利用聚酮類(lèi)生物合成研發(fā)新抗生素的進(jìn)展

1、,腸道傳染病診斷,,細(xì)菌室 金炎,傳染病概述,一.傳染病定義 由病原微生物（病毒、細(xì)菌、立克次體、螺旋體等）感染人體后產(chǎn)生的有傳染性的疾病。,二.造成傳染病流行的基本條件,（一）傳染源－指病原體已在體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖并能將其排出體外的人和動(dòng)物。 （有患者、隱性感染者、病原攜帶者及受感染的動(dòng)物）（二）傳播途徑－病原體離開(kāi)傳染源后，到達(dá)另一個(gè)易感者的途徑。 （包括呼吸道、消化道、生活接觸、蟲(chóng)媒、血液

2、、土壤等）（三）人群易感性－對(duì)某一傳染病缺乏特異性免疫力的人稱為易感者。 （易感者比例在人群中達(dá)到一定水平時(shí)，如果有傳染源和合適 的傳播途徑，則傳染病的流行很容易發(fā)生）,三. 傳染病的特征,（一）基本特征 1.有病原體；2.有傳染性；3.有流行病學(xué)特征；4.有感染后免疫。（二）臨床特點(diǎn) 1.潛伏期；2.癥狀期；3.恢復(fù)期。（三）常見(jiàn)癥狀和體征

3、 發(fā)熱、出疹、毒血癥狀及單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)反應(yīng)等。,四. 傳染病的預(yù)防,（一）控制傳染源 早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早隔離、早診斷、早治療（五早）。（二）切斷傳播途徑 消毒和隔離（三）保護(hù)易感人群 預(yù)防接種；鍛煉身體、改善營(yíng)養(yǎng)。,五. 《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》規(guī)定的三類(lèi)法定傳染病,甲類(lèi)傳染病是指：鼠疫、霍亂。乙類(lèi)傳染病是指：傳染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎、脊髓灰質(zhì)

4、炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血熱、狂犬病、流行性乙型腦炎、登革熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、肺結(jié)核、傷寒和副傷寒、流行性腦脊髓膜炎、百日咳、白喉、新生兒破傷風(fēng)、猩紅熱、布魯氏菌病、淋病、梅毒、鉤端螺旋體病、血吸蟲(chóng)病、瘧疾、甲型H1N1流感。--26丙類(lèi)傳染病是指：流行性感冒、流行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血性結(jié)膜炎、麻風(fēng)病、流行性和地方性斑疹傷寒、黑熱病、包蟲(chóng)病、絲蟲(chóng)病、手足口病，除霍亂、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、傷寒和副傷寒

5、以外的感染性腹瀉病。--11,感染性腹瀉,一、定義：感染性腹瀉廣義系指各種病原體腸道感染引起之腹瀉，這里僅指除霍亂、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、傷寒和副傷寒以外的感染性腹瀉，為《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》中規(guī)定的丙類(lèi)傳染病。,二、病原：,目前已知引起腹瀉的病原體有數(shù)十種之多，但國(guó)內(nèi)報(bào)告以細(xì)菌性和病毒性腹瀉占多數(shù)。不同自然環(huán)境和生產(chǎn)、生活方式不同的地區(qū)，引起腹瀉病的主要病原體有所不同。,,總體上居首位的是志賀氏菌及輪狀病毒，第二位是腸致瀉

6、性大腸桿菌，第三位是空腸彎曲菌及沙門(mén)氏菌第四位及第五位是非O1/非O139群霍亂弧菌，其他致瀉性弧菌和小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌。,腸道傳染病基礎(chǔ)知識(shí),腸道傳染?。合抵改c道傳播、臨床上表現(xiàn)為胃腸道癥狀為主的一組傳染病種類(lèi)細(xì)菌性：霍亂（含O139）、傷寒、菌痢、O157:H7出血性大腸桿菌、細(xì)菌性感染性腹瀉。病毒性：甲、戊型病毒性肝炎、脊髓灰質(zhì)炎、病毒性感染性腹瀉。寄生蟲(chóng)：阿米巴痢疾、鞭蟲(chóng)病、蛔蟲(chóng)病、包蟲(chóng)病等傳播途徑：糞－口（食物

