2018屆世紀(jì)金榜教師用書配套課件生物選修1.2

1、第2課　微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用,考點(diǎn)一　微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)核心知識(shí)回顧1.培養(yǎng)基：(1)概念：人們按照微生物對(duì)_________的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)種類：液體培養(yǎng)基和_____培養(yǎng)基，二者的區(qū)別是是否添加_______。,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),固體,凝固劑,(3)營(yíng)養(yǎng)成分：①確定原則：根據(jù)微生物的_____。②主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：_____、_____、水和無(wú)機(jī)鹽。③其他條件：pH、_________和氧氣。,

2、需要,碳源,氮源,特殊營(yíng)養(yǎng),2.無(wú)菌技術(shù)：(1)目的：獲得_____________。(2)關(guān)鍵：防止_________的入侵。(3)常用方法：_____和_____。,純凈的培養(yǎng)物,外來(lái)雜菌,滅菌,消毒,(4)無(wú)菌技術(shù)的主要方法及適用對(duì)象(連一連)：,,,,,,,,,,,,,3.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：,一定體積,稱量紙,稱量紙,蛋白胨,瓊脂,pH,高壓蒸汽,121℃,15～30,50℃,4.純化大腸桿菌：(1)原理：在培

3、養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成_____細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。,單個(gè),(2)主要方法及純化原理：,平板劃線,稀釋涂布平板,連續(xù)劃線,梯度稀釋,5.菌種的保藏方法：(1)臨時(shí)保藏法：對(duì)于_____使用的菌種，先接種到試管的_________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入__℃的冰箱中保藏。(2)甘油管藏法：對(duì)于需要_________的菌種，先將菌液轉(zhuǎn)入滅菌后的_____中，混勻后放在____℃冷凍箱中保存。

4、,頻繁,固體斜面,4,長(zhǎng)期保存,甘油,-20,【教材易漏邊角知識(shí)】選修1 P18“旁欄小資料”微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法嗎？微生物接種的核心是什么？______________________________________________________________________________________________。,不是，微生物的接種技術(shù)還包括斜面接種、穿刺接種,等方法，其核心是防止雜菌

5、污染，保證培養(yǎng)物的純度,【特別提醒】微生物培養(yǎng)的“三個(gè)提醒”(1)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的確定方法。①自養(yǎng)型微生物所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)機(jī)物，碳源可來(lái)自大氣中的CO2，氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。,②異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物，即碳源必須由含碳有機(jī)物提供，氮源也主要由有機(jī)物提供，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無(wú)機(jī)氮源。(2)選擇無(wú)菌技術(shù)的原則。①考慮無(wú)菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好。②考慮操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、

6、操作者的手等只能采用消毒，而不能滅菌。,(3)純化大腸桿菌的兩種方法的異同。①相同點(diǎn)：平板劃線法和稀釋涂布平板法都能獲得單細(xì)胞菌落。②不同點(diǎn)：平板劃線法不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法能對(duì)微生物計(jì)數(shù)。,高考角度全練角度1　微生物的培養(yǎng)1.(2016·全國(guó)卷Ⅰ)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：,①配制培

7、養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作無(wú)菌平板；③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。回答下列問題：　世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)77982217,回答下列問題：　世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)77982217(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于__________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是_________________________

8、______________。(2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是_____________________________________________________。,(3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36-6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________(填“正確”或“不正確”)。,【解

9、題指南】解答本題需要注意兩點(diǎn)：(1)明確培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分的來(lái)源。(2)理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c實(shí)驗(yàn)操作的對(duì)應(yīng)關(guān)系。,【解析】本題主要考查微生物培養(yǎng)。(1)微生物的生長(zhǎng)需要碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)基中的牛肉膏、蛋白胨為微生物的生長(zhǎng)既提供了碳源，也提供了氮源。微生物培養(yǎng)通常采用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，故題中X應(yīng)是瓊脂，在培養(yǎng)基中起凝固劑的作用。,(2)本實(shí)驗(yàn)的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況，應(yīng)選擇在不同的高度放置平板，使之暴露在

