細(xì)菌學(xué)各論ppt課件

1、細(xì)菌學(xué)各論了解各種細(xì)菌的形態(tài)、培養(yǎng)特性、致病因子及微生物學(xué)診斷。第七章革蘭氏陽(yáng)性球菌第一節(jié)葡萄球菌屬第二節(jié)鏈球菌屬第三節(jié)腸球菌屬淋球菌、腦膜炎球菌陽(yáng)性陰性第一節(jié)葡萄球菌屬（Staphylococcus）廣泛存在于自然界，多數(shù)是不致病的腐物寄生菌。致病性葡萄球菌可引起化膿性炎癥、敗血癥、食物中毒等。第一節(jié)葡萄球菌屬（Staphylococcus）球形，排列成葡萄串狀。用青霉素可誘導(dǎo)成L型。無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛，有的形成莢膜或黏液層。革蘭氏陽(yáng)性。

2、需氧或兼性厭氧，無(wú)運(yùn)動(dòng)力。一般特征?過(guò)去按產(chǎn)生的色素分為3種：金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、檸檬色葡萄球菌。?1974年分為3種：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。?《伯吉氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》1986年將葡萄球菌屬分為20多種。二、分類常見的致病菌多為金黃色葡萄球菌。金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）1.培養(yǎng)及生化特性在普通瓊脂平板形成濕潤(rùn)、光滑、隆起的圓形菌落。菌落顏色依菌株而異，初呈灰白色，繼而為金黃

3、色。在血液瓊脂平板形成的菌落較大，產(chǎn)溶血素的菌株多為病原菌，在菌落周圍呈現(xiàn)明顯的β溶血。產(chǎn)生金黃色色素。高度耐鹽。分解葡、乳、麥、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，致病菌株能分解甘露醇。第一節(jié)葡萄球菌屬（Staphylococcus）金黃色葡萄球菌普通培養(yǎng)基上菌落形態(tài)金黃色葡萄球的β溶血高鹽培養(yǎng)基2.抗原及變異葡萄球菌細(xì)胞壁上的抗原構(gòu)造比較復(fù)雜，含有多糖及蛋白質(zhì)兩類抗原。多糖抗原莢膜多糖，具有型特異性。蛋白抗原人源菌株都含有葡萄球菌蛋白A(SPA)，來(lái)

4、自動(dòng)物源菌株則少見。SPA能與多種動(dòng)物的免疫球蛋白的Fc端結(jié)合，結(jié)合后的IgG仍能與相應(yīng)抗原特異性反應(yīng)。SPA與IgG結(jié)合形成的復(fù)合物在機(jī)體內(nèi)具有生物學(xué)作用（趨化性、抵抗吞噬、損傷血小板等）。用于免疫學(xué)及診斷技術(shù)（協(xié)同凝集試驗(yàn)）。3.抵抗力及藥物敏感性在無(wú)芽孢菌中，葡萄球菌的抵抗力較強(qiáng)。在干燥的膿汁或血液中可存活23個(gè)月，80℃30min才能殺死。對(duì)磺胺類、青霉素、金霉素、紅霉素、新霉素等抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。4.致病性及毒力因子

5、金色葡萄球菌可產(chǎn)生多種毒素和酶，故致病性強(qiáng)?；撔约膊。▌?chuàng)傷感染、膿腫、乳腺炎、敗血癥、膿毒敗血癥等）毒素性疾?。ū黄咸亚蚓廴镜氖澄锘蝻暳峡梢鹑嘶騽?dòng)物的食物中毒性疾?。?。毒力因子：α毒素α溶血素，與牛羊的壞疽性乳腺炎有關(guān)，它還導(dǎo)致白細(xì)胞等崩解。α毒素是不耐熱的蛋白質(zhì)，對(duì)多種哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞有溶血作用，而從動(dòng)物分離的菌株常見β溶血素。腸毒素引致人類食物中毒，表現(xiàn)嘔吐、腹瀉。耐熱抗酸，能經(jīng)受100℃30min或胃蛋白酶的水解。凝固酶能使含

