羊水檢驗(yàn)

1、羊水檢驗(yàn)The Examination of Amniotic Fluid,KEY POINTS,1. Alterations of color and clarity and the significance.2. Evaluation indexes of fetal maturity and the significance.3. Methodology assessment and quality control of f

2、oam stability test.4. Examination indexes of toxoplasma, others, rubella virus, cytomegalovirus and herpes simplex virus (TORCH) infection.5. Evaluative indexes of fetal dysplasia and the significance.,前言,功能：保護(hù)母體和胎兒。

3、 水----組成： 溶質(zhì)--,,,98%～99%,1%～2%,50%,50%,極少量,一、標(biāo)本采集羊膜穿刺多由婦產(chǎn)科醫(yī)師進(jìn)行。,第一節(jié)　標(biāo)本采集與處理,標(biāo)本采集量:標(biāo)本采集最佳時(shí)間：①診斷遺傳性疾病---②診斷Rh溶血癥----③評(píng)估胎兒成熟度--,妊娠16～20W。,妊娠26～36W。,妊娠晚期(≥35W)。,10～30ml。,第二節(jié)　羊水理學(xué)檢驗(yàn),一、量 【參考范圍】 ①妊娠8周：5ml

4、。 ②妊娠10周：30ml。③妊娠20周：400ml。④妊娠38周：1000ml。⑤足月妊娠：800ml。⑥過(guò)期妊娠：＜300ml。,【臨床意義】羊水過(guò)多（polyhydramnios）：妊娠任何時(shí)期羊水量＞2 000ml。羊水過(guò)少（oligohydramnios）：妊娠足月時(shí)羊水量＜300ml。,,1．羊水過(guò)多的原因,①胎兒畸形②多胎妊娠③孕婦和胎兒疾?、芴ケP(pán)和臍帶病變,,2．羊水過(guò)少的原因,①胎兒畸形②過(guò)

5、期妊娠③胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩④羊膜病變,,二、顏色與透明度,①妊娠早期：無(wú)色或淡黃色、清晰、透明；②妊娠晚期：乳白色、清晰或稍混濁。,【臨床意義】,黃綠色: 表示羊水中混有胎糞，為胎兒窘迫的現(xiàn)象。棕紅色或褐色: 多為胎兒已經(jīng)死亡。金黃色：可能為母嬰血型不合所引起的羊水中膽紅素過(guò)高。粘稠拉絲的黃色: 表示妊娠過(guò)期或胎盤(pán)功能減退?；鞚崮撔曰驇в谐粑墩撸罕硎緦m腔內(nèi)已有明顯感染。,,【檢測(cè)原理】　　羊水中的肺泡表面活性物質(zhì)飽和磷脂

6、是既親水又親脂的兩性物質(zhì)，在乙醇中振蕩后形成的泡沫可維持?jǐn)?shù)小時(shí)，并形成穩(wěn)定泡沫層?！　《渌镔|(zhì)形成的泡沫，能被乙醇消除?！　∮糜谠\斷胎兒肺成熟程度。,三、泡沫試驗(yàn),【參考范圍】,陽(yáng)性（稀釋度為1∶1和1∶2的兩管液面均出現(xiàn)泡沫環(huán)）。,【臨床意義】,臨床上只進(jìn)行稀釋度為1∶1和1∶2的泡沫試驗(yàn)。若2管液面均出現(xiàn)泡沫環(huán)為陽(yáng)性，則提示L/S比值≥2.0，表示胎兒肺成熟。若僅第1管液面出現(xiàn)泡沫環(huán)，為臨界值，L/S比值在1.5～2.0之

7、間。若2管液面均未出現(xiàn)泡沫環(huán)為陰性，L/S比值≤1.49，提示胎兒肺未成熟。,第三節(jié)：羊水化學(xué)與免疫學(xué)檢驗(yàn),一、甲胎蛋白 （AFP ）【檢測(cè)原理】　火箭免疫電泳法　放射火箭免疫電泳法　放射免疫法　酶聯(lián)免疫吸附法,【參考范圍】?、偃焉?5周：40mg/L?！、谌焉?2周以后：25mg/L?！九R床意義】　1．AFP減低 　　見(jiàn)于葡萄胎、唐氏綜合征。,2．AFP增高 ①開(kāi)放性神經(jīng)管缺陷的胎兒。②臍膨出、消化道畸形