10、空氣中一段時(shí)間，以利于空氣中微生物的沉降。,(3)空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)組不應(yīng)出現(xiàn)菌落。產(chǎn)生了菌落說(shuō)明在此次實(shí)驗(yàn)中平板被污染。用實(shí)驗(yàn)組獲取的菌落數(shù)的平均值減去污染產(chǎn)生的菌落數(shù)作為實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，這種做法不正確，應(yīng)在防止污染的情況下重新實(shí)驗(yàn)，以獲得較準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。,答案：(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂(2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間(3)污染　不正確,【知識(shí)總結(jié)】培養(yǎng)基中的“碳源和氮源”比較,2.(2013·

11、全國(guó)卷Ⅱ)臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：　世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)77982218,(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用____________法或__________________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用__________法接種于固體培養(yǎng)基表面

12、，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。,(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A______________；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B____________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A,的小，說(shuō)明_____________________

13、____________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的____________________。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素__________。,【解題指南】解答本題注意兩個(gè)方面：(1)分離微生物方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強(qiáng)弱。,【解析】本題考查微生物接種和抗生

14、素抗菌能力判斷。(1)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，常用來(lái)分離微生物的方法是稀釋涂布(平板)法或平板劃線法。(2)為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布，一般用涂布法將微生物接種在培養(yǎng)基上。,(3)在抗藥性檢驗(yàn)過(guò)程中，如果在抗生素周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說(shuō)明此種抗生素可抑制該細(xì)菌生長(zhǎng)；透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強(qiáng)弱，據(jù)此可判斷A、B、C抗菌能力強(qiáng)弱依次是A、C、B；D的透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，說(shuō)明該菌落對(duì)此種抗生素具有耐藥性。,(4)實(shí)驗(yàn)

15、結(jié)果表明抗生素A對(duì)該致病菌的抗菌效果最好。答案：(1)平板劃線　稀釋涂布(平板)(或涂布)　(2)涂布(3)敏感　不敏感　該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱　耐藥菌　(4)A,角度2　無(wú)菌技術(shù)3.(2017·臨川模擬)牛奶中富含蛋白質(zhì)，長(zhǎng)期飲用有助于增強(qiáng)體質(zhì)，但牛奶同時(shí)也是多種疾病的傳播載體。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30 000個(gè)。以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。分析回答：,(1)圖中步驟①稱為________消毒法

16、。步驟②是______。,(2)培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供________。進(jìn)行步驟③操作時(shí)，應(yīng)選用下列中的哪種工具？__________________________。為了避免雜菌污染，此步驟應(yīng)在________附近進(jìn)行。,(3)為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作是否合格，應(yīng)該______________________________________。,【解析】(1)題圖中步驟①對(duì)牛奶進(jìn)行消毒采用了80℃、15 min恒溫水浴

17、加熱，這種消毒法稱為巴氏消毒法。根據(jù)題圖提供的信息可知，步驟②是系列稀釋或梯度稀釋。,(2)微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，有的微生物還需要特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如生長(zhǎng)因子和維生素等，蛋白胨主要為微生物提供碳源、氮源和維生素。進(jìn)行步驟③操作后需培養(yǎng)計(jì)數(shù)，因此該接種操作的方法是稀釋涂布平板法，應(yīng)選用B(涂布器)作為接種工具。為了避免雜菌污染，步驟③應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。,(3)為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作是否合格，應(yīng)該將一

18、個(gè)未接種的培養(yǎng)基作為對(duì)照組，與接種后的培養(yǎng)基共同培養(yǎng)。,答案：(1)巴氏　梯度稀釋　(2)碳源、氮源和維生素　B　酒精燈火焰　(3)將一個(gè)未接種的培養(yǎng)基與接種后的培養(yǎng)基共同培養(yǎng),【易錯(cuò)提醒】平板劃線法和稀釋涂布平板法是微生物接種的常用方法，但是平板劃線法只能純化微生物，而不能進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)。,【加固訓(xùn)練】1.(2017·西安模擬)某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落

19、觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。,(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細(xì)菌培養(yǎng)提供了碳源和氮源。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是__________和__________。(2)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種__________作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)。,(3)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的__