7、、水、日常生活接觸）病原體：外界抵抗力和在外界的成活能力強(qiáng)傳染源：病人、帶菌者目前認(rèn)為是唯一的傳染源明顯季節(jié)性：主要出現(xiàn)在夏秋季感染對(duì)象：沒(méi)有呼吸道傳染病明顯。,一、霍亂概況,全球霍亂概況,世界霍亂信息（WHO流行病每周記錄）,,我國(guó)霍亂流行階段,第1 階段(1961 —1965 年) 為早期流行階段;第2 階段(1966 —1976 年) 疫情報(bào)告少, 可信度低;第3 階段(1977 —1986 年) 為嚴(yán)重流行階段第4

8、 階段(1987 —1992 年) 發(fā)病數(shù)、地區(qū)逐年減少第5 階段(1993年1999年) ,疫情又出現(xiàn)回升, 發(fā)生O139 血清群新型霍亂,且與埃爾托霍亂并存第6階段（2000年至今），疫情處于低水平， O139 血清群霍亂廣泛擴(kuò)散，埃爾托霍亂流行強(qiáng)度大大下降,全國(guó)霍亂發(fā)病情況,,二、霍亂基本情況,霍亂,霍亂（cholera）是由O1 血清群和O139 血清群霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病。主要臨床表現(xiàn)是腹瀉（水樣便）、嘔吐，如不及

9、時(shí)治療，患者可死于低血容量性休克、代謝性酸中毒及腎功能衰竭等。病死率4％左右。 特征：發(fā)病急、傳播快、波及范圍廣、 能引起大流行。,霍亂的臨床特征,典型臨床癥狀為 劇烈腹瀉，水樣便黃水樣便清水樣便米泔水樣便或血水樣便并伴有嘔吐迅速出現(xiàn)嚴(yán)重脫水，循環(huán)衰竭肌肉痙攣-特別是腓腸肌,霍亂病原體分類(lèi),古典生物型 小川型A

10、B O1群 稻葉型AC 埃爾托生物型 彥島型ABC霍亂弧菌

11、 霍亂病原菌 O139群（Bengal） 非O1群 O2-O200群 腹瀉病原菌01群的特異抗原有A、B、C三種，其中A抗原為01群所共有，A抗原與其他B與C抗原結(jié)合則可分為三型，即：原型

12、——AC（稻葉，Inaba）、異型——AB（小川，Ogawa）和中間型——ABC（彥島，Hikojima）,,,,,,,,,,病原學(xué),霍亂弧菌：在弧菌屬中將與O1群霍亂弧菌具有共同鞭毛抗原(H抗原)、生化性狀類(lèi)似、但菌體抗原不同的弧菌統(tǒng)稱為霍亂弧菌。根據(jù)菌體（O）抗原 不同，已分出200個(gè) 以上的O血清型。,霍亂病原學(xué)特點(diǎn),1、形態(tài)與染色弧狀或逗點(diǎn)狀革蘭染色陰性有一根單鞭毛，細(xì)菌運(yùn)動(dòng)非常活潑，呈魚(yú)群穿梭樣或流星狀,致

13、病性,霍亂弧菌經(jīng)口進(jìn)入人體胃部，當(dāng)胃酸缺乏或被稀釋或入侵菌量較多時(shí)（108），即可進(jìn)入小腸，依其粘附因子緊貼于小腸上皮細(xì)胞表面，在小腸的堿性環(huán)境中大量繁殖，產(chǎn)生大量的霍亂腸毒素，細(xì)菌崩解還可釋出內(nèi)毒素?；魜y腸毒素抑制腸粘膜細(xì)胞對(duì)鈉的正常吸收，并刺激隱窩細(xì)胞分泌氯化物和水，導(dǎo)致腸腔水份與電解質(zhì)大量聚集，出現(xiàn)劇烈的水樣腹瀉和嘔吐。,流行病學(xué),霍亂是人類(lèi)傳染病，病人和帶菌者是本病的主要傳染源。 從感染譜來(lái)看，人感染本病后的

