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1、1檢驗(yàn)原始記錄編號(hào):報(bào)告類別:微生物共頁(yè)項(xiàng)目:大腸菌群colifms檢驗(yàn)地點(diǎn):樣品名稱:樣品編號(hào):樣品狀態(tài):符合檢驗(yàn)要求;其他環(huán)境條件:實(shí)驗(yàn)依據(jù)及步驟GB4789.32016固體和半固體樣品:稱取25g樣品置盛有225ml生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的無(wú)菌均質(zhì)容器內(nèi)均質(zhì),或放入盛有225ml稀釋液的無(wú)菌均質(zhì)袋中拍擊式均質(zhì)器拍打,制成為1:10樣品勻液。依次進(jìn)行10倍遞增稀釋。樣品稀釋液體樣品:以無(wú)菌吸管吸取25ml樣品置盛有225ml磷酸鹽緩
2、沖液或生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶(瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠)中混勻,為1:10樣品勻液。樣品勻液的ph應(yīng)在6.57.5之間,必要時(shí)分別用1mollNaOH或1mollHcL調(diào)節(jié)。取1mL1∶10稀釋勻液沿管壁緩緩注入9ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用一支無(wú)菌吸管反復(fù)吹打,使其混合均勻,制成1:100樣品勻液。按上述操作順序做10倍遞增稀釋液,每稀釋一次,換用一支1mL滅菌吸量管。
3、從樣品勻液制備到樣品接種完畢,全過(guò)程不得超過(guò)15min。初發(fā)酵試驗(yàn)(9管法)每個(gè)樣品,選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液(液體樣品可以選擇原液),每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯(大腸菌群測(cè)定:如果超過(guò)1ml,則用雙料LST肉湯)36℃1℃培養(yǎng)24h2h,觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生。產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn),未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至482h,產(chǎn)期進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)(證實(shí)試驗(yàn))用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST
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