20、_______，這說(shuō)明湖水樣品中有多種細(xì)菌。一般來(lái)說(shuō)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越________(填“高”或“低”)。(4)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是________________，應(yīng)當(dāng)怎樣操作？_____________________________。,【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞：培養(yǎng)基的“基本成分”“形態(tài)和顏色”。(2)關(guān)鍵方法：接種無(wú)菌水的空白對(duì)照可以判斷培養(yǎng)基制作

21、是否合格。,【解析】(1)蛋白胨富含蛋白質(zhì)，主要為微生物提供氮源；淀粉主要為微生物提供碳源，培養(yǎng)基中還應(yīng)含有水和無(wú)機(jī)鹽。(2)微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即同時(shí)在另一平板上接種無(wú)菌水作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。,(3)培養(yǎng)20小時(shí)后，不同微生物在平板培養(yǎng)基上會(huì)形成形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，說(shuō)明湖水中的微生物數(shù)量越多，即湖水遭受細(xì)菌污染的程度越高。(4)培養(yǎng)基上的菌落

22、連成一片，最可能的原因是菌液濃度過(guò)高或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染，可以通過(guò)增大稀釋倍數(shù)或嚴(yán)格無(wú)菌操作解決。,答案：(1)無(wú)機(jī)鹽　水　(2)恒溫培養(yǎng)箱　無(wú)菌水(3)菌落　高(4)菌液濃度過(guò)高(或培養(yǎng)過(guò)程中被雜菌污染)　增大稀釋倍數(shù)(或嚴(yán)格無(wú)菌操作，原因與操作要對(duì)應(yīng)),2.(2017·安慶模擬)據(jù)報(bào)道，從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標(biāo)，“細(xì)菌門”事件引起公眾普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的

23、菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。某興趣小組欲檢測(cè)某果汁類食品中是否含有葡萄球菌，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。回答下列問題：,(1)配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)pH，分裝到錐形瓶后進(jìn)行____________，在無(wú)菌狀態(tài)下加入卵黃液搖勻后立即倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供_________。葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl溶液，所以在配制培養(yǎng)基時(shí)加

24、入高濃度的NaCl溶液可以將它分離出來(lái)，此培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。,(2)接種：取待檢測(cè)果汁2.5 mL加入22.5 mL滅菌生理鹽水中，制成接種樣液。①實(shí)驗(yàn)組：將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。,②對(duì)照組：將________________用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為______________對(duì)照。(3)培養(yǎng)：將上述接種后的培養(yǎng)皿同時(shí)放在36℃的恒溫箱中培養(yǎng)48 h。(

25、4)觀察：培養(yǎng)基表面__________________。,(5)結(jié)論。①若培養(yǎng)基上__________________，則該果汁類食品中含有葡萄球菌。②若培養(yǎng)基上__________________，則該果汁類食品中不含有葡萄球菌。,【解題指南】(1)關(guān)鍵信息：①葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。②接種樣液是用滅菌生理鹽水稀釋的。③對(duì)照組用平板劃線法接種無(wú)菌生理鹽水

26、。(2)必備知識(shí)：對(duì)照實(shí)驗(yàn)除自變量不同，其他均相同。,【解析】(1)培養(yǎng)基的制備流程：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供氮源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨可以為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供碳源、氮源和維生素。加入高濃度的NaCl溶液的培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)繁殖，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。,(2)比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組可知，實(shí)驗(yàn)的自變量為是否接種接種樣液。對(duì)照組接種無(wú)菌生理鹽水或不接種，為空白對(duì)照。

27、(4)根據(jù)題干關(guān)鍵信息“葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)”可知，觀察是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落可以判斷果汁中是否含有葡萄球菌。,(5)果汁中存在葡萄球菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落；果汁中不存在葡萄球菌時(shí)，培養(yǎng)基上不會(huì)出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落，因此可以根據(jù)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落判斷是否存在葡萄球菌。,答案：(1)滅菌(高壓蒸汽滅菌)　碳源、氮源、磷酸鹽和維生素　選擇

28、(2)②無(wú)菌生理鹽水　空白(4)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落(5)①出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落②不出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落,【方法技巧】判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合格的方法(1)從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2 d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。,(2)從接種操作是否符合無(wú)菌要求上判斷：①如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合接種菌菌落的特點(diǎn)，說(shuō)明接種操

