acl系列血凝儀檢測(cè)原理介紹及血栓止血臨床基礎(chǔ)

1、ACL全自動(dòng)凝血/纖溶分析儀,生產(chǎn)商：IL公司簡(jiǎn)介,始建于 1959年處于全球?qū)嶒?yàn)室診斷領(lǐng)域的領(lǐng)先地位推出第一臺(tái)血?dú)夥治鰞x最先推出火焰光度計(jì)獲得離心式分析技術(shù)的專利,Milano Office,IL:Instrumentation Laboratory,銷售網(wǎng)絡(luò):歐洲、中東、拉丁美洲、太平洋地區(qū)總部在Milano（意大利）美國(guó)和加拿大總部在 Lexington （美國(guó)）從1992年開始，BC與IL結(jié)成戰(zhàn)略聯(lián)盟，從產(chǎn)

2、品和市場(chǎng)雙方面合作，共同領(lǐng)導(dǎo)全球血液和流式細(xì)胞自動(dòng)分析的發(fā)展。,生產(chǎn)商：IL公司簡(jiǎn)介,ACL系列發(fā)展的軌跡,1985年 ACL8101988年 ACL100/200/300/300R1991年 ACL1000/2000/3000/3000Plus1995年 ACL Futura1996年 ACL 60001997年 ACL 7000

3、2000年 ACL Advance2001年 ACL 90002002年 ACL 80002005年 ACL TOP,,,目前在市場(chǎng)上推出的ACL型號(hào),ACL 100ACL 200ACL 7000ACL 9000ACL AdvanceACL TOP,,,ACL各型號(hào)的共同特點(diǎn),光學(xué)凝固法:常規(guī)檢測(cè)：PT/FIB,APTT,TT特殊檢測(cè)：因子，F(xiàn)IB-C

4、lauss，PC，PS，LAC，APC-R，口服抗凝藥試驗(yàn)提供凝固反應(yīng)曲線FIB:兩種檢測(cè)方法PT衍生FIB法和FIB-Clauss法標(biāo)準(zhǔn)RS-232 接口，方便聯(lián)網(wǎng)條形碼掃描器，方便樣品信息輸入和實(shí)驗(yàn)室管理完美的儀器和儀器原廠試劑組合提供精確的結(jié)果完備的測(cè)試試劑、質(zhì)控品、校正品組合先進(jìn)的基因重組試劑、合成試劑：PT（基因重組、WHO標(biāo)準(zhǔn)）、APTT（合成）檢測(cè)動(dòng)物標(biāo)本結(jié)果可靠（ACL7000以上）,各檢測(cè)方法的檢測(cè)項(xiàng)

5、目凝固法 PT,APTT,TT,FIB(PT-Based & FIB-Clauss), FactorsII, V,VII,X,VIII,IX,XI,XII,Protein C, Protein S, APC-R, LAC,PCX,HPX發(fā)色底物法 Anti-thrombin, Heparin(普通&低分子), PLG, Plasmin Inhibitor, Protein C 免疫比濁法

6、D-Dimer, vWF Ag , vWF Act ,Protein S, HS-CRP,ACL各型號(hào)的共同特點(diǎn),不同型號(hào)血凝儀檢測(cè)原理介紹,ACL 00/7000ACL 8/9/10000ACL FUTURA/ADVANCEACL TOP,ACL 00/10000檢測(cè)原理,凝固法（散射比濁）,凝固法：檢測(cè)根據(jù)Fib的凝固形成顆粒，檢測(cè)900光散射值的增加值。信號(hào)經(jīng)過軟件設(shè)計(jì)的一系列數(shù)學(xué)運(yùn)算法則連續(xù)監(jiān)測(cè)凝固過程曲線，獲得結(jié)果。,

7、發(fā)色底物法,通過物質(zhì)的反應(yīng)顯色，檢測(cè)吸光度變化值。,免疫比濁法（透射比濁）,借助抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)，檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)吸光度變化值；只表示含量，不反映所檢物活性。,ACL 00/10000檢測(cè)原理,凝固法（光散比濁檢測(cè)）波長(zhǎng)：660nm(ACL00/10000)發(fā)色底物法（透射光比色檢測(cè)）波長(zhǎng)：405nm (ACL200以上儀器)免疫比濁法： （透射光比濁檢測(cè)）波長(zhǎng)：405nm (ACL200以上儀器),凝固法,發(fā)色底物和免疫比濁法,

