門菌、 肖氏沙門菌、 希氏沙門菌 引起腸熱癥（傷寒或副傷寒） 人畜共患病的血清型 鼠傷寒沙門菌、

22、 豬霍亂沙門菌、 腸炎沙門菌等 可引起人類食物中毒或敗血癥,42,生物學(xué)性狀,G-桿菌，有鞭毛，有菌毛，無芽胞，無莢膜生化反應(yīng),葡乳 尿素酶 H2S IMViC 動力 ⊕ - - + /- - + - + + （傷寒沙門菌除外）,,43,主要沙門菌的

23、生化特性,44,抗原構(gòu)造菌體抗原（O抗原）：由數(shù)個成分組成不同型別之間常有交叉，特異性較差鞭毛抗原（H抗原）：有第Ⅰ相和第Ⅱ相第Ⅰ相特異性強Vi抗原傷寒、希氏沙門菌的表面抗原，與毒力有關(guān)抗原性弱，刺激機體產(chǎn)生短暫低效價抗體伴隨活菌一起存在，故可用于檢出帶菌者,45,3、抗原構(gòu)造 主要有O和H兩種抗原，少數(shù)菌中尚有Vi抗原。,常見的沙門菌的抗原組成,沙門菌對理化因素的抵抗力較差。在自然界中抵抗力較強，耐低溫，在水面中可存

24、活1-3周，在冰中可存活1-2月 但對膽鹽、煌綠的耐受性較強,46,（一）致病物質(zhì) 1、侵襲力 有毒株能侵襲小腸粘膜致病作用： （1）耐酸應(yīng)答基因抗酸性保護作用：（胃和吞噬體的酸性環(huán)境生存） （2）種特異性菌毛黏附、侵入M細(xì)胞內(nèi)生長繁殖 （3）SPI-I（沙門菌致病性島Ⅰ）分泌侵襲蛋白： 細(xì)菌內(nèi)吞，細(xì)菌擴散并進(jìn)入毗鄰細(xì)胞淋巴組織。 （4）Vi抗原：

25、抗吞噬、抗有害物質(zhì)破壞菌體 2、內(nèi)毒素 3、腸毒素 如鼠傷寒沙門菌可產(chǎn)生腸毒素，致胃腸炎。,二、致病性與免疫性,47,腸熱癥,傷寒沙門菌S. typhi,甲型副傷寒沙門菌S. paratyphi A,肖氏沙門菌S. schottmuelleri,希氏沙門菌S. hirschfeldii,小腸上部黏膜,腸系膜淋巴結(jié),血液,血液,,第一次菌血癥,第二次菌血癥,胸導(dǎo)管,持續(xù)高熱相對緩脈肝脾腫大 玫瑰疹白細(xì)

26、胞減少,尿,腸道,,糞,,腸壁淋巴組織,,腸出血腸穿孔,死亡主要原因,,,,,,48,胃腸炎（食物中毒）,鼠傷寒沙門菌豬霍亂沙門菌腸炎沙門菌,,大于108,食物中毒（發(fā)熱、惡心、嘔吐、 腹痛、水樣瀉）,敗血癥：,希氏沙門菌鼠傷寒沙門菌豬霍亂沙門菌腸炎沙門菌,,血,,敗血癥（高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血）,,腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、心內(nèi)膜炎,最常見,49,無癥狀帶菌者,約1 % ～5%傷寒或副傷寒患者，癥狀消

27、失1年后，糞便仍可排菌，這些菌主要留在膽囊中，有傳染性。,50,51,,免疫性 病后獲得牢固免疫性，特異性細(xì)胞免疫是主要防御機制。胃腸炎的恢復(fù)與腸道局部生成sIgA有關(guān)。,52,微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本腸熱癥：第1周 血液 第2周 糞便 第3周 尿液 第1～3周 骨