6、有抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝集的酶類物質(zhì)。（1）游離凝固酶:使液態(tài)纖維蛋白原變成固態(tài)纖維蛋白。（2）結(jié)合凝固酶:使纖維蛋白原與菌體交聯(lián)而致細(xì)菌凝聚。作用：有助于致病菌株抵抗吞噬細(xì)胞和殺菌物質(zhì)。檢測(cè)葡萄球菌的凝固酶是鑒別菌株的重要指標(biāo)，致病株多數(shù)為凝固酶陽(yáng)性。耐熱核酸酶100℃作用15min不失去活性，由致病株產(chǎn)生。此酶能迅速分解核酸，利于病菌擴(kuò)散。目前將該酶的檢測(cè)作為鑒定致病菌株的重要指標(biāo)值之一。此外，還可產(chǎn)生溶纖維蛋白酶、透明質(zhì)酸酶，又

7、稱為擴(kuò)散因子。金黃色葡萄球的耐熱核酸酶試驗(yàn)5.微生物學(xué)診斷（1）涂片染色鏡檢取膿汁、滲出液、乳汁、血液，中毒癥取剩余食物等。將病料涂片染色鏡檢。（2）分離培養(yǎng)鑒定將病料劃線接種于5％綿羊或兔血液瓊脂平板，37℃培養(yǎng)1824h，菌落金黃色，周圍呈溶血圈者多為致病菌株。進(jìn)一步鑒定還要做凝固酶試驗(yàn)、分解甘露醇試驗(yàn)，陽(yáng)性者多為致病菌。必要時(shí)可做動(dòng)物試驗(yàn)。第二節(jié)鏈球菌屬(Streptococcus)鏈球菌種類多、分布廣。有些可致人或動(dòng)物的各種化膿

8、性疾病、肺炎、乳腺炎、敗血癥等。一、分類按溶血性分為α、β、γ3類。α型溶血鏈球菌在菌落周圍形成不透明的草綠色溶血環(huán)，紅細(xì)胞未完全溶解，血紅蛋白變成綠色。此菌致病力不強(qiáng)，多為機(jī)會(huì)致病菌。β型溶血鏈球菌菌落周圍形成完全透明的溶血環(huán)，紅細(xì)胞完全溶解。這類菌致病力強(qiáng)，常引起人及動(dòng)物各種疾病。γ型溶血鏈球菌菌落周圍無(wú)溶血現(xiàn)象。一般為非致病菌。二、形態(tài)與染色鏈球菌呈圓形或卵圓形，常排列成鏈狀或成雙。肉湯內(nèi)生長(zhǎng)的鏈球菌常呈長(zhǎng)鏈排列，革蘭氏陽(yáng)性，多有

9、莢膜。三、培養(yǎng)及生化特性多為兼性厭氧菌。致病菌營(yíng)養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。在血液瓊脂平板上長(zhǎng)成直徑0.11.0mm，灰白色，表面光滑，邊緣整齊的小菌落。多數(shù)致病菌株有溶血性?；撔枣溓蚓胀ㄅ囵B(yǎng)基上菌落形態(tài)四、致病性致病性鏈球菌可產(chǎn)生多種毒素或酶，可致人及多種動(dòng)物的很多疾病，化膿感染、肺炎、乳房炎等。溶血素分為對(duì)氧敏感溶血素O(SLO)和對(duì)氧穩(wěn)定溶血素S(SLS)兩種，稱溶血性。致熱外毒素舊名紅疹毒素

10、，主要由A群鏈球菌產(chǎn)生，致人猩紅熱，小劑量皮內(nèi)注射家兔可引起局部紅疹，大劑量注射可致全身紅疹。其他不同致病菌株，可產(chǎn)生鏈激酶（溶纖維蛋白酶），透明質(zhì)酸酶等，其性質(zhì)作用類葡萄球菌。細(xì)胞壁脂磷壁酸(LFA)與菌體吸附于宿主黏膜有關(guān)。其莢膜成分、M蛋白等具有抗吞噬作用。五、抵抗力本屬細(xì)菌的抵抗力不強(qiáng)。對(duì)青霉素、磺胺類藥物敏感，易產(chǎn)生耐藥性。六、免疫性鏈球菌的抗原結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，機(jī)體感染后有多種抗體產(chǎn)生，已知抗M蛋白的抗體具有保護(hù)作用，M蛋白有多