14、反應(yīng)是多種多樣，受感染的多，發(fā)病的少；輕癥的多，重癥的少，嚴(yán)重脫水的典型病人只占感染者的一小部分。,六.報(bào)告程序與方式,傳染病報(bào)告實(shí)行屬地化管理。傳染病疫情信息實(shí)行網(wǎng)絡(luò)直報(bào)。甲類(lèi)傳染病在2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)直報(bào)，乙類(lèi)及丙類(lèi)傳染病在24小時(shí)內(nèi)網(wǎng)絡(luò)報(bào)告。網(wǎng)報(bào)病種：甲乙丙3類(lèi)39種法定傳染病； 水痘等12種非法定傳染性疾病。,其他感染性腹瀉,,,隨著時(shí)空地點(diǎn)的變化，每個(gè)傳染病都有一個(gè)自然發(fā)病率：50

15、-80年代，我國(guó)細(xì)菌性痢疾發(fā)病率在46.37-1018.93/10萬(wàn)（1.018/100）。1994年～1997年的監(jiān)測(cè)資料表明，我國(guó)年報(bào)告病例在60～85萬(wàn)，發(fā)病率居甲乙類(lèi)傳染病之首，病死率為0.04～0.07%。其中志賀氏菌致病性強(qiáng)，10-100個(gè)細(xì)菌細(xì)胞就可使人發(fā)病，多數(shù)臨床分離的菌株為多重耐藥性。,建國(guó)以來(lái)痢疾發(fā)病率變化,,腸致瀉性大腸桿菌目前已發(fā)現(xiàn)5種，即1腸致病性大腸桿菌（EPEC），引起嬰幼兒水樣或蛋花湯樣便；2 腸產(chǎn)毒性

16、大腸桿菌（ETEC）引起病人霍亂樣水樣便；3 腸侵襲性大腸桿菌（EIEC），病人發(fā)生細(xì)菌性痢疾樣便；4 腸出血性大腸桿菌，病人早期為水樣便，后為血便；5 腸集聚性粘附大腸桿菌（EAEC），該菌與小兒頑固性腹瀉有關(guān)。,,沙門(mén)氏菌某些菌型可致人的急性腹瀉和食物中毒暴發(fā)。全球已發(fā)現(xiàn)2000多個(gè)菌型，我國(guó)至少已檢出255個(gè)型或變異型，其中已知能引起人類(lèi)致病的有57個(gè)型，主要在A～F群內(nèi)，所以在沙門(mén)氏菌血清學(xué)鑒定時(shí)，可先用A～F多價(jià)O血清檢查。鼠

17、傷寒沙門(mén)氏菌感染遍及全國(guó)各地，該菌在醫(yī)院兒科、產(chǎn)科嬰兒室的交叉感染屢有報(bào)告。,,四、診斷標(biāo)準(zhǔn)一）流行病學(xué)資料一年四季均可發(fā)病，一般夏秋季多發(fā)，有不潔飲食（水）和/或與腹瀉病人、腹瀉動(dòng)物、帶菌動(dòng)物接觸史，或有去不發(fā)達(dá)地區(qū)旅游史。如為食物源性則常為集體發(fā)病及有共進(jìn)可疑食物史。某些沙門(mén)氏菌（如鼠傷寒沙門(mén)氏菌等）、腸致病性大腸桿菌（EPEC）、輪狀病毒和柯薩奇病毒等感染可在醫(yī)院產(chǎn)房嬰兒室、兒科病房、托幼機(jī)構(gòu)發(fā)生暴發(fā)或流行。,,（二）臨床表現(xiàn)

18、1 腹瀉（1）大便每日≥3次 （2）糞便的性狀異常：可為稀便、水樣便、亦可為粘液便、膿血便。（3）可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱及全身不適等。病情嚴(yán)重者，因大量丟失水分引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克。2 已除外霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒。,（三）實(shí)驗(yàn)室檢查,1 糞便常規(guī)檢查：糞便可為稀便、水樣便、粘液便、血便、或膿血便。鏡檢可有多量紅、白細(xì)胞，也可僅有少量或無(wú)細(xì)胞。2 病原學(xué)檢查：糞便中可檢出霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒以外的致病

