拮抗放線菌E001菌株對(duì)蔬菜灰霉病的生物防治.pdf

1、蔬菜灰霉病是一種世界性的真菌病害，經(jīng)常可以造成大棚蔬菜特別是番茄的毀滅性危害。由于該病菌對(duì)化學(xué)殺菌劑很容易產(chǎn)生抗藥性，而且長(zhǎng)期大量使用化學(xué)農(nóng)藥，造成環(huán)境污染。本文從土壤中分離并篩選出對(duì)灰霉病菌具有拮抗作用的生防放線菌E001菌株，并對(duì)該菌株進(jìn)行鑒定，研究了菌株的發(fā)酵條件、發(fā)酵濾液的穩(wěn)定性，初步研究了拮抗菌株產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)對(duì)灰霉病菌的作用方式，以及對(duì)灰霉病的生防效果，得到如下結(jié)果：
　　 1.從4種土樣中篩選獲得了420株放線菌，

2、通過(guò)對(duì)峙培養(yǎng)初步篩選出15個(gè)對(duì)灰霉病菌具有較強(qiáng)拮抗作用的放線菌菌株，其中菌株E001不僅對(duì)灰霉病菌的拮抗作用強(qiáng)，還對(duì)其他植物病原真菌(如水稻紋枯病菌、辣椒炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等)也有拮抗作用，同時(shí)，E001菌株的發(fā)酵濾液對(duì)灰霉病菌有拮抗作用，因此，E001菌株可作為防治灰霉病的候選放線菌菌株。
　　 2.依據(jù)放線菌鑒定的方法，E001菌株的培養(yǎng)特征、形態(tài)學(xué)特征、生理生化特征符合鏈霉菌(Streptomyces sp.)的特征。

3、16S rDNA序列測(cè)定結(jié)果表明，E001菌株與瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)相似度最高，因此，將該放線菌菌株歸為瘡痂病鏈霉菌。
　　 3.放線菌E001菌株發(fā)酵條件試驗(yàn)結(jié)果表明，E001菌株的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為小米浸汁培養(yǎng)基，最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH為7.5，發(fā)酵溫度為28℃，發(fā)酵時(shí)間為4d，碳源為蔗糖，氮源為牛肉膏，接種量為6％，搖床轉(zhuǎn)速為220r/min。
　　 4.放線菌E001

4、菌株抑菌活性物質(zhì)的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，E001菌株發(fā)酵濾液對(duì)紫外線的穩(wěn)定性較好。E001菌株發(fā)酵濾液的抑菌活性隨外界環(huán)境溫度的升高，活性逐漸降低。E001菌株發(fā)酵濾液在自然pH(pH6.5)條件下，抑菌活性最高，pH值的增大或降低，都會(huì)影響發(fā)酵濾液的抑菌活性。貯藏穩(wěn)定性則表現(xiàn)為低溫貯存更有利，但超過(guò)20d也對(duì)活性有影響。
　　 5.E001菌株對(duì)灰霉病菌作用方式的研究結(jié)果表明，E001菌株的發(fā)酵濾液能夠強(qiáng)烈抑制灰霉病菌菌絲的生長(zhǎng)

5、，使灰霉病菌菌絲頂端膨大，分枝增多，畸形扭曲，菌絲體出現(xiàn)空泡，細(xì)胞壁破損，甚至消解。E001菌株發(fā)酵濾液對(duì)灰霉病菌分生孢子萌發(fā)有強(qiáng)抑制作用，分別稀釋2倍、10倍時(shí)，對(duì)灰霉病菌分生孢子萌發(fā)的抑制率為99.37％、97.31％。
　　 6.E001菌株發(fā)酵濾液對(duì)離體葉片、果實(shí)上灰霉病的預(yù)防效果均在99％以上，其中，對(duì)黃瓜果實(shí)灰霉病的預(yù)防效果顯著高于50％多菌靈可濕性粉劑500倍液的處理；治療效果也較好(56.75％-76.81％)。