11、種抗原型，各型間缺乏有效的交叉保護(hù)。我國(guó)研制的豬、羊鏈球菌疫苗有較好的免疫效果。七、微生物學(xué)診斷病料（膿汁、乳汁、血液、組織）涂片染色鏡檢，見革蘭氏陽(yáng)性、具莢膜、成對(duì)或鏈狀排列的球菌，可作初步診斷。確診需用血液瓊脂平板分離培養(yǎng)，觀察菌落、溶血等特征，并進(jìn)行生理生化試驗(yàn)。用群、型特異性血清作血清學(xué)試驗(yàn)，對(duì)病原菌定群或定型。蘭氏（Lancefield）用溫?zé)岬南←}酸浸出C抗原，與特異性血清作沉淀反應(yīng)，將鏈球菌分為20個(gè)血清群（AV，缺I和J

12、）。同群鏈球菌間，因表面蛋白質(zhì)抗原不同，又分不同型。蘭氏分群法乳膠凝集試驗(yàn)八、主要致病菌豬鏈球菌是豬鏈球菌病的重要致病菌，并可感染人而致死。(一)病原1.鏈球菌共有20個(gè)群(從AV)，數(shù)百個(gè)血清型，主要感染人類的是A.B群和肺炎鏈球菌；主要感染豬的有D.L.R.S.T.U.V群2.豬溶血性鏈球菌2型(Swinestreptoo_cosis)3.鏈球菌為G球菌成對(duì)、短鏈狀排列(二)傳播途徑1.主要經(jīng)過(guò)破損皮膚傳播:屠宰、加工、飼養(yǎng)、販運(yùn)感

13、染病死豬過(guò)程中通過(guò)破損皮膚接觸感染豬2型鏈球菌。2.消化道輔助:食入沒(méi)有煮爛熟透的病死豬肉感染。(三)臨床表現(xiàn)1.普通型表現(xiàn):急起高熱、畏寒、頭痛、頭昏、腹痛、腹瀉、乏力、不適。2.可致豬腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎、多發(fā)性漿膜炎、流產(chǎn)和局部膿腫。第八章腸桿菌科第一節(jié)埃希菌屬第二節(jié)沙門菌屬第三節(jié)耶爾森菌屬第四節(jié)其他腸道桿菌屬(克雷伯菌屬、變形桿菌屬、愛(ài)德華菌屬)本科共同特性為：革蘭氏陰性、無(wú)芽孢的兼性厭氧菌。共28屬、110種。多為正常腸道

14、菌群成員。沙門氏菌屬、埃希菌屬和耶爾森菌屬的部分成員對(duì)人和動(dòng)物有廣泛的致病性，在公共衛(wèi)生和獸醫(yī)臨床有重要意義。第一節(jié)埃希菌屬(Escherichia)本屬現(xiàn)有8個(gè)種，其中最重要的種是大腸埃希菌(E.coli)，俗稱大腸桿菌，下分血清型。本菌系人和溫血?jiǎng)游锬c道內(nèi)正常菌群成員之一。大腸桿菌常被用作糞便直接或間接污染的檢測(cè)指標(biāo)。本菌還是分子生物學(xué)和基因工程中重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對(duì)象。一、形態(tài)染色特性大腸桿菌為革蘭氏陰性無(wú)芽孢的桿菌，兩端鈍圓、

15、散在，周生鞭毛可運(yùn)動(dòng)，多有菌毛。E.coli伊紅美藍(lán)瓊脂上呈金屬綠色E.coli麥康基瓊脂上呈粉紅色菌落二、培養(yǎng)及生化特性本菌為兼性厭氧菌，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，形成圓形凸起、光滑、濕潤(rùn)、半透明、灰白色菌落；本菌大多可以發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，麥康凱瓊脂上形成紅色菌落；在伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬閃光的菌落；一些致病性菌株在綿羊血平板上呈β溶血。二、培養(yǎng)及生化特性致病菌株在綿羊血平板上呈β型溶血；生化特性：糖發(fā)酵試驗(yàn)（發(fā)酵乳糖）和IMVi