8、胎兒。③先天性腎病、先天性食管閉鎖、胰腺纖維囊性變、雙胎、死胎等。④染色體異常、糖尿病、先兆子癇、母嬰Rh血型不合等。⑤羊膜穿刺所致的胎血污染。,二、膽堿酯酶,【檢測(cè)原理】　ChE測(cè)定：丙酰硫代膽堿或乙酰膽堿作為底物，2-硝基苯甲酸為顯色劑的速率法或終點(diǎn)法。　AChE測(cè)定：聚丙烯酰胺凝膠電泳分析法?！緟⒖挤秶俊ChE＜10.43U/L。,【臨床意義】1.羊水中AChE活性增高與胎兒開(kāi)放性神經(jīng)管畸形有高度的相關(guān)性。2

9、.AChE/PChE比值： ＞0.27者可診斷為神經(jīng)管缺損， ≤1.0者可診斷為開(kāi)放性腹壁缺陷胎兒。3.AChE活性測(cè)定：可糾正羊水AFP的假陽(yáng)性。,三、卵磷脂與鞘磷脂,【檢測(cè)原理】 薄層層析色譜法（thin-layer chromatography ; TLC）?！緟⒖挤秶?L/S比值≥2.0。,【臨床意義】L/S＜1.49: 表示肺臟不成熟，IRDS (特發(fā)性呼吸窘迫綜合征)嚴(yán)

10、重；L/S為1.50～1.99: 表示肺臟發(fā)育不夠成熟，有IRDS可能；L/S為2.0～3.4: 表示肺臟已成熟；L/S為3.5～3.9: 表示肺臟肯定成熟；L/S＞4.0: 表示過(guò)熟兒。,,四、肌酐,【檢測(cè)原理】　肌酐與苦味酸反應(yīng)，生成橘紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物。　肌酐測(cè)定方法有去蛋白終點(diǎn)法和速率法?！緟⒖挤秶?　妊娠37周：＞176.8μmol/L。,【臨床意義】,判斷胎兒腎臟成熟度，準(zhǔn)確率高?！∪焉?7周時(shí)，羊

11、水肌酐：?。?76.8μmol/L提示胎兒腎臟成熟；　為132.6～176.7μmol/L為臨界值；　＜132.5μmol/L提示胎兒腎臟未成熟。,,五、睪酮,【檢測(cè)原理】　ELISA法或放射免疫法?！緟⒖挤秶俊、倌行蕴海海?24±11）μg/L。?、谂蕴海?9±2）μg/L。,【臨床意義】,1.預(yù)測(cè)胎兒性別。2.妊娠合并糖尿病、母嬰Rh血型不合、無(wú)腦兒羊水睪酮水平可降低。3.結(jié)合染色體檢查

12、, 診斷胎兒性疾病。,六、雌三醇,【檢測(cè)原理】ELISA法或放射免疫法?！緟⒖挤秶咳焉锬┢冢?.8～1.2mg/L,【臨床意義】,1.直接反映胎兒-胎盤(pán)功能。2.間接的反映胎兒在宮內(nèi)發(fā)育的情況?！　、俅迫迹?.0mg/L，胎兒預(yù)后不良；　?、诖迫纪蝗幌陆?，可能為先兆流產(chǎn)?！　、鄞迫紲p低，多見(jiàn)于母嬰Rh血型不合、妊娠合并糖尿病、重度妊娠高血壓綜合征時(shí)的宮內(nèi)死胎?！　、艽迫汲掷m(xù)性處于低值者，可見(jiàn)于胎盤(pán)性硫酸酯酶缺

13、乏癥,,七、膽紅素,【檢測(cè)原理】　光譜分析法，改良J-G法，膽紅素氧化酶法和二甲亞砜（DMSO）法?！緟⒖挤秶俊。?.71μmol/L（△A450＜0.02）。,【臨床意義】,①判斷胎兒安危、觀(guān)察胎兒肝臟成熟程度的膽紅素水平。②監(jiān)測(cè)胎兒溶血程度，以決定分娩時(shí)機(jī)。,八、葡萄糖,【檢測(cè)原理】　葡萄糖氧化酶（GOD）法，　己糖激酶（HK）法，　鄰甲苯胺（O-TB）法?！緟⒖挤秶俊。?.56mmol/L。,【臨床意義】