29、作是符合要求的；②如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說(shuō)明接種過(guò)程中，無(wú)菌操作還未達(dá)到要求，需要分析原因，重新操作。,考點(diǎn)二　土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)　核心知識(shí)回顧1.篩選菌株：(1)尋找目的菌株的原則：根據(jù)它對(duì)_________的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。,生存環(huán)境,(2)實(shí)驗(yàn)室篩選尿素分解菌的方法：使用以_____為唯一氮源的_____培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(3)選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許_________的微生

30、物生長(zhǎng)，同時(shí)___________其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。2.微生物的計(jì)數(shù)：,尿素,選擇,特定種類,抑制或阻止,一個(gè),細(xì)菌計(jì)數(shù)板,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,(C÷V)×M,小,大,3.實(shí)驗(yàn)流程及注意事項(xiàng)：,表層,30～300,稀釋涂布平板,30～37,5～7,25～28,3～4,菌落,4.分解尿素的細(xì)菌的鑒別：(1)方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。(2)原理：,酚紅,脲酶,

31、2NH3,(3)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論：①培養(yǎng)基變紅：該種細(xì)菌___分解尿素。②培養(yǎng)基不變紅：該種細(xì)菌_____分解尿素。,能,不能,5.設(shè)置對(duì)照和重復(fù)：,非測(cè)試因素,偶然因素,制作是否合格,3,【教材易漏邊角知識(shí)】選修1P26“旁欄小資料”細(xì)菌數(shù)目的測(cè)定還有哪些方法？舉例說(shuō)明。__________________________________________________。,濾膜法。測(cè)定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以采用濾,膜法,【

32、思維診斷】(1)從有機(jī)廢水中分離分解有機(jī)物的微生物時(shí)，接種后的培養(yǎng)皿需要放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?！? )分析：分解有機(jī)物的微生物為異養(yǎng)型，不需要光照。,×,(2)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害?！? )分析：選擇無(wú)菌技術(shù)方法時(shí)，既要考慮消毒效果，又要考慮被操作對(duì)象的承受能力，不能傷害細(xì)胞。,√,(3)培養(yǎng)基中只要含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽四種成分就能滿足各種微生物的需要。　(

33、 )分析：微生物生長(zhǎng)需要水、無(wú)機(jī)鹽、氮源、碳源和生長(zhǎng)因子等。,×,(4)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般使用平板劃線法。( )分析：使用平板劃線法能分離微生物，但不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。,×,(5)利用稀釋涂布平板法對(duì)微生物計(jì)數(shù)時(shí)，只要得到一個(gè)菌落數(shù)在30～300的平板即可?！? )分析：只得到一個(gè)菌落數(shù)在30～300的平板是錯(cuò)誤的，原因是不符合實(shí)驗(yàn)的重復(fù)原則，易受到偶然因素的影響。,×,高考角度

34、全練角度1　微生物的計(jì)數(shù)1.(2016·四川高考)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)77982219,(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以____________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加____________作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成____________色。(2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶

35、液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。,該過(guò)程采取的接種方法是____________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_________×108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目較________。,(3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示的位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UA

36、A)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為_______，突變基因表達(dá)的蛋白含____________個(gè)氨基酸。,【解題指南】(1)關(guān)鍵信息：“篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌”“接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液”，使“圖乙序列”出現(xiàn)終止密碼。(2)解題關(guān)鍵：區(qū)別選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基，掌握細(xì)菌計(jì)數(shù)的方法。,【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)與分離方法及基因表達(dá)。(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨，要從土壤中篩選出產(chǎn)脲酶的細(xì)菌，需用以尿素作為唯一氮源的選擇培

37、養(yǎng)基。由于尿素被分解成了氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，使酚紅指示劑變紅色。,(2)將稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液接種在細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的方法是稀釋涂布平板法。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300，選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)，每克土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量為(156+178+191)÷3÷0.1×105=1.75×108。由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)