19、微生物，如腸致瀉性大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、輪狀病毒或藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)等，或檢出特異性抗原、核酸或從血清檢出特異性抗體。臨床診斷：具備（二）和（三）中的1，（一）供參考。病原確診：臨床診斷加（三）中的2。,傳染?。和话l(fā)公共衛(wèi)生事件； 暴發(fā)疫情（局部地區(qū)短期內(nèi)突然發(fā)生多例）。突發(fā)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌性痢疾：10例/3天?集體單位；或死亡2例。感染性腹瀉：20例/周?集體單位；或死亡1例 。,醫(yī)療單位腹瀉病門(mén)診設(shè)置

20、標(biāo)準(zhǔn)及工作規(guī)范 ---疫情報(bào)告,做好門(mén)診數(shù)旬報(bào)霍亂的報(bào)告(每周零報(bào)告)發(fā)現(xiàn)霍亂病人和疑似病人, 應(yīng)立即報(bào)告醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo),由院領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告駐地疾控中心進(jìn)行處理。出現(xiàn)傷寒和副傷寒疑似病人，痢疾病人或其他腹瀉病人突然增多，就診腹瀉病人住址比較集中的情況時(shí),也應(yīng)盡快報(bào)告院領(lǐng)導(dǎo)。 傳染病死亡,霍亂的報(bào)告,城鎮(zhèn)應(yīng)于2小時(shí)內(nèi)農(nóng)村應(yīng)于6小時(shí)內(nèi)方式：網(wǎng)

21、絡(luò)直報(bào) 電話,要求逢瀉必檢,開(kāi)展霍亂弧菌培養(yǎng)（含O139）：對(duì)就診的病人快診率要求達(dá)到100％。水樣便病人應(yīng)進(jìn)行霍亂細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)，疑似患者全部檢索，要求霍亂弧菌分離培養(yǎng)率必須達(dá)到10％以上，并且要求同時(shí)進(jìn)行O1和O139群霍亂弧菌檢測(cè)。無(wú)檢驗(yàn)條件的鄉(xiāng)鎮(zhèn)級(jí)醫(yī)院和其它單位，一旦發(fā)現(xiàn)可疑病人，應(yīng)立即將標(biāo)本送指定單位檢驗(yàn)，不要漏診病人。,,縣級(jí)及以上醫(yī)院和有條件的其它醫(yī)院，發(fā)現(xiàn)O 157：H7感染的可疑病人（

22、如血便、血性腹瀉的病例）要登記報(bào)告并及時(shí)采樣，進(jìn)行O 157：H7大腸桿菌的分離培養(yǎng)。目前對(duì) O 157：H7感染的疑似或確診病人暫按乙類(lèi)傳染病報(bào)告。開(kāi)展痢疾桿菌的培養(yǎng)。每所醫(yī)院每年上送痢疾菌株至少5株。,,霍亂等感染性腹瀉實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù),感染性腹瀉病原菌實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù),霍亂弧菌的檢驗(yàn)O157:H7大腸桿菌的檢驗(yàn)志賀氏菌的檢驗(yàn)傷寒、副傷寒的檢驗(yàn)小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的檢驗(yàn)空腸彎曲菌的檢驗(yàn)致腹瀉原蟲(chóng)的檢驗(yàn)病毒性腹瀉的檢驗(yàn),