16、C（）試驗(yàn)。H2S陰性。三糖鐵培養(yǎng)基I(吲哚)、M（MR）、Vi（VP)、C（枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)）三、抗原及血清型四、致病性條件性大腸桿菌、病原性大腸桿菌。與動(dòng)物疾病有關(guān)的病原性大腸桿菌可分為五類：產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)腸出血性大腸桿菌(EHEC)腸致病性大腸桿菌(EPEC)腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)腸聚集型大腸桿菌(EAEC)五、微生物學(xué)診斷分離與鑒定程序可參見圖81。(PAGE106)1.采病料分離培養(yǎng)敗血癥病例采集內(nèi)臟組織（

17、肝脾腎等），對(duì)幼畜腹瀉及豬水腫病病例應(yīng)取其各段小腸內(nèi)容物或黏膜刮取物以及相應(yīng)腸段的腸系膜淋巴結(jié)，分別在麥康凱平板和血平板上劃線分離培養(yǎng)。2.可疑菌落生化鑒定挑取麥康凱平板上的紅色菌落或血平板上呈β溶血(仔豬黃痢與水腫病菌株)的典型菌落幾個(gè)，分別轉(zhuǎn)種三糖鐵（TSI）培養(yǎng)基和普通瓊脂斜面做初步生化鑒定和純培養(yǎng)。3.純培養(yǎng)物抗原鑒定將TSI瓊脂反應(yīng)模式符合埃希氏菌屬的生長(zhǎng)物或其相應(yīng)的普通斜面純培養(yǎng)物做O、K抗原鑒定。4.檢測(cè)毒力因子確定其屬于

18、何類致病性大腸桿菌。六、防治目前已有菌苗，包括抗粘附素的含單價(jià)或多價(jià)菌毛抗原的滅活全菌苗或亞單位苗；抗腸毒素的類毒素苗；表達(dá)一種或兩種粘附素以及同時(shí)表達(dá)粘附素和腸毒素的基因工程菌苗等。用這些菌苗免疫懷孕母畜后，均能使其后代從初乳中獲得抗體而被動(dòng)保護(hù)。第二節(jié)沙門氏菌屬(Salmonella)一、主要特征沙門氏菌屬是一群革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，通常都以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)。在三糖鐵瓊脂上常產(chǎn)生H2S，大多沙門氏菌不發(fā)酵乳糖。絕大多數(shù)沙門氏菌對(duì)人和動(dòng)物

19、有致病性，能引起人和動(dòng)物的多種不同臨床表現(xiàn)的沙門氏菌病，并為人類食物中毒的主要病原之一，在醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)和公共衛(wèi)生上均十分重要。沙門氏菌血清型復(fù)雜，有2500種以上。一、形態(tài)及染色特性形態(tài)染色特性與同科其他菌屬相似，呈桿狀，0.71.5umX2.05.0um，革蘭氏陰性。除雛沙門氏菌和雞沙門氏菌無(wú)鞭毛不運(yùn)動(dòng)外，其余均有周生鞭毛可運(yùn)動(dòng)，大多數(shù)有菌毛。二、培養(yǎng)及生化特性本屬大多數(shù)細(xì)菌的培養(yǎng)特性與埃希氏菌屬相似。沙門氏菌在肉湯瓊脂上生長(zhǎng)貧瘠，形成

20、較小的菌落。在腸道菌鑒別或選擇性培養(yǎng)基上，大多數(shù)菌株因不發(fā)酵乳糖而形成無(wú)色菌落。SalmonellaonS.S.AgarSalmonellaon麥康基瓊脂上為無(wú)色菌落三、抗原及變異四、致病性類型根據(jù)對(duì)宿主嗜性不同，可將沙門氏菌分成三群。第一群具有高度專嗜性沙門氏菌，它們只對(duì)人或某種動(dòng)物產(chǎn)生特定的疾病。例如雞白痢和雞傷寒沙門氏菌僅使雞和火雞發(fā)病，馬流產(chǎn)、牛流產(chǎn)和羊流產(chǎn)等沙門氏菌；豬傷寒沙門氏菌僅侵害豬。第二群是在一定程度適應(yīng)于特定動(dòng)物的偏

