糞便細菌學規(guī)范

1、糞便細菌學檢驗操作規(guī)范糞便細菌學檢驗操作規(guī)范實驗室常規(guī)檢查是細菌培養(yǎng)，沙門氏菌、志賀氏菌、鄰單胞菌實驗室常規(guī)檢查是細菌培養(yǎng)，沙門氏菌、志賀氏菌、鄰單胞菌和氣單胞菌、副溶血性弧菌、致瀉性大腸桿菌作為實驗室常規(guī)培養(yǎng)和氣單胞菌、副溶血性弧菌、致瀉性大腸桿菌作為實驗室常規(guī)培養(yǎng)的主要腹瀉病原菌。的主要腹瀉病原菌。一、標本采集與運送：、標本采集與運送：1標本采集標本采集（1）標本采集盡可能在發(fā)病早期和應用抗菌藥物治療之前。在不同）標本采集盡可能在發(fā)

2、病早期和應用抗菌藥物治療之前。在不同的時間采集的時間采集2~3份標本可以提高致病菌的分離率。份標本可以提高致病菌的分離率。（2）自然排便采集糞便標本時，取有膿血、粘液、組織碎片部分的）自然排便采集糞便標本時，取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便糞便1～3g。液體糞便則取絮狀物，一般取。液體糞便則取絮狀物，一般取1～3ml，直接裝入糞便，直接裝入糞便容器或保存液或運送培養(yǎng)基中送檢。容器或保存液或運送培養(yǎng)基中送檢。（3）直腸拭子采集糞便標本，

3、檢查帶菌者時可以采取肛拭（棉拭先）直腸拭子采集糞便標本，檢查帶菌者時可以采取肛拭（棉拭先用保存液或增菌培養(yǎng)基濕潤）用保存液或增菌培養(yǎng)基濕潤），深入肛門內，深入肛門內7~10cm除采樣，不能及除采樣，不能及時接種時，應將標本放入保存液內。時接種時，應將標本放入保存液內。(4)容器應清潔、帶蓋、廣口的（不宜使用紙盒）容器應清潔、帶蓋、廣口的（不宜使用紙盒）、送檢的標本中不、送檢的標本中不能加入防腐劑。能加入防腐劑。2標本運送標本運送（1）糞

4、便標本應盡快送檢，室溫條件下不能超過）糞便標本應盡快送檢，室溫條件下不能超過2h。如不能及時。如不能及時送檢可加入送檢可加入pH7.0的磷酸鹽甘油或轉運培養(yǎng)基，但不宜超過的磷酸鹽甘油或轉運培養(yǎng)基，但不宜超過24h。使用改良使用改良CaryBlair培養(yǎng)基時，不能運送培養(yǎng)志賀氏菌的標本。培養(yǎng)基時，不能運送培養(yǎng)志賀氏菌的標本。（2）直腸拭子采集的標本必須置入運送培養(yǎng)基或）直腸拭子采集的標本必須置入運送培養(yǎng)基或GN肉湯中送檢，肉湯中送檢，轉運

5、時間不宜超過轉運時間不宜超過2h。1腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)對患者糞便標本進行腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)，包括沙門氏菌、志賀氏對患者糞便標本進行腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)，包括沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉性大腸桿菌、鄰單胞菌、氣單胞菌，致病性弧菌。此外，菌、致瀉性大腸桿菌、鄰單胞菌、氣單胞菌，致病性弧菌。此外，也包括可引起菌群失調的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和酵母菌。也包括可引起菌群失調的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和酵母菌。糞便標本至少應接

6、種血平皿、糞便標本至少應接種血平皿、HE（XLD或SS）、EMB（或（或MAC或中國蘭）等培養(yǎng)基。沿海地區(qū)還需增加或中國蘭）等培養(yǎng)基。沿海地區(qū)還需增加TCBS瓊脂培養(yǎng)基。瓊脂培養(yǎng)基。補充說明：補充說明：（1）SS培養(yǎng)基對部分志賀氏菌有抑制作用。培養(yǎng)基對部分志賀氏菌有抑制作用。（2）常用的腸道選擇性培養(yǎng)基（如）常用的腸道選擇性培養(yǎng)基（如SS等）對氣單胞菌、鄰單胞菌等）對氣單胞菌、鄰單胞菌有抑制作用，初次分離時應接種血平皿和有抑制作用，初次

7、分離時應接種血平皿和MAC。（3）若用）若用EMB（伊紅美蘭）（伊紅美蘭）、MAC（麥康凱）等培養(yǎng)基培養(yǎng)后，（麥康凱）等培養(yǎng)基培養(yǎng)后，未檢出常見致病菌，但感染性腹瀉癥狀明顯，可重新采集糞便標本未檢出常見致病菌，但感染性腹瀉癥狀明顯，可重新采集糞便標本接種接種GN肉湯，肉湯，35℃培養(yǎng)培養(yǎng)46h，再轉種，再轉種HE（腸道瓊脂）等培養(yǎng)基，（腸道瓊脂）等培養(yǎng)基，進一步分離培養(yǎng)。進一步分離培養(yǎng)。（4）如懷疑沙門氏菌感染，可先用）如懷疑沙門氏菌感

8、染，可先用SF肉湯（亞硒酸鹽增軍液）肉湯（亞硒酸鹽增軍液），以提高檢出率。以提高檢出率。（5）正常人體腸道內可以存在金黃色葡萄球菌，因此只有每克糞便）正常人體腸道內可以存在金黃色葡萄球菌，因此只有每克糞便細菌數(shù)達到細菌數(shù)達到105CFU時才有臨床意義。時才有臨床意義。（6）氣單胞菌能夠在常規(guī)的鑒別培養(yǎng)基如）氣單胞菌能夠在常規(guī)的鑒別培養(yǎng)基如MAC和EMB上生長，上生長，但選擇性培養(yǎng)基更有助于檢出氣單胞菌。選擇性培養(yǎng)基：每但選擇性培養(yǎng)基更有