14、,1.判斷胎兒腎臟成熟程度的指標(biāo)。 　＜0.56mmol/L，提示胎兒腎臟發(fā)育成熟?！?＞0.80mmol/L，提示胎兒腎臟不成熟。2.但判斷腎臟成熟程度的精確度不如羊水肌酐。,九、淀粉酶,【檢測(cè)原理】碘-淀粉酶比色法，對(duì)-硝基苯麥芽庚糖苷（4NP-G7）法?！緟⒖挤秶?00 Somogyi U/L。,【臨床意義】,主要用于判斷胎兒唾液腺成熟程度。 1.大于300 Somogyi U/L，提示胎兒唾液腺成熟；

15、 2.200～300 Somogyi U/L為臨界值； 3.小于200 Somogyi U/L為胎兒唾液腺不成熟。,十、反三碘甲狀腺原氨酸,【檢測(cè)原理】 RIA法?！緟⒖挤秶?2.62～8.31nmol/L?！九R床意義】 用于診斷胎兒甲狀腺疾病。 水平降低見(jiàn)于胎兒甲狀腺功能減退。,十一、血型物質(zhì),ABH分泌型血型的預(yù)測(cè) 【檢測(cè)原理】 羊水中分泌的血型物質(zhì)可將相應(yīng)抗血清中抗體中和。,2. AB

16、H（O）血型酶的測(cè)定,【檢測(cè)原理】A基因產(chǎn)生的N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶，形成A血型物質(zhì)。B基因產(chǎn)生的D-半乳糖轉(zhuǎn)移酶，形成B血型物質(zhì)。當(dāng)有糖供體、Mn++與O型紅細(xì)胞共同孵育時(shí)，羊水中的轉(zhuǎn)移酶可在紅細(xì)胞膜上合成A或B物質(zhì)。利用血型測(cè)定的方法可檢測(cè)非分泌型胎兒的血型。,【臨床意義】,為有嚴(yán)重ABO同種免疫史的孕婦非分泌型的胎兒血型鑒定提供了可能。為在位于A(yíng)BO基因部位的遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷提供了可能。,第四節(jié)　羊水顯微鏡檢驗(yàn),一、

17、羊水脂肪細(xì)胞計(jì)數(shù)【檢測(cè)原理】　　脂肪細(xì)胞計(jì)數(shù)是反映胎兒皮膚成熟程度的指標(biāo)。將羊水涂片用尼羅藍(lán)水溶液染色后，顯微鏡下觀(guān)察，計(jì)數(shù)200～500個(gè)細(xì)胞，計(jì)算脂肪細(xì)胞陽(yáng)性率。,【參考范圍】妊娠34周前羊水脂肪細(xì)胞≤1%；34～38周為1%～10%；38～40周為10%～15%；40周以后大于50%。【臨床意義】大于20%為胎兒皮膚成熟的指標(biāo)。10%～20%為臨界值。小于10%為皮膚不成熟。大于50%為皮膚過(guò)熟。,二、羊水快

18、速貼壁細(xì)胞計(jì)數(shù),【檢測(cè)原理】1.正常羊水細(xì)胞需要4～5d才能貼壁生長(zhǎng)。2.胎兒畸形，如神經(jīng)管缺陷及臍疝畸形時(shí)，羊水細(xì)胞僅需20h即可貼壁生長(zhǎng)，此種細(xì)胞稱(chēng)為快速貼壁細(xì)胞(RAC)，具有貼壁生長(zhǎng)快、活細(xì)胞貼壁率高的特點(diǎn)。通過(guò)計(jì)算活細(xì)胞貼壁率，來(lái)判斷有無(wú)畸形。,,【參考范圍】 ＜4%?！九R床意義】 RAC主要用于胎兒畸形的診斷。 臍疝畸形的RAC為9%～12%， 無(wú)腦兒的RAC為100%。,,第五節(jié) 羊水病