21、嗜性沙門氏菌，如豬霍亂和都柏林沙門氏菌，分別是豬和牛羊的致病菌。第三群是泛嗜性沙門氏菌，它們有廣泛宿主譜，能引起人和各種動(dòng)物的沙門氏菌病，具有重要的公共衛(wèi)生意義。如鼠傷寒和腸炎沙門氏菌等。六、毒力因子沙門氏菌毒力因子有多種，主要有脂多糖(LPS)、腸毒素、細(xì)胞毒素及毒力基因。七、免疫性體液抗體與細(xì)胞免疫在抗沙門氏菌感染中都很重要。認(rèn)為細(xì)胞免疫在抗沙門氏菌感染中具有重要作用。八、微生物學(xué)診斷未污染病料直接接種普通瓊脂、血瓊脂或鑒別培養(yǎng)基平

22、板分離細(xì)菌；污染材料如飲水、糞便、飼料、腸內(nèi)容物和已敗壞組織等，常需要增菌培養(yǎng)基增菌后再行分離。九、防制目前的疫苗多限于預(yù)防各種家畜特有的沙門氏菌病，例如豬副傷寒、馬流產(chǎn)以及牛、羊的都柏林等沙門氏菌的滅活菌苗。第三節(jié)耶爾森菌屬(Yersinia)本菌屬由革蘭氏陰性、運(yùn)動(dòng)或不運(yùn)動(dòng)的多形性短小桿菌組成。除鼠疫菌無(wú)鞭毛外，其余成員在2228℃培養(yǎng)時(shí)有動(dòng)力，但37℃培養(yǎng)則無(wú)動(dòng)力。代表菌種為鼠疫耶爾森菌，簡(jiǎn)稱鼠疫桿菌。本菌屬現(xiàn)有11個(gè)種，對(duì)人和動(dòng)

23、物有致病性的主要有三個(gè)種：鼠疫耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌。耶爾森菌電鏡照片第九章弧菌科（Vibrionaceae）第一節(jié)弧菌屬第二節(jié)氣單胞菌屬第一節(jié)弧菌屬（Vibrio）副溶血性弧菌本菌具嗜鹽性，存在于海產(chǎn)品，人食用污染本菌的魚、貝類引致食物中毒。一、形態(tài)及培養(yǎng)特性菌體多形性，可為弧狀、桿狀或絲狀。一端有鞭毛，革蘭氏染色陰性。菌落中等大小，培養(yǎng)24h時(shí)直徑約2mm。嗜Na，可在含7.5％NaCl的培養(yǎng)基生長(zhǎng)。亞洲霍亂分

24、離的逗點(diǎn)狀弧菌二、致病性本菌的致病株絕大多數(shù)能產(chǎn)生溶血毒素，裂解人、兔等紅細(xì)胞，因此可用溶血反應(yīng)區(qū)分致病株與非致病株，稱之為神奈川試驗(yàn)。人食用本菌污染的海魚、貝類等常引致食物中毒，潛伏期236h，表現(xiàn)為水樣腹瀉、嘔吐及發(fā)熱，一般能很快康復(fù)。近年來(lái)從我國(guó)人工養(yǎng)殖發(fā)病死亡的海魚、貝類等也分離到本菌。三、微生物學(xué)診斷取病人糞便或可疑食品接種嗜鹽菌選擇培養(yǎng)基或SS平板。挑取可疑菌落進(jìn)一步作生化試驗(yàn)，最后檢測(cè)其毒素作神奈川試驗(yàn)等，也可用PCR等技

25、術(shù)在基因水平檢測(cè)毒素。第二節(jié)氣單胞菌屬（Aeromonas）本屬一些種類細(xì)菌對(duì)魚類、禽類、哺乳動(dòng)物及人類有致病性，是魚類最常見的致病菌。類志賀氣單胞菌氣單胞菌引起的魚病第十章巴氏桿菌科及相關(guān)屬第一節(jié)巴氏桿菌屬第二節(jié)曼氏桿菌屬第三節(jié)里氏桿菌屬第四節(jié)放線桿菌屬第五節(jié)嗜血桿菌屬第六節(jié)泰勒菌屬第一節(jié)巴氏桿菌屬（Pasteurella）本屬細(xì)菌已報(bào)道有20多種，多殺性巴氏桿菌是本屬中最重要的畜禽致病菌。多殺性巴氏桿菌本菌是引起多種畜禽巴氏桿菌病(