38、的是一個(gè)菌落，用此方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目偏少。,(3)密碼子由3個(gè)相鄰的堿基組成，箭頭前面的堿基一共構(gòu)成91個(gè)密碼子；插入的70個(gè)核苷酸和后面2個(gè)堿基一共構(gòu)成24個(gè)密碼子，后面是UGA，是終止密碼，翻譯結(jié)束后，表達(dá)的蛋白質(zhì)含有115個(gè)氨基酸。,答案：(1)尿素　酚紅　紅(2)稀釋涂布平板法　1.75　少　(3)UGA　115,角度2　微生物的選擇培養(yǎng)2.(2017·濟(jì)南模擬)在調(diào)查和分離湖水中耐鹽細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，先將10升湖水水

39、樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到多個(gè)培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請(qǐng)回答：(1)可以通過(guò)提高培養(yǎng)基中________的濃度，篩選被調(diào)查細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為________培養(yǎng)基。,(2)要提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置的對(duì)照組是________。為檢驗(yàn)(1)中篩選方法的效果，可以設(shè)置的對(duì)照組是________。(3)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是________。為防止冷凝水影響

40、細(xì)菌的生長(zhǎng)，需將培養(yǎng)皿________培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個(gè)菌落在生態(tài)學(xué)中可以被稱為________。,【解析】(1)篩選耐鹽細(xì)菌，需在培養(yǎng)基中添加高濃度的NaCl，這種人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基被稱為選擇培養(yǎng)基。,(2)要提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置未接種的培養(yǎng)基作為對(duì)照組，若對(duì)照組產(chǎn)生菌落，則培養(yǎng)基未徹底滅菌，反之，滅菌合格。為檢驗(yàn)(1)中篩選方法的效

41、果，可以設(shè)置未加高濃度鹽的培養(yǎng)基作為對(duì)照組，若對(duì)照組上菌落比實(shí)驗(yàn)組多，則培養(yǎng)基有選擇作用，反之沒有。,(3)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長(zhǎng)，需將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。一定區(qū)域內(nèi)同種生物的全部個(gè)體稱為一個(gè)種群。,答案：(1)鹽(或NaCl)　選擇　(2)未接種的培養(yǎng)基　未加高濃度鹽的培養(yǎng)基　(3)高壓蒸汽滅菌　倒置　種群,3.(2015·全國(guó)卷Ⅰ節(jié)選)已知微生物A可以產(chǎn)生

42、油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題：(1)顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通常可用____________染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用____________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。,(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以____________為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。,(3)為了確定微

43、生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg，則上述三個(gè)溫度中，________℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞________℃設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。,【解析】(1)脂肪可被蘇丹Ⅲ(Ⅳ)染液染成橘黃色(紅色)，題干中說(shuō)明微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，則可以采用萃取法提取微生物A中的油脂。(2)油脂為有機(jī)化合物，富含碳元素，

44、故為了從自然界獲得能夠分解油脂的單菌落，應(yīng)以油脂為唯一碳源來(lái)配制培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上，能分解油脂的微生物可以正常生長(zhǎng)，其他微生物不能正常生長(zhǎng)。,(3)在45℃下，降解10 g油脂所需酶量最多，則該溫度下酶活性最低；由題干信息可知，40℃下降解10 g油脂所需的酶量最少。應(yīng)圍繞40℃設(shè)置不同溫度梯度來(lái)探究酶的最適溫度。,答案：(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)　萃取法(2)油脂(其他合理答案也可)　(3)45　40,4.(2014·全國(guó)

45、卷Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問題：,(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_____________；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為___

46、_____。,(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)__________滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_____________________________。,(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。,(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比

47、靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中__________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。,【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞：“先行培養(yǎng)”“振蕩培養(yǎng)”。(2)隱含信息：A圖中菌落是采用平板劃線法接種培養(yǎng)的結(jié)果，B圖中菌落分布相對(duì)均勻，為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果。(3)關(guān)鍵知識(shí)：稀釋涂布平板法檢測(cè)細(xì)菌含量、平板劃線法分離細(xì)菌。,【解析】本題考查微生物培養(yǎng)、細(xì)菌分離及計(jì)數(shù)等相關(guān)

48、知識(shí)。(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù)：,(2)接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始，這樣做的目的是通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。,(3)根據(jù)示意圖A和B中生長(zhǎng)的菌落形態(tài)，判定B圖為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果