19、原生物學(xué)檢驗(yàn),一、病毒 1.風(fēng)疹病毒檢查【檢測(cè)原理】①病毒分離培養(yǎng)法。②血凝抑制試驗(yàn)。③風(fēng)疹病毒特異性IgM測(cè)定。④PCR：靈敏度高，特異性強(qiáng)，具有早期快速診斷的價(jià)值。,【臨床意義】風(fēng)疹病毒是引起胎兒畸形的病毒之一①妊娠1～2周感染風(fēng)疹病毒者，胎兒嚴(yán)重畸形發(fā)生率為30%～80%；②妊娠12～18周感染風(fēng)疹病毒者，10%～20%胎兒可有智力障礙和聽(tīng)力缺陷；③妊娠18周以后感染風(fēng)疹病毒的危害性很低。,,2．巨細(xì)胞病毒檢查

20、 　巨細(xì)胞病毒是皰疹病毒的一種。　WHO已將其列為引起新生兒出生缺陷的主要病原體。3. 單純皰疹病毒檢查 　單純皰疹病毒是皰疹病毒的一種?！∨c胎兒和新生兒有關(guān)的主要是Ⅱ型。,二、弓形蟲(chóng),【檢測(cè)原理】①組織學(xué)：可直接尋找弓形蟲(chóng)的滋養(yǎng)體、包囊或卵囊等。②血清學(xué)：有Sabin-Feldman染色試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、間接熒光抗體試驗(yàn)或間接血凝試驗(yàn)等。③ PCR：以B1基因、200-300重復(fù)序列（AF146527）或16S r

21、DNA為目的基因。,,【臨床意義】　　可引起弓形蟲(chóng)病，為人畜共患疾病。　　孕婦感染弓形蟲(chóng)后，除了通過(guò)胎盤(pán)感染胎兒外，還可經(jīng)過(guò)羊水進(jìn)入消化道而使胎兒感染?！　≡袐D感染弓形蟲(chóng)后，可造成流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎兒小頭畸形、腦積水、視力障礙、智力發(fā)育缺陷等畸形。,第六節(jié) 羊水檢驗(yàn)的質(zhì)量控制與臨床應(yīng)用,一、質(zhì)量控制①AFP：母體AFP檢測(cè)連續(xù)2次陽(yáng)性時(shí)，再考慮是否行羊水AFP檢查。②羊水膽紅素檢測(cè)：要求避光。③羊水泡沫試驗(yàn)：新鮮標(biāo)本或4℃冷藏

22、。操作時(shí)需用力振蕩。,二、臨床應(yīng)用,產(chǎn)前診斷,（一）產(chǎn)前診斷 1．神經(jīng)管缺陷性疾病 （ NTD ）①母體血清和羊水AFP增高。②羊水AFP增高除了見(jiàn)于NTD以外，還可見(jiàn)于死胎、先天性食管閉鎖及某些染色體病。③RAC對(duì)診斷NTD具有高度的特異性和靈敏度。無(wú)腦兒的RAC貼壁率為100%，臍疝畸形RAC貼壁率為9%～12%。,2．遺傳性代謝病,①羊水酶學(xué)檢查?！　、谙拗菩云伍L(zhǎng)度多態(tài)性連續(xù)分析?！　、垩蛩甈CR檢查。　　減少遺傳

23、性疾病的發(fā)生率。如脂代謝病、粘多糖沉積病、氨基酸代謝病、碳水化合物代謝病等。,,3．染色體病,常染色體異常--先天愚型(21-三體)性染色體異常--先天性卵巢發(fā)育不全癥(45,X) 明確診斷--可終止妊娠 。,4．性連鎖遺傳病,常見(jiàn)的性連鎖遺傳病有血友病、原發(fā)性低丙種球蛋白血癥、肌營(yíng)養(yǎng)不良、黏多糖沉積?、蛐汀⑻窃x?、蛐?、紅綠色盲、自毀面容綜合征等。對(duì)X連鎖隱性遺傳病，如血友病、紅綠色盲、假性肥大型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥等家族史的胎兒，及