26、亦稱出血性敗血癥)的病原體，主要使動(dòng)物發(fā)生出血性敗血病或傳染性肺炎。一、形態(tài)及染色為球桿狀或短桿狀菌，兩端鈍圓，大小為0.250.4um0.52.5um。單個(gè)存在，有時(shí)成雙排列。病料涂片用瑞氏染色或美藍(lán)染色時(shí)，可見典型的兩極著色，即菌體兩端染色深中間淺，無(wú)鞭毛，不形成芽孢，新分離的強(qiáng)毒菌株有莢膜。革蘭氏染色陰性。二、培養(yǎng)及生化特性需氧或兼性厭氧菌。對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較嚴(yán)格。在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘠，在麥康凱培養(yǎng)上不生長(zhǎng)。在加有血液、血清或微量血紅

27、素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好。最適溫度為37℃，pH7.27.4。在血清瓊脂乎板上培養(yǎng)24h，可長(zhǎng)成淡灰白色、閃光的露珠狀小菌落。在血瓊脂平板上，長(zhǎng)成水滴樣小菌落，無(wú)溶血現(xiàn)象。多殺性巴氏桿菌血瓊脂平板培養(yǎng)菌落形態(tài)三、血清型本菌主要以其菌體抗原和莢膜抗原區(qū)分血清型，前者有6個(gè)型，后者分為16個(gè)型。我國(guó)分離的禽多殺性巴氏桿菌以5:A為多，其次為8:A。四、抵抗力本菌抵抗力不強(qiáng)。在陽(yáng)光中暴曬1min，或在56℃15min或℃60℃10min，可被殺死

28、。廄肥中可存活1個(gè)月，埋入地下的病死雞尸，經(jīng)4個(gè)月仍殘留活菌。在空氣干燥中23d可死亡。對(duì)青霉素、鏈霉素、磺胺類及許多新的抗菌藥物敏感。凍干菌種在低溫中可保存長(zhǎng)達(dá)26年。五、致病性與免疫性本菌是多種動(dòng)物的重要病原菌。對(duì)雞、鴨、鵝、野禽，豬、牛、羊、馬、兔等都可致病，急性型呈出血性敗血癥迅速死亡；亞急性型呈出血性炎癥見于黏膜關(guān)節(jié)等部位；慢性型呈萎縮性鼻炎(豬、羊)、關(guān)節(jié)炎及局部化膿性炎癥等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中小鼠極易感染?？芍虑莼魜y、豬肺疫等病。

29、D血清型的某些菌株能產(chǎn)生一種耐熱的外毒素，用此毒素接種豬可復(fù)制典型的豬萎縮性鼻炎(AR)，證明AR由產(chǎn)毒素的本菌與波氏桿菌混合感染所致，本菌起主導(dǎo)作用。殺禽亞種的致病力與其內(nèi)毒素有關(guān)，可致禽霍亂，表現(xiàn)出血性敗血癥狀。動(dòng)物患病痊愈后，可獲得較強(qiáng)的免疫。國(guó)內(nèi)外已研制出多種滅活、弱毒菌苗。該菌的高免多價(jià)血清具有良好的緊急預(yù)防和治療作用。六、微生物學(xué)診斷1顯微鏡檢查采取滲出液、心血、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓等新鮮病料涂片或觸片，以堿性美藍(lán)液或瑞氏染

30、色液染色，顯微鏡檢查，如發(fā)現(xiàn)典型的兩極著色的短桿菌，結(jié)合流行病學(xué)及剖檢，可作初步診斷。2分離培養(yǎng)用血瓊脂平板和麥康凱瓊脂同時(shí)進(jìn)行分離培養(yǎng)，麥康扎培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，在血瓊脂上生長(zhǎng)良好，菌落不溶血，革蘭氏染色為陰性球桿菌。必要時(shí)進(jìn)一步做生化試驗(yàn)。3動(dòng)物試驗(yàn)用病料研磨制成懸液，或用分離培養(yǎng)菌，皮下注射小鼠、家兔或鴿，動(dòng)物多在24~48h內(nèi)死亡?？捎每寡寤騿慰寺】贵w進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)鑒定莢膜抗原和菌體抗原型。七、防治豬群檢測(cè)血清抗體，淘汰陽(yáng)性豬，建