49、(菌落分布相對(duì)均勻)。(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量，促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng)；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。,答案：(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B　(4)溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),【易錯(cuò)提醒】本題第(1)題第2空易錯(cuò)答為3.8×104。出錯(cuò)原因是忽視了單位，教材計(jì)算公式是每克樣品中的細(xì)菌數(shù)，而本題要

50、計(jì)算每升水樣中的活菌數(shù)，應(yīng)再乘以103。,考點(diǎn)三　分解纖維素的微生物的分離核心知識(shí)回顧1.纖維素與纖維素酶：(1)纖維素：一種由_______首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的_____類物質(zhì)。,葡萄糖,多糖,(2)纖維素酶：①組成：纖維素酶是一種_____酶，包括__酶、__酶和_________酶三種組分。②作用：,復(fù)合,C1,CX,葡萄糖苷,C1,CX,葡萄糖苷,2.纖維素分解菌的篩選：(1)方法：_

51、______染色法。(2)培養(yǎng)基：___________的選擇培養(yǎng)基。,剛果紅,富含纖維素,(3)篩選原理：(4)菌落的挑選：挑選產(chǎn)生_______的菌落。,紅色復(fù)合物,透明圈,透明圈,3.實(shí)驗(yàn)流程及注意事項(xiàng)：,纖維素,富含纖維素,單個(gè),透明圈,【思維診斷】(1)土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是必不可少的?！? )分析：土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的

52、多少來(lái)確定。,×,(2)在富含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色劑，若出現(xiàn)周圍存在透明圈的菌落，則說(shuō)明篩選到了分解纖維素的微生物。　( )分析：剛果紅染色劑能與纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物；分解纖維素的細(xì)菌產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素，在分解纖維素的細(xì)菌的周圍出現(xiàn)透明圈。,√,(3)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中只含有纖維素一種碳源?！? )分析：纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中富含纖維素，但不是只有纖維素一種碳源。,

53、15;,(4)在纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落都是纖維素分解菌?！? )分析：纖維素分解菌能在纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上成為優(yōu)勢(shì)種，由于培養(yǎng)基中并非只有纖維素一種碳源，不能保證其他雜菌不能生長(zhǎng)。,×,(5)培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落一定是纖維素分解菌的菌落。　( )分析：剛果紅與多糖類化合物產(chǎn)生紅色復(fù)合物，若微生物能分解剛果紅，其周圍也會(huì)產(chǎn)生透明圈。,×,(6)剛果紅染色法只能在培養(yǎng)微生物時(shí)

54、加入剛果紅。( )分析：剛果紅染色法有兩種方法，一種是在配制培養(yǎng)基時(shí)就加入剛果紅，另一種是在培養(yǎng)微生物后再加入剛果紅。,×,高考角度全練角度1　纖維素分解菌的篩選1.(2014·全國(guó)卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將__________分解成__________。,(2)在含纖維素

55、的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成__________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的____________。,(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：,注：“+”表示有，“-”表示無(wú)。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是______________

56、________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________________。,【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞：“纖維素酶”“剛果紅”。(2)隱含信息：兩種培養(yǎng)基中有瓊脂的為固體培養(yǎng)基，無(wú)瓊脂的為液體培養(yǎng)基；淀粉是微生物的碳源，不含纖維素粉不能作為分離和鑒別纖維素分解菌實(shí)驗(yàn)的選擇培養(yǎng)基。,(3)關(guān)鍵知識(shí)：土壤中某些微生物的分解作用和篩選纖維素分解菌

57、的方法。,【解析】本題主要考查纖維素酶的作用、剛果紅染色法、分離和鑒別纖維素分解菌的方法。(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素能被纖維素酶分解為葡萄糖，如圖：,(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，且培養(yǎng)基中不能添加

58、淀粉。,答案：(1)纖維二糖　葡萄糖(2)紅　透明圈(3)不能　液體培養(yǎng)基不能分離單菌落　不能　培養(yǎng)基乙中沒有纖維素，不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌,2.(2015·江蘇高考)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來(lái)發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問題：世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)7798222