23、三、霍亂弧菌的實(shí)驗(yàn)診斷,樣本采集、送檢和保存 霍亂的病原學(xué)檢查霍亂弧菌的快速診斷霍亂弧菌的噬菌體-生物分型,霍亂病原檢索對(duì)象,監(jiān)測(cè)點(diǎn)常規(guī)監(jiān)測(cè)腹瀉病門(mén)診所有腹瀉病人的病原檢測(cè)重點(diǎn)人群的檢索：病人的密切接觸者、與流行有關(guān)的重點(diǎn)人群（大型建筑工地、流動(dòng)人口、食品加工及餐飲業(yè)服務(wù)人員、托幼機(jī)構(gòu)和環(huán)衛(wèi)部門(mén)工作人員 ）可能受污染的食品檢索：海水產(chǎn)品、熟肉制品、冷飲及涼拌食品水體的檢索其他外環(huán)境標(biāo)本的檢索：公廁糞便、蒼蠅等,樣本采集、

24、送檢和保存,（一）標(biāo)本的采集和送檢 標(biāo)本采集的好壞，對(duì)整個(gè)檢驗(yàn)工作的質(zhì)量影響很大。糞便標(biāo)本的采集應(yīng)爭(zhēng)取在發(fā)病早期、服用抗菌藥物之前并盡快送到檢驗(yàn)室。,,糞便：標(biāo)本的采集以病人糞便為主，水樣便采取1～3mL，成形便采取指甲大小的糞量，亦可用直腸棉拭或采便管由肛門(mén)插入直腸內(nèi)3～5cm處采取。急性期病人取水樣便標(biāo)本在增菌培養(yǎng)的同時(shí)可取其粘液絮片或用棉拭子直接接種于堿性瓊脂、TCBS瓊脂培養(yǎng)基。帶菌者糞便都應(yīng)接種堿性蛋白胨水培養(yǎng)基，

25、放37℃增菌6～8h后，從菌膜下表層取一接種環(huán)培養(yǎng)物，劃線接種于堿性瓊脂、TCBS瓊脂培養(yǎng)基。,,采集的標(biāo)本不能立即檢查的，要放入堿性蛋白胨水或文臘二氏保存液或插入Cary-Blair二氏半固體保存培養(yǎng)基中。標(biāo)本與保存液比例約為1∶5。 送檢標(biāo)本時(shí)應(yīng)填寫(xiě)“標(biāo)本送檢單”寫(xiě)明姓名、地址、發(fā)病時(shí)間、采集時(shí)間、臨床診斷等。運(yùn)送過(guò)程中注意安全，勿污染容器口外壁，專(zhuān)人運(yùn)送，送檢箱每次用后須做消毒處理,O1群和O139群霍亂弧菌檢驗(yàn)程序,1、直接

26、分離培養(yǎng)2、增菌后分離培養(yǎng),（二）分離培養(yǎng),直接分離培養(yǎng),急性期病人水樣大便標(biāo)本在增菌培養(yǎng)的同時(shí)可取其粘液絮片或用棉拭子直接接種在選擇性培養(yǎng)基上。目前常用的強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基有TCBS瓊脂、堿性瓊脂、慶大霉素瓊脂等。霍亂弧菌在TCBS上因分解蔗糖呈黃色菌落,此是 WHO推薦使用培養(yǎng)基。,增菌,所有糞便標(biāo)本都應(yīng)接種堿性蛋白胨水培養(yǎng)基，放37℃增菌6～8h后，從菌膜下表層取一接種環(huán)培養(yǎng)物，劃線接種于強(qiáng)選擇性堿性瓊脂和TCBS瓊脂平板各兩個(gè)。,

27、各種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況,疑似菌落初步鑒定,每個(gè)堿性瓊脂、TCBS瓊脂平板上各挑取5個(gè)以上(少于5個(gè)的全部挑取)疑似菌落接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板/營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面或克氏雙糖置37℃18-24h純培養(yǎng)(即每份樣品至少?gòu)?個(gè)分離平板上獲得約10株可疑菌落菌株)，取斜面純培養(yǎng)物進(jìn)行血清鑒定、并涂片進(jìn)行革蘭氏染色及氧化酶試驗(yàn)等。挑取可疑菌落作玻片凝集與O1群多價(jià)和單價(jià)血清作玻片凝集反應(yīng)與O139群抗血清做凝集反應(yīng),血清鑒定自分離培養(yǎng)基上挑取可疑菌落