8、ACL 00/10000檢測(cè)原理,,離心式液體分配系統(tǒng)：加入樣品和試劑后，反應(yīng)盤1200rpm旋轉(zhuǎn)，使其在瞬間充分混勻，結(jié)果準(zhǔn)確、精密度高；,ACL 00/10000檢測(cè)原理,清洗緩沖液 Wash R Emulsion的作用：清洗樣本和試劑針內(nèi)外表面；作為光學(xué)凝固（散射比濁法）中的檢測(cè)參比100％不能用其它自配的清洗液替代反應(yīng)盤Rotor：20個(gè)獨(dú)立反應(yīng)杯；每杯各有兩個(gè)隔開的腔；內(nèi)圈裝樣本或第二試劑；外圈只裝試劑；旋轉(zhuǎn)

9、過程，試劑和樣本瞬間混勻；,ACL ADVANCE檢測(cè)原理,凝固法（透射比濁，880nm,180度角檢測(cè)）,ACL ADVANCE檢測(cè)原理,發(fā)色底物法：405nm,ACL ADVANCE檢測(cè)原理,免疫比濁法：405nm,ACL TOP檢測(cè)原理,凝固法（透射比濁，671nm,180度角檢測(cè)）,ACL TOP檢測(cè)原理,發(fā)色底物法：405nm,ACL TOP檢測(cè)原理,免疫比濁法：671nm或405nm,光學(xué)凝固法檢測(cè)優(yōu)點(diǎn),直接測(cè)定，結(jié)果可靠

10、數(shù)據(jù)連續(xù)監(jiān)測(cè)、本底掃描提供凝固反應(yīng)曲線，為實(shí)驗(yàn)室及臨床提供更多信息去處黃疸血、高脂血本底，消除干擾準(zhǔn)確測(cè)定低纖維蛋白原樣品,結(jié)果可靠,光散檢測(cè)原理每次測(cè)試收集1100個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)，連續(xù)平均數(shù)據(jù)處理方式，利用先進(jìn)的第一微分和第二微分法則測(cè)定結(jié)果，穩(wěn)定可靠，精密度高，重復(fù)性好,光學(xué)法提供凝固曲線,,,,,,,,,,,Time,,,LS,,本底掃描，消除黃疸、高血脂干擾,數(shù)據(jù)連續(xù)監(jiān)測(cè),凝固點(diǎn)確定：最大反應(yīng)速度，與光散絕對(duì)值無關(guān),干擾因素

11、,游離血紅蛋白〈1g/L,溶血到一定程度,本身會(huì)激活凝血因子甘油三酯〈7.7mmol/L膽紅素〈256.5umol/L,血栓止血臨床基礎(chǔ),血小板激活一次血栓形成,血管収縮,凝固因子激活二次血栓形成,線溶系統(tǒng)激活血栓溶解,止凝血過程,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

12、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,內(nèi)皮細(xì)胞,,,血管収縮,血管収縮,血管損傷(出血),,血小板,,,①,,,血小板,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,②,③,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

13、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,④,血液中包含的凝血因子,血凝瀑布學(xué)說,外源性凝血途徑與 PT,PT是反映外源性凝血途徑中II、V、VII、X因子水平的實(shí)驗(yàn)，PT只反映凝血因子水平，并不反映凝血因子是否活化。,PT INR,為了解決這一問題，目前國(guó)際上采用給予PT試劑標(biāo)定國(guó)際敏感度指數(shù)(international sensitivity index, ISI）的方法,并進(jìn)以通過相關(guān)公式計(jì)算出:“國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值”Interna

14、tional Normalized Ratio, INR 。,PT-INR 口服抗凝藥監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo),據(jù)了解PT存在的主要問題在于INR!由于：所以INR不好可能原因有：病人PT或PT質(zhì)控時(shí)間不對(duì)（可以通過以上幾點(diǎn)檢查）正常人PT時(shí)間（MNPT）不對(duì)試劑對(duì)應(yīng)儀器的ISI值不對(duì),不適用INR的三種情況包括,INR不適用于測(cè)定口服抗凝藥初期的病人血漿，凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ的水平和活性在血漿中半壽期不同，所以在口服抗凝藥初期這

15、些因子的作用與口服抗凝藥穩(wěn)定后PT延長(zhǎng)中起的作用是不同的INR不適用于肝病 凝血因子缺陷病人的血漿INR不適用于非抗凝治療 而PT延長(zhǎng)的病人血漿。,PS,維生素K依賴凝血因子,VIIIa,XII,,XIIa,XIa,,,XI,,,IIa,,Fibrinogen,Fibrin,,,,,Ca++,Va,,,IXa,Xa,VIIa,維生素K依賴凝血因子,PC,ATIII,,IX,,II,X,,VII,,,,,,,Int