28、髓液胃腸炎：剩余食物和糞便敗血癥：血液帶菌者：十二指腸引流液,53,血清學(xué)診斷——肥達(dá)試驗（Widal test）用已知傷寒沙門菌O、H抗原，以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作定量凝集試驗，測定受檢血清中有無相應(yīng)抗體及其效價的試驗。,54,肥達(dá)試驗的結(jié)果判斷考慮正常人群抗體水平動態(tài)觀察：恢復(fù)期效價增加≥4倍診斷意義O高 H高 腸熱癥可能性大O低 H低

29、 排除O高 H低 早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染O低 H高 預(yù)防接種或曾患病,55,,,Ag 測 Ab已知 未知 滴度,,Ag加樣方向,,1.稀釋Ab,2.加Ag3.35℃孵育30’4.結(jié)果觀察,病人1：10血清 0.8 ml,生理鹽水0.8 ml,吸管吹打3次 混勻,血清1：20 1.6ml,生理鹽水0.8ml,0.2ml×4

30、 第一列小孔0.8ml,,,血清1：80 1.6ml,血清1：40 1.6ml,,0.2ml×4 第二列小孔0.8ml,,,生理鹽水 0.8ml,56,57,Example of widal test,,58,傷寒帶菌者的檢出 最可靠的診斷方法是分離出病原菌。 分離的標(biāo)本來自可疑帶菌者的糞便、膽汁 或尿液，但通常分離檢出率不高。 因此，一般是先用血

31、清學(xué)方法檢測可疑者 Vi抗體進(jìn)行篩選，若效價≥1：10時， 再反復(fù)取糞便等標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)， 以確定是否為傷寒帶菌者。,三、微生物學(xué)檢查法,59,預(yù)防水源和食品的管理發(fā)現(xiàn)、確診、治療帶菌者帶菌者帶菌期間嚴(yán)禁從事餐飲業(yè)傷寒Vi莢膜多糖疫苗治療環(huán)丙沙星,防治原則,60,克雷伯菌屬——肺炎克雷伯菌醫(yī)院感染的重要細(xì)菌以肺炎最常見?？梢鹉蚵犯腥尽?chuàng)傷感染及腹瀉等，有時導(dǎo)致嚴(yán)重的敗血癥、腦膜炎

32、、腹膜炎等,其他菌屬,61,變形桿菌屬條件致病菌，可引起泌尿道感染，食物中毒多形性有周鞭毛——遷徙生長現(xiàn)象具有尿素酶與立克次體有共同抗原：外斐試驗?zāi)承┚昱c立克次體有共同抗原成分，因此臨床上常用變形桿菌OX19、OX2、OXk代替立克次體抗原與斑疹傷寒或恙蟲病患者血清作凝集試驗（外－斐試驗），協(xié)診立克次體病。,62,,變形桿菌在血瓊脂平板上的菌落,63,思考題,1.解釋：肥達(dá)反應(yīng)（Widal Reaction）、

33、 外斐反應(yīng)（Weil—Felix reaction）2.簡述引起腸道感染的大腸埃希菌的種類及其致病特點。3.大腸埃希菌最常見的腸道外感染有哪些？4.腸道桿菌的共同特點是什么？5.試述志賀菌屬包括哪些細(xì)菌？引起什么疾?。恐饕闹虏∥镔|(zhì)有哪些？我國常見的是哪種？6.如何采集細(xì)菌性痢疾病人糞便標(biāo)本？7.急性菌痢的典型癥狀有哪些？解釋其形成機制8.人類沙門菌感染有哪些？各由哪些沙門菌引起？ 解釋其發(fā)生機制。

34、臨床最常見的是哪種？ 9.腸熱癥診斷標(biāo)本采集的原則。10.什么是肥達(dá)試驗？如何進(jìn)行結(jié)果判定?11.簡述腸道菌糞便標(biāo)本分離鑒定的流程。,64,中英文關(guān)鍵詞,65,中英文關(guān)鍵詞,66,課外閱讀資料目錄,[1] Pennington H.,Escherichia coli O157.Lancet. 2010 Oct 23;376(9750):1428-35.[2] Tarr PI, Gordon CA, Chandler WL.

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