酶法處理煙葉碎片制備煙草浸膏

1、酶法處理煙葉碎片制備煙草浸膏酶法處理煙葉碎片制備煙草浸膏龐登紅1，李丹2，熊國璽3，王娜3，陳守文1，1.華中農業(yè)大學農業(yè)微生物國家重點實驗室，湖北武漢4300702.湖北中煙工業(yè)有限責任公司技術中心，湖北武漢4300513.武漢黃鶴樓天然香料有限公司，湖北武漢430040EMAIL:pangdenghong@摘要：要：為了實現(xiàn)煙葉碎片的再利用，本文開展了中性蛋白酶處理煙葉碎片提取物制備煙草浸膏的工藝研究。優(yōu)化了pH調節(jié)劑、酶添加量、酶

2、處理溫度和酶處理時間，優(yōu)化條件為：pH調節(jié)劑為1molL氫氧化鈉溶液，中性蛋白酶添加量為6.0gL，酶處理溫度為40℃，酶處理時間為4h。與對照比較，酶法浸膏能改善煙氣狀態(tài)，降低刺激性，減少殘留；煙葉碎片提取物中氨基酸含量增加了211.1%316.7%，還原糖含量增加了8.0%8.8%，蛋白質含量減少了11.2%43.0%；且此酶法浸膏中含吡喃和吡嗪環(huán)狀小分子結構的香氣物質含量增加了5.5%，高分子醇、酸和烷烴含量減少45.5%，以及尼

3、古丁含量降低了5.5%。關鍵詞關鍵詞：煙葉碎片；煙草浸膏；中性蛋白酶；氣質分析中文分類號：[Q814.9]TobaccoextractmadefromtobaccofragmentswithenzymePANGDenghong(1)LIDan(2)XIONGGuoxi(3)WANGNa(1)CHENShouwen(1)1.StateKeyLabatyofAgricaturalMicrobiology，HuangzhongAgricatu

4、ralUniversityWuhan430070China2.TechnologyCenterofChinaTobaccoHubeiIndustrialCO.LTDWuhan430051China3.WuhanHuanghelouNaturalFlavoursCO.LTDWuhan430040ChinaAbstract：Frecyclingtobaccofragmentsthetechniqueabouttobaccoextractfr

5、omtobaccofragmentswithneutralproteinasewasstudied.TheenzymetreatmentconditionswereoptimizedincludingpHregulatenzymeconcentrationtreatmenttemperaturetreatmenttime.Theoptimalconditionswereasfollows:theextractpHregulatwas1m

6、olLsodiumhydroxide6.0gLneutralproteinase40℃f4h.Comparedtothecontroltheenzymaticextractcouldameliatestateofthesmokereduceitsthrillhangover.Itsfreeaminoacidcontentwassteppedup211.1%316.7%reducesugarcontentwereimprovedof8.0

7、%8.8%whiletheproteincontentwasreducedby11.2%43.0%.Thecontentsofitsaromacompoundwithringlikestructuresuchaspyranpyrrowereincreasedof5.5%whilethecontentsofitsmacromoleculecompoundssuchasmellowparaffinwasreducedby45.5%nicot

8、inweredecreasedof5.5%.Keywds:TobaccoFragmentsTobaccoExtractNeutralProteinaseGCMSAnalysis作者簡介作者簡介：龐登紅（1983），男，重慶潼南人，華中農業(yè)大學微生物國家重點實驗室發(fā)酵工程在讀碩士，主要從事生物技術制備煙用香精香料的開發(fā)研究工作。通訊作者：陳守文（1968），男，湖北黃石人，教授，博士生導師，主要從事微生物發(fā)酵的研究。Email:.圖1煙葉

9、碎片浸膏的制備工藝流程煙葉碎片浸膏的制備工藝流程Figure1Thetechniqueflowtoftobaccofragmentextract1.2.2煙草浸膏的評吸評價煙草浸膏的評吸評價準確稱取0.04g煙草浸膏至5ml小燒杯，加1.60g蒸餾水稀釋，用喉頭噴霧器均勻噴灑于40g五元空白煙絲，裝入封口袋，吹氣使封口袋鼓起，將袋口封住，放在烘箱中80℃烘0.5h，打煙給專業(yè)評吸人員評吸。評吸打分參照鄭州煙草院單體香精作用評價原始記錄表

10、。評分表格如下：表1煙草浸膏評吸表煙草浸膏評吸表Table1Thesensesomokingtableofthetobaccoextract香氣特征煙氣特征口感特征樣品香氣質香氣量雜氣透發(fā)性勁頭濃度細膩柔和程度刺激程度干燥程度回甜余味總分上表中每一評分項目的分值從1.0到5.0，每0.5分一個檔次。評吸時對每一項進行打分，最后算其總分。1.2.3還原糖、蛋白質和氨基酸測定還原糖、蛋白質和氨基酸測定采用DNS法測定還原糖含量、茚三酮比色法

11、測定游離氨基酸含量，考馬氏亮藍法測定蛋白質的含量[8]。取100g煙葉碎片，按1.2.1工藝制備煙葉碎片提取物，并測定酶法處理前后煙葉碎片提取物的蛋白質、氨基酸和還原糖的含量。100g煙葉碎片和煙葉碎片和1500ml自來水自來水裝入裝入2000ml燒瓶燒瓶電熱套回流提取電熱套回流提取3h冷卻、紗布過濾冷卻、紗布過濾調節(jié)調節(jié)pH值中性蛋白酶處理中性蛋白酶處理80℃濃縮至濃縮至100g煙草浸膏粗品煙草浸膏粗品3倍質量倍質量95%酒精溶液處理