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1、毛細(xì)管電泳的基本原理及應(yīng)用毛細(xì)管電泳的基本原理及應(yīng)用摘要摘要:毛細(xì)管電泳法是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動(dòng)力,依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。該技術(shù)可分析的成分小至有機(jī)離子、大至生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等??捎糜诜治龆喾N體液樣本如血清或血漿、尿、腦脊液及唾液等,比HPLC分析高效、快速、微量。關(guān)鍵詞:關(guān)鍵詞:毛細(xì)管電泳原理分離模式應(yīng)用1概述概述毛細(xì)管電泳(CaillaryElec
2、trophesis)簡稱CE,是一類以毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流場為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離分析技術(shù)。CE的歷史可以追溯到1967年瑞典Hjerten最先提出在直徑為3mm的毛細(xì)管中做自由溶液的區(qū)帶電泳(CapillaryZoneElectrophesis,CZE)。但他沒有完全克服傳統(tǒng)電泳的弊端[1]?,F(xiàn)在所說的毛細(xì)管電泳(CE)是由Jgenson和Lukacs在1981年首先提出,他們使用了75mm的毛細(xì)管柱,用熒光檢測器對多種組分實(shí)
3、現(xiàn)了分離。1984年Terabe將膠束引入毛細(xì)管電泳,開創(chuàng)了毛細(xì)管電泳的重要分支:膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜(MEKC)。1987年Hjerten等把傳統(tǒng)的等電聚焦過程轉(zhuǎn)移到毛細(xì)管內(nèi)進(jìn)行。同年,Cohen發(fā)表了毛細(xì)管凝膠電泳的工作。近年來,將液相色譜的固定相引入毛細(xì)管電泳中,又發(fā)展了電色譜,擴(kuò)大了電泳的應(yīng)用范圍。毛細(xì)管電泳和高效液相色譜(HPLC)一樣,同是液相分離技術(shù),因此在很大程度上HPCE與HPLC可以互為補(bǔ)充,但是無論從效率、速度、樣品
4、用量和成本來說,毛細(xì)管電泳都顯示了一定的優(yōu)勢毛細(xì)管電泳(CE)除了比其它色譜分離分析方法具有效率更高、速度更快、樣品和試劑耗量更少、應(yīng)用面同樣廣泛等優(yōu)點(diǎn)外,其儀器結(jié)構(gòu)也比高效液相色譜(HPLC)簡單。CE只需高壓直流電源、進(jìn)樣裝置、毛細(xì)管和檢測器。毛細(xì)管電泳具有分析速度快、分離效率高、試驗(yàn)成本低、消耗少、操作簡便等特點(diǎn),因此廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、材料學(xué)以及與化學(xué)有關(guān)的化工、環(huán)保、食品、飲料等各個(gè)領(lǐng)域[2]。在外電場作用下上述
5、陽離子會(huì)向陰極移動(dòng)。由于這些陽離子實(shí)際上是溶劑化的(水化的),它們將帶著毛細(xì)管中的液體一起向陰極移動(dòng),這就是CE中的電滲流(EOF)。電滲流的強(qiáng)度很高,以致于所有進(jìn)入毛細(xì)管中的樣品,不管是陰離子、陽離子或中性分子,都會(huì)隨著液體向陰極移動(dòng)。因待測樣品中正離子的電泳方向與電滲流方向一致,故最先到達(dá)毛細(xì)管的陰極端中性粒子的電泳速度為零遷移速度與電滲流速度相當(dāng);而負(fù)離子的電泳方向則與電滲流方向相反,但因電滲流速度約等于一般離子電泳速度的5~7倍
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