28、與01群霍亂弧菌多價(jià)/單價(jià)診斷血清及0139群霍亂弧菌診斷血清做玻片凝集試驗(yàn)。如可疑菌落在血清中很快(一般在10s內(nèi))出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的明顯凝集，在生理鹽水中不凝集者判為陽(yáng)性?？梢删漭^多時(shí)，應(yīng)挑選5個(gè)以上的菌落逐個(gè)進(jìn)行玻片凝集檢查，必要時(shí)，取原劃線菌落邊緣透明部分再做玻片凝集，均為陰性時(shí)方可報(bào)告未檢出01群及0139群霍亂弧菌。對(duì)首發(fā)病例菌株需送上一級(jí)實(shí)驗(yàn)室做進(jìn)一步鑒定或復(fù)查。,快速輔助診斷,制動(dòng)試驗(yàn)玻片凝集試驗(yàn)免疫熒光球試驗(yàn)?zāi)z體金

29、免疫層析快速檢測(cè)PCR試驗(yàn)

30、

31、 SPA試驗(yàn)等。,制動(dòng)試驗(yàn),急性期病人的糞便內(nèi)含有大量的弧菌，取一滴水樣便滴在玻片上直接鏡檢（最好用暗視野或相差顯微鏡）可見(jiàn)具有流星狀動(dòng)力的細(xì)菌，當(dāng)加入一滴01群霍亂免疫血清后，運(yùn)動(dòng)停止，凝集成塊為陽(yáng)性。

32、,快診試紙條--膠體金免疫層析快速檢測(cè)技術(shù),【原理】采用膠體金免疫層析雙抗體夾心法，檢測(cè)標(biāo)本中霍亂弧菌。以膠體金作為標(biāo)記物，交聯(lián)抗霍亂弧菌單克隆抗體，與樣品中的霍亂弧菌結(jié)合。形成雙抗體夾心一步法，呈現(xiàn)出目測(cè)可見(jiàn)的紅色條帶，顯色程度與抗原含量成正比。 注： 快診試紙條：分O1群和O139群,【實(shí)驗(yàn)操作步驟】,1、待檢樣品的處理1)        直接檢測(cè)：:水樣便

33、直接檢測(cè)。2)        增菌檢測(cè)：水樣便：1-2ml接種于8-9ml堿性蛋白胨水，37℃培養(yǎng)6-8h或過(guò)夜。,,2、快速檢測(cè)卡加樣： 1)將檢測(cè)卡放置與潔凈、干燥的工作臺(tái)上 2)實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)將試劑恢復(fù)至室溫 3)用吸管取前增菌液樣品2-3滴，加入檢測(cè)卡一端的加樣孔，計(jì)時(shí)并觀察反應(yīng)結(jié)果 4)2-15分鐘內(nèi)觀察結(jié)果，20分鐘之后結(jié)果不能判讀,【結(jié)果判斷】,

34、有效結(jié)果目測(cè)可見(jiàn)有紅色條帶陽(yáng)性結(jié)果可見(jiàn)兩條紫紅色線條：檢測(cè)線和質(zhì)控線 陰性結(jié)果僅見(jiàn)一條紫紅色質(zhì)控線 無(wú)效結(jié)果無(wú)任何線條出現(xiàn)，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)無(wú)效,,膠體金霍亂檢測(cè)試劑盒,快速診斷初步報(bào)告,1、快診斷實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性者同時(shí)涂片染色和懸滴法觀察，如鏡檢為革蘭染色陰性弧菌或懸滴細(xì)菌呈“魚(yú)群穿梭樣”運(yùn)動(dòng)，可作初診報(bào)告。為開(kāi)展疫情處理提供依據(jù)；2、待營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板/營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面或克氏雙糖置純培養(yǎng)物生長(zhǎng)良好后，再進(jìn)行傳統(tǒng)的鑒定以確認(rèn)或訂正報(bào)告。３、快診