59、0,(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是__________(填序號(hào))。①酒精燈　　②培養(yǎng)皿　?、埏@微鏡　　④無(wú)菌水(2)在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過(guò)多的原因是___________________________________________________。,(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是_______________________

60、_____。,(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落(見下圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的________有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是__________(填圖中序號(hào))。,(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖，推測(cè)菌株___________

61、_更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是_________________________。,【解析】本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)。(1)樣品稀釋和涂布平板的操作過(guò)程不需要顯微鏡。(2)涂布平板時(shí)，若培養(yǎng)基表面的菌懸液過(guò)多會(huì)出現(xiàn)積液，造成菌體堆積，影響分離效果。(3)試管口粘附的培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈，避免培養(yǎng)基污染棉塞。(4)菌株產(chǎn)生的降解纖維素酶的量越多、活性越高，會(huì)使降解,圈越大。降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是①，因其菌株菌落

62、小，但降解圈大。(5)分析圖中曲線可知，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，而發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，所以J4菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。,答案：(1)③　(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞　(4)量與活性?、?5)J4　發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高,角度2　其他微生物的篩選3.(2016·全國(guó)卷Ⅲ)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)

63、材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：(1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用______對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是________。,(2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有______________和________________。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出____________的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在-20℃長(zhǎng)期保存

64、時(shí)，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。,【解析】本題主要考查乳酸菌的分離純化和保存。(1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無(wú)菌水梯度稀釋泡菜濾液，這樣既可避免雜菌污染，又可保證將乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。,(2)乳酸的積累會(huì)使培養(yǎng)液pH降低，影響乳酸菌的增殖，加入碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝(無(wú)氧呼吸)過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸，使碳酸鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的識(shí)別和分離。

65、(3)加入甘油可降低培養(yǎng)液的凝固點(diǎn)，使培養(yǎng)基在低溫下保持液體狀態(tài)。,答案：(1)無(wú)菌水　泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(2)鑒別乳酸菌　中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)　具有透明圈(3)甘油,【易錯(cuò)提醒】(1)對(duì)細(xì)菌分離純化原理的理解不透，將第(1)題中“無(wú)菌水”答成“自來(lái)水”。(2)對(duì)降低培養(yǎng)液的凝固點(diǎn)的方法認(rèn)識(shí)不足，將第(3)題答成“蒸餾水”或“碳酸鈣”。,4.(2017·福州模擬)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生

66、產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如下圖所示：,(1)進(jìn)行①過(guò)程的目的是________，②過(guò)程所使用的接種方法是________法。(2)從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，配制時(shí)僅以________作為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō)，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)應(yīng)加入________作為凝固劑。,(3)Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是___

67、_____。(4)培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)從Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上挑出________的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上。,【解析】(1)分析題圖可知，①過(guò)程是梯度稀釋；②過(guò)程是用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(2)本題實(shí)驗(yàn)的目的是篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基；本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō)，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑。,(3)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，然后再進(jìn)行滅菌；如果先滅

68、菌再調(diào)節(jié)pH，容易污染培養(yǎng)基。(4)能分解淀粉的嗜熱菌在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大，淀粉酶的活性越強(qiáng)，所以要從中挑出透明圈大的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上。,答案：(1)稀釋　稀釋涂布平板(2)選擇　淀粉　瓊脂(3)先調(diào)節(jié)pH，后滅菌(4)透明圈大,【加固訓(xùn)練】臨床實(shí)驗(yàn)表明，服用乳酸菌及其制品具有減少人體血清膽固醇含量、降低心腦血管發(fā)病率的功效。下面是從酸奶中篩選出高效降低

69、膽固醇的乳酸菌的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列問題：,(1)制備固體培養(yǎng)基(MRS)：在普通的液體培養(yǎng)基中添加碳酸鈣和________，加熱使其熔化，然后轉(zhuǎn)移到錐形瓶中。經(jīng)滅菌處理后，待其冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近倒平板。,(2)將少量酸奶制成1∶10稀釋液，再將梯度稀釋到106倍的稀釋液涂布于添加了碳酸鈣的乳酸菌培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)平板上，在________(填“有氧”或“無(wú)氧”)條件下37℃恒溫培養(yǎng)72 h。挑取________(填“有