24、早確定胎兒性別，男胎應(yīng)終止妊娠。,（二）評(píng)估胎兒成熟度,1.肺成熟度 2.腎成熟度3.肝成熟度4.唾液腺成熟度 5.皮脂腺成熟度,（三）診斷TORCH感染,TORCH是一組病原生物的英文名稱(chēng)縮寫(xiě)，即弓形蟲(chóng)（toxoplasma gondii）、其他病原微生物（others）、風(fēng)疹病毒（rubella virus）、巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus）、單純皰疹病毒（herpes simplex virus）第一個(gè)英文字母

25、的組合。,【臨床意義】,這組病原生物?？赏ㄟ^(guò)胎盤(pán)傳給胎兒，引起圍產(chǎn)期感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、先天畸形和智力障礙等各種異常?！　　∫虼耍琓ORCH感染的檢驗(yàn)已成為許多地區(qū)孕期檢查的常規(guī)項(xiàng)目。,羊水檢驗(yàn)是一種較為安全、可靠的診斷方法，對(duì)產(chǎn)前診斷、評(píng)估胎兒成熟度、篩選先天性遺傳病、和檢查宮內(nèi)感染等有重要價(jià)值。,總結(jié),本章要點(diǎn),羊水顏色和透明度的變化與意義。泡沫試驗(yàn)的方法學(xué)評(píng)價(jià)與質(zhì)量控制。胎兒成熟度的評(píng)價(jià)指標(biāo)及意義。TORCH感染的

26、檢查指標(biāo)。胎兒發(fā)育異常的評(píng)價(jià)指標(biāo)及意義。,肝癌是指發(fā)生于肝臟的惡性腫瘤，包括原發(fā)性肝癌和轉(zhuǎn)移性肝癌兩種，人們?nèi)粘Ｕf(shuō)的肝癌指的多是原發(fā)性肝癌。原發(fā)性肝癌是臨床上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，根據(jù)最新統(tǒng)計(jì)，全世界每年新發(fā)肝癌患者約六十萬(wàn)，居惡性腫瘤的第五位。原發(fā)性肝癌按細(xì)胞分型可分為肝細(xì)胞型肝癌、膽管細(xì)胞型肝癌及混合型肝癌。按腫瘤的形態(tài)可分為結(jié)節(jié)型、巨塊型和彌漫型。原發(fā)性肝癌在我國(guó)屬于高發(fā)病，一般男性多于女性。中國(guó)是乙肝大國(guó)，我國(guó)的肝癌多在乙肝肝

27、硬化的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)，丙肝病人也在逐漸增加，乙肝后也會(huì)發(fā)展為肝癌。目前我國(guó)發(fā)病人數(shù)約占全球的半數(shù)以上，占全球肝癌病人的55%，已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅我國(guó)人民健康和生命的一大殺手，其危險(xiǎn)性不容小視。[1] 發(fā)病原因　　總的來(lái)說(shuō)，原發(fā)性肝癌的病因至今未能完全闡明，但已證明與以下因素密切相關(guān)： 　　1、病毒性肝炎：流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)表明，乙肝流行的地區(qū)也是肝癌的高發(fā)地區(qū)，患過(guò)乙肝的人比沒(méi)有患過(guò)乙肝的人患肝癌的機(jī)會(huì)要高10倍之多。長(zhǎng)期的臨床觀(guān)察中發(fā)現(xiàn)

28、，肝炎、肝硬化、肝癌是不斷遷移演變的三部曲。近來(lái)研究表明，與肝癌有關(guān)的病毒性肝炎主要包括乙型肝炎（HBV）、丙型肝炎（BCV），而其中又以乙型肝炎最為常見(jiàn)。 　　2、酒精：俗話(huà)說(shuō)“飲酒傷肝”，飲酒并不是肝癌的直接病因，但它的作用類(lèi)似于催化劑，能夠促進(jìn)肝癌的發(fā)生和進(jìn)展。有長(zhǎng)期酗酒嗜好者容易誘發(fā)肝癌。這是因?yàn)榫凭M(jìn)入人體后，主要在肝臟進(jìn)行分解代謝，酒精對(duì)肝細(xì)胞的毒性使肝細(xì)胞對(duì)脂肪酸的分解和代謝發(fā)生障礙，引起肝內(nèi)脂肪沉積而造成脂肪肝。飲酒越