31、立凈化豬群。雞豬均可注射滅活疫苗預(yù)防。也可用抗菌素防治。第十一章革蘭氏陰性需氧桿菌第一節(jié)布氏桿菌屬第二節(jié)假單胞菌屬第三節(jié)伯氏菌屬第四節(jié)波氏菌屬第五節(jié)軍團(tuán)菌屬第六節(jié)弗朗西斯菌屬第七節(jié)摩拉菌屬第八節(jié)不動(dòng)桿菌屬第一節(jié)布氏桿菌屬(Brucella)布氏桿菌又名布魯氏菌，是多種動(dòng)物和人布氏桿菌病的病原，不僅危害畜牧生產(chǎn)，而且危害人類健康。一、形態(tài)及染色特性細(xì)菌呈球形、球桿形或短桿形，新分離者趨向球形。0.50.7um0.61.5um，多單在。不形

32、成芽孢和莢膜，無(wú)鞭毛不運(yùn)動(dòng)，革蘭氏陰性。經(jīng)柯氏或改良ZN、改良K氏等鑒別染色法染成紅色，可與其他細(xì)菌相區(qū)別。布氏桿菌二、培養(yǎng)及生化特性此屬細(xì)菌專性需氧，在初代分離培養(yǎng)時(shí)尚需5％10％CO2。最適生長(zhǎng)溫度37℃，最適pH為6.67.4。血清和血液可促進(jìn)其生長(zhǎng)。三、種和生物型該屬包括6個(gè)種20個(gè)生物型，即馬爾他布氏桿菌生物型13、流產(chǎn)布氏桿菌生物型19、豬布氏桿菌生物型15、綿羊布氏桿菌、沙林鼠布氏桿菌和犬布氏桿菌。四、抗原性分為屬內(nèi)抗原與

33、屬外抗原，屬內(nèi)抗原包括A、M及R抗原等表面抗原。屬內(nèi)抗原：A抗原與M抗原其抗原決定簇位于細(xì)胞壁的脂多糖蛋白復(fù)合物上，為外露的多糖鏈部分。光滑型布氏桿菌具有A和M兩種表面抗原。R抗原為細(xì)胞壁低蛋白含量的脂多糖復(fù)合物，是大多數(shù)非光滑型布氏桿菌的共同抗原決定簇。五、變異性綿羊種和犬種布氏桿菌是天然的R型種，其他種為S型。布氏桿菌最常見的變異是SR變異，此種變異很少發(fā)生回變。六、抵抗力本菌對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)，在污染的土壤和水中可存活14個(gè)月

34、，皮毛24個(gè)月，乳、肉食品中約2個(gè)月，糞便中120d，流產(chǎn)胎兒中至少75d，子宮滲出物中200d。但對(duì)濕熱的抵抗力不強(qiáng)，60℃加熱30min或70℃5min即殺死，煮沸立即死亡。對(duì)消毒劑的抵抗力也不強(qiáng)。七、致病性本菌不產(chǎn)生外毒素，但有毒性較強(qiáng)的內(nèi)毒素。此內(nèi)毒素是細(xì)胞壁的脂多糖(LPS)成分。本屬細(xì)菌可感染的動(dòng)物種類極多，目前查知者已有60多種，包括馬、牛、豬、綿羊、山羊、駱駝、鹿、兔、犬等各種家畜、野生哺乳動(dòng)物、嚙齒動(dòng)物、鳥類、爬蟲類、

35、兩棲類和魚類。可引起人和多種動(dòng)物的布?。ㄗ訉m炎、輸卵管炎、睪丸炎、關(guān)節(jié)炎等），是一種重要的人獸共患病，病理過(guò)程慢長(zhǎng)，經(jīng)濟(jì)危害極大。布氏桿菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染，豚鼠最為易感。光滑型的流產(chǎn)布氏桿菌入侵機(jī)體黏膜屏障后，被吞噬細(xì)胞吞噬成為胞內(nèi)寄生菌，并在淋巴結(jié)生長(zhǎng)繁殖形成感染灶。一旦侵入血流，則出現(xiàn)菌血癥。在不同種別和生物型，甚至同型細(xì)菌的不同菌株之間，毒力可有相當(dāng)差異。對(duì)豚鼠致病性順序是馬爾他布氏桿菌≥豬布氏桿菌≥流產(chǎn)布氏桿