35、斷試驗(yàn)獲得陰性結(jié)果，不能放棄分離培養(yǎng)，主張快診斷試驗(yàn)僅用于應(yīng)急疫情處理時(shí)，作為應(yīng)急使用。,四、霍亂弧菌的鑒定,鑒定標(biāo)準(zhǔn)以血清學(xué)性狀為主，結(jié)合形態(tài)學(xué)和生化學(xué)性狀作出判定。血清學(xué)性狀以玻片凝集作檢查；形態(tài)學(xué)上可作革蘭氏染色、觀察形態(tài)、檢查動(dòng)力；生化學(xué)上輔以氧化酶試驗(yàn)和粘絲試驗(yàn)即可。必要時(shí)再做其他試驗(yàn)，以便于類(lèi)似細(xì)菌做鑒別,O157:H7大腸桿菌,腸出血性大腸桿菌（EHEC）是一種近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的可造成人體嚴(yán)重健康危害的致病菌。 O1

36、57：H7 大腸桿菌屬于腸出血性大腸桿菌(EHEC)的一個(gè)最常見(jiàn)、最重要的血清型。,感染O157：H7 大腸桿菌后,主要臨床癥狀為：突發(fā)性腹痛,初期有水樣便,隨即出現(xiàn)血性糞便,低燒或不發(fā)燒 , 嚴(yán)重者可導(dǎo)致腎溶血性尿毒綜合癥（HUS）,血栓性血小板減少性紫癜（TTP）和其它臟器的損傷。因此,快速、準(zhǔn)確做出診斷為臨床治療、防止該菌傳播，提供信息等具有特別重要的意義。,1、傳染源,病人 平均排菌時(shí)間7天，7天后不易測(cè)到。出血性腸炎、溶血

37、性尿毒綜合征病人排菌時(shí)間更長(zhǎng)，報(bào)道最長(zhǎng)達(dá)124天。 無(wú)癥狀攜帶者家畜家禽作為傳染源更重要 帶菌時(shí)間長(zhǎng)，病原菌在動(dòng)物糞便中生存時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)半年以上，攜帶病原菌的家畜家禽排菌時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)一年。更易污染肉、蛋、奶類(lèi)制品及環(huán)境。帶菌家畜、家禽主要有牛、羊、豬等，雞、鴨、鵝、馬、鹿、狗、兔等也帶菌。,2、傳播途徑,EHEC感染是糞-口傳播，以食源性傳播為主，水源性傳播和接觸傳播也是重要的傳播途徑。有些爆發(fā)可以多途徑并存。,培

38、養(yǎng)特性：兼性厭氧菌，30—42℃生長(zhǎng)良好，最適溫度37 ℃普通瓊脂平板 凸起光滑、濕潤(rùn)、乳白色、渾濁、邊緣整齊的菌落麥康凱瓊脂平板 :發(fā)酵乳糖，菌落呈紅色或粉紅色山梨醇麥康凱瓊脂平板 山梨醇陰性或遲緩發(fā)酵，菌落為無(wú)色或中心為淺粉紅色,O157:H7大腸桿菌與其他大腸桿菌的主要區(qū)別：,O157：H7大腸桿菌不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵山梨醇。產(chǎn)生志賀樣毒素(SLT)。,O157:H7大腸桿菌實(shí)驗(yàn)室診斷,（一）樣品的采集送檢1. 糞便標(biāo)本

39、的采集應(yīng)爭(zhēng)取在發(fā)病早期，服用抗菌藥物之前，并盡快送到檢驗(yàn)室。采集腹瀉病人糞便以血性水樣便為主，也可以用直腸棉拭或采便管采取，肛拭標(biāo)本應(yīng)染有糞便。 2. 腹瀉病人血性水樣便標(biāo)本從采集到送檢不得超過(guò)24h,采集的標(biāo)本應(yīng)插入卡里--布萊爾（Cary-Blair）半固體保存培養(yǎng)基中，立即送試驗(yàn)室接種于培養(yǎng)基。培養(yǎng)基要定期調(diào)換，保持培養(yǎng)液新鮮。,血清學(xué)診斷,在平板上挑選可疑菌落與O157診斷血清、H7血清作試探性凝集試驗(yàn)，若不凝集，但