16、rinsic pathway,Extrinsic pathway,Common pathway,口服華法令治療機(jī)理和過程,華法令通過拮抗維生素K的作用從而減少和阻止維生素K依賴的凝血因子II、VII 、IX、X的合成，從而影響內(nèi)源性凝血途徑。,PT INR與華法林,抗栓機(jī)制：華法林 減少凝血酶原（II）和FX的作用更重要， 減少FVII和FIX相對(duì)較弱。華法林抗栓作用起效需要6d，主要減少凝血酶原的生成（凝血酶原有

17、較長(zhǎng)的半壽期）。 華法林抗凝作用起效需要2d。,PT INR與華法林華法林抗栓效應(yīng)的另一個(gè)提示,血栓病人口服抗凝藥治療過渡中，肝素與華法林重疊直至PT INR延長(zhǎng)至有效治療范圍，因?yàn)槟冈雺燮跒?0~72h，故重疊4d是必要的。,PT INR與華法林 WHO的建議,術(shù)前預(yù)防深靜脈血栓 2.0~2.5髖關(guān)節(jié)和股骨骨折術(shù)前預(yù)防 2.0~3.0深靜脈血栓或肺梗死治療 2.0~3.0短暫發(fā)作的局

18、部缺血 2.0~3.0心肌梗死 3.0~4.5動(dòng)脈血栓 3.0~4.5心瓣膜置換或修復(fù) 3.0~4.5,PT INR與華法林 國(guó)內(nèi)資料,術(shù)前預(yù)防深靜脈血栓 1.5~2.5髖關(guān)節(jié)和股骨骨折術(shù)前預(yù)防 2.0~2.5深靜脈血栓或肺梗死治療 2.0~2.8短暫發(fā)作的局部缺血 2.0~2.8心肌梗死 2.5~3.0動(dòng)脈血栓 2.5~3.

19、0心瓣膜置換或修復(fù) 2.5~3.0,活化部份凝血活酶時(shí)間,APTT,內(nèi)源性凝血途徑與 APTT,是反映內(nèi)源性凝血途徑中VIII、IX、XI、XII因子水平的實(shí)驗(yàn)，APTT只反映因子水平，并不反映凝血因子是否活化。,肝素與APTT,普通肝素通常采用APTT監(jiān)測(cè)，以判斷療效，該值一般應(yīng)維持于正常值的1.5~2.5倍。不同設(shè)備與試劑APTT參考值略有不同。即使APTT在治療范圍內(nèi)，也可出現(xiàn)嚴(yán)重的出血并發(fā)癥。最初24~48小時(shí)內(nèi)

20、的APTT亞治療量范圍。,凝血因子VII缺陷癥（遺傳性、獲得性）,外源途徑缺陷,共同途徑缺陷,凝血因子I、II、V、X缺陷癥 （遺傳性、獲得性）,因子XIII定性實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性,內(nèi)源途徑缺陷,有出血癥狀,無出血癥狀,凝血因子VIII、IX、XI缺陷癥 （遺傳性、獲得性）,凝血因子XII、PK、HMWK缺陷癥 （遺傳性、獲得性）,凝血因子XIIII缺陷癥（遺傳性、獲得性）,,

21、,,,,,,,,,,出血性疾病的診斷,凝血酶時(shí)間TT檢測(cè)原理,試劑成分：濃縮牛凝血酶濃縮緩沖液：含0.5mol/L氯化鈣試劑配制：用NCCLS II型或相同質(zhì)量的去離子水按1:5 (1+4)倍數(shù)按需稀釋濃縮緩沖液，用來溶解凝血酶，用前混勻 反應(yīng)原理：在過量的純化的牛凝血酶的存在下，樣本中的纖維蛋白原被轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，儀器檢測(cè)凝固形成所需要的時(shí)間 類似于Fib-C檢測(cè)。凝血酶的含量低于Fib-C檢測(cè)（TT-5：3.0 UNI

22、H/mL ;Fib-C:17.5 UNIH/mL ）反應(yīng)時(shí)間取決于共同途徑的因子水平丁香園論壇資料：http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=131&id=8057748&sty=1&tpg=1&age=0,TT檢測(cè)的臨床意義,彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）的評(píng)估 肝素抗凝治療和溶栓治療的監(jiān)測(cè) 纖維蛋白或者纖維蛋白原降解產(chǎn)物（FDP）異常監(jiān)測(cè)遺傳性、獲得性纖維蛋白原的數(shù)