36、菌沙林鼠布氏桿菌≥犬布氏桿菌綿羊布氏桿菌。八、微生物學(xué)診斷布氏桿菌病常表現(xiàn)為慢性或隱性感染，其診斷和檢疫主要依靠血清學(xué)檢查及變態(tài)反應(yīng)檢查。1.細(xì)菌學(xué)檢查病料最好用流產(chǎn)胎兒的胃內(nèi)容物、肺、肝和脾以及流產(chǎn)胎盤和羊水等。也可采用陰道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宮、乳房、精囊、睪丸、附睪、淋巴結(jié)、骨髓和其他與局部病變的器官。顯微鏡檢查病料直接涂片，作革蘭氏和柯茲洛夫斯基染色鏡檢。若發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性、鑒別染色為紅色的球狀桿菌或短小

37、桿菌，即可作出初步的疑似診斷。分離培養(yǎng)鑒定無(wú)污染病料可直接劃線接種于適宜培養(yǎng)基，5％10％CO2環(huán)境，37℃培養(yǎng)。每3d觀察1次，如有細(xì)菌生長(zhǎng)，可挑選可疑菌落細(xì)菌鑒定。2.血清學(xué)檢查有多種檢查方法，血清中布氏桿菌抗體檢查和病料中布氏桿菌檢查兩類方法。檢測(cè)細(xì)菌用已知抗體可檢查病料中是否存在布氏桿菌，或分離培養(yǎng)物是否為布氏桿菌，比細(xì)菌學(xué)檢查法簡(jiǎn)便快速，因而具有較大實(shí)用價(jià)值。常用方法有熒光抗體技術(shù)、反向間接血凝試驗(yàn)、間接炭凝集試驗(yàn)以及免疫酶組

38、化法染色等。檢測(cè)抗體動(dòng)物在感染布氏桿菌715d可出現(xiàn)抗體，檢測(cè)血清中的抗體是布氏桿菌病診斷和檢疫的主要手段。在實(shí)際工作中，最好用一種以上的方法相互配合。國(guó)內(nèi)常用玻板凝集試驗(yàn)、虎紅平板凝集試驗(yàn)、乳汁環(huán)狀試驗(yàn)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)或牧區(qū)大群檢疫，以試管凝集試驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室最后確診。3變態(tài)反應(yīng)檢查皮膚變態(tài)反應(yīng)一般在感染后的20~25d出現(xiàn)，因此不宜作早期診斷。本法適于動(dòng)物的大群檢疫，主要用于綿羊和山羊，其次為豬。檢測(cè)時(shí)，將布氏桿菌水解素0.2m

39、1注射于羊尾根皺襞部或豬耳根部皮內(nèi)，24及48h后各觀察反應(yīng)一次。若注射部發(fā)生紅腫，即判為陽(yáng)性反應(yīng)。此法對(duì)慢性病例的檢出率較高，且注射水解素后無(wú)抗體產(chǎn)生，不妨礙以后扒血清學(xué)檢查。凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間各有特點(diǎn)。即動(dòng)物感染布氏桿菌后，首先出現(xiàn)凝集反應(yīng)，消失較早；其次出現(xiàn)補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)，消失較晚；最后出現(xiàn)變態(tài)反應(yīng)，保抖時(shí)間也較長(zhǎng)。為了徹底消除各類病畜，應(yīng)同時(shí)使用三種方法進(jìn)行綜合診斷。九、免疫防治菌苗接種雖有顯著效果，但欲根

40、除此病，則尚須嚴(yán)格執(zhí)行畜群全面檢疫及淘汰病畜的措施。已有的菌苗種類很多，我國(guó)創(chuàng)制和應(yīng)用的菌苗有羊型和豬型兩種弱毒菌苗。羊型5號(hào)(M5)弱毒活菌苗對(duì)牛、山羊、綿羊和鹿布氏桿菌病的預(yù)防沒(méi)果較好。采取皮下注射或氣霧方式，免疫期可達(dá)11.5年。其缺點(diǎn)為對(duì)懷孕動(dòng)物可致流產(chǎn)而禁用，對(duì)接觸氣霧的人員可引起較嚴(yán)重反應(yīng)。培育出M590株，具有良好的安全性和優(yōu)秀的免疫原性。豬型2號(hào)(S2)弱毒活菌苗毒力弱，生物性狀穩(wěn)定，免疫原性好，對(duì)豬、綿羊、山